精選優質文檔-----傾情為你奉上精選優質文檔-----傾情為你奉上專心---專注---專業專心---專注---專業精選優質文檔-----傾情為你奉上專心---專注---專業總蛋白試劑盒（雙縮脲比色法）標準操作程序摘要本試劑盒供醫療機構用于體外定量測定人血清或血漿中的總蛋白含量。適用范圍程序適用于AU5811自動生化分析儀檢測人血清或血漿中的總蛋白含量。職責使用AU5811自動生化分析儀進行測定總蛋白濃度的工作人員要嚴格按照本SOP程序進行，室負責人監督管理；本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經生化室負責人、科主任簽字批準生效。檢測方法上海科華生物工程股份有限公司生產的總蛋白試劑盒采用的是雙縮脲比色法。原理蛋白質中的肽鍵在堿性條件下，與銅離子反應生成紫紅色絡合物，并且引起550nm處吸光度的上升。由于反應所產生的化合物在波長550nm處有吸收峰,所以在一定底物濃度范圍內,550nm處吸光度的變化值與樣本中總蛋白的含量成正比。儀器AU5811自動生化分析儀試劑試劑來源：上海科華生物工程股份有限公司提供試劑瓶內主要成分：測定：酒石酸鉀鈉≥5g/L試劑：硫酸銅≥2g/L、碘化鉀≥1g/L、NaOH≥30g/L校準品：白蛋白（含量見瓶簽）試劑穩定性：未打開試劑在2-8℃避光保存可至失效期。校準品使用后應密封保存，以免液體揮發。標準品和質量控制校準程序：使用科華公司的校準品對自動分析儀進行校準。按照公司標準品使用要求，并以9g/L氯化鈉溶液或去離子水為空白，經校準測定，儀器自動對標準品通過合適的數學模型繪制校準曲線。質控品：使用羅氏公司提供的生化復合定值質控血清作為室內質控品。每日在測定前做一次質控加試劑后做一次質控。該質控品為干粉包裝，在2-8℃冰箱可穩定到失效期，使用前用5ml去離子水復溶，待質控物充分溶解（大約30分鐘）后使用。質控數據管理：按程序對檢驗后的質控后結果進行轉換，及時質控數據進行分析處理，如出現失控值，應及時分析失控原因，并填寫好相關失控記錄。質控判斷規則：按《Westgard多規則質控方法測定標準操作程序》室間質評：分別參加河北省室間質評，對回報的室間質評結果按《室間質量評價程序》進行處理。標本標本要求：新鮮無溶血現象的血清，血漿可用肝素或EDTA抗凝。樣本于2-8℃避光保存，可穩定7天，或可冰凍保存，但不能反復凍融。標本拒收：由實驗室人員核收送來標本，如有溶血、已被污染、標識不清或與申請單不符狀況，一律要求重新留取標本。標本處理：收集編號后離心獲取血清/血漿以備檢測使用。測定程序：分析參數：詳見參數表。操作步驟：簽收樣本→離心→上機檢測→審核報告→簽發報告→標本保存。獲取結果：在AU5811儀器上或AU5811傳送的中文系統電腦上查找相應結果。結果報告：對檢驗后的結果進行審核，系統分析，判斷結果的可報告性。可報告的結果直接發報告，對不可報告結果進行復檢后發報告。計算標準品校準項目后，測定室內質控，質控結果符合質控要求后方可測定樣本。無需手工計算，每個標本的結果自動打印。廢液處理參閱檢驗科《安全手冊》廢液處理標準規程處理。操作性能：可報告范圍：1.74-100g/L；若樣本含量超過線性范圍，請用生理鹽水稀釋樣本后再測定，結果乘以稀釋倍數；線性相關系數r應不小于0.990；線性相對偏差應在±15%的范圍內。特異性/干擾：樣本中Vc≤4g/L,血紅蛋白≤3g/L,膽紅素≤171mol/L對測定結果的影響可忽略。精密度：批內精密度CV≤6%；批間相對極差≤6%準確度：用質控品做樣本，其測定結果應在該批質控品規定的范圍內。分析靈敏度：測定本試劑盒內所附校準品（50g/L），其吸光度變化值應在0.10-0.50A之間。注意事項：試劑盒僅用于體外診斷。使用試劑時請根據實際使用量多少，將試劑倒入干凈容器內再測定，其余試劑蓋緊后放回冰箱。如試劑變渾濁，或以純化水作空白，試劑在550nm處吸光度大于0.60A，請勿使用。測定結果僅作為各種疾病的臨床輔助診斷依據。本試劑中具有一定腐蝕性，應避免與皮膚及粘膜。如不慎接觸，應用大量清水沖洗，如誤服，應立即上醫院診治。參考范圍：靜臥時：60-78g/L;走動后：64-83g/L;各實驗室應建立自己的參考值范圍。臨床意義：總蛋白系白蛋白及球蛋白之和，其臨床意義決定于白、球蛋白的變化。增高可見于各種原因失水所致血液濃縮（如腹瀉、嘔吐、休克、高熱），引起球蛋白單克隆或多克隆性增高的疾病（見球蛋白項）；降低見于各種原因引起的血清蛋白質丟失和攝入不足，以及蛋白質合成障礙（見白蛋白項）。臨床上，總蛋白往往和白蛋白一起作為肝硬化的輔助診斷指標。支持性文件：AU5811自動生化分析儀使用說明書。AU5811自動生化分析儀分析參數。上海科華生物工程股