臨床微生物標本采集與運送

血培養標本采集、運送與報告標準操作規程

－、血培養指征

患者出現寒戰，體溫超過38℃或低體溫，懷疑血流感染時，尤其存在以下情況時，應抽血做細菌和真菌培養：醫院內肺炎；留置中心靜脈導管超過72h；感染性心內膜炎；骨髓炎；有嚴重基礎疾病、免疫缺陷伴全身感染癥狀；臨床醫生懷疑有血流感染可能的其他情況。

＝、采血時機一旦懷疑有血流感染可能，應立即采血做血培養，最好在抗菌治療前或停用抗菌藥物24h后，以寒戰、發熱時采集為宜。三、采血流程（－）消毒1.培養瓶消毒程度：用消毒液消毒培養瓶橡皮塞，待干燥后使用。2.皮膚消毒程序：用消毒液從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區域直徑達5cm以上，待消毒液揮發干燥后（常需30s以上）穿刺采血。（二）靜脈穿刺和培養瓶接種成人用注射器無菌穿刺取血后，排盡針頭內空氣，直接注入血培養瓶，勿換針頭（如果行第二次穿刺或用針頭取血時，應換針頭），先注于厭氧培養瓶，避免注入空氣，然后注入需氧培養瓶，輕輕混勻以防血液凝固。近年來，臨床普遍采用負壓血培養瓶，將血從患者靜脈直接吸入血培養瓶，減少污染環節。（三）注意事項

1.檢驗單需注明抗菌藥物使用情況，血液采集時間和部位，臨床診斷等患者信息。2.采用部位通常為肘靜脈，疑為細菌性內膜炎時以肘動脈或股脈采血為宜，切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采血。除非懷疑有導管相關的血流感染，否則不應從留置靜脈或動脈導管取血，因為導管易被皮膚正常菌群污染。3、采血次數：對于成年患者，應該同時在兩個部位采集血標本，在兩個不同部位分離到同樣菌種才能確定是病原菌。

4、細菌性心內膜炎:在2h內取血3次，每次間隔不少于30min；必要時次日在做血培養2次5、采血量：以培養基與血液之比10:1為宜，以稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質。采血量過少會明顯降低陽性率。成人每次每培養瓶采血8-10ml，嬰幼兒每次每培養瓶采血2ml。五、報告要求（一）緊急口頭電話報告血培養出現陽性報警時，立即進行革蘭氏染色、鏡檢，并在最短時間內將結果向臨床主管醫生進行緊急口頭(電話)報告。口頭報告包含以下內容，并記錄在案。（1）報告者全名（或工號）；

（2）報告的時間；（3)所聯系醫生的全名（或工號）；（4）報告鏡檢結果并強調其緊急價值；（5）確認臨床醫生收到報告并復述結果。（二）最終結果（書面）報告(1)無菌生長（培養5天無需氧菌和厭氧菌生長）；（2）陽性培養結果（最終鑒定結果最終藥敏結果）。（三）其他報告和記錄1、標本被拒收時，需即刻通知臨床立即重新采血，并記錄在案。2.最終結果與緊急口頭報告結果不符，需要變更時，需立即通知臨床，同時必須在書面報告上提供正確的結果，注明變更的內容。三、采集方法

（一）自然咳痰法與霧化導痰法

1、用物準備：無菌容器（盒）、生理鹽水（250ml或500ml)、化驗單。2、核對患者床號、姓名等。3、無痰或痰量極少者可用3％～5％氯化鈉溶液5ml霧化吸入約5min后留取痰液。4、如有可能，應在醫護人員直視下留取清晨第二口痰。囑咐患者留取前摘去牙托，清潔口腔，如刷牙后反復用生理鹽水漱口；深吸氣后用力自氣管深部咳出痰液，置無菌容器內。應盡可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入樣品，不應用紙巾包裹痰液。（二）支氣管鏡法

鼻或口腔插入支氣管鏡。常用采集方法有經支氣管鏡吸引、支氣管肺泡灌洗、防污染毛刷采樣或防污染支氣管肺泡灌洗等。（三）經人工氣道吸引法

1、用物準備：負壓吸引器、生理鹽水、一次性吸痰管、無菌手套、無菌容器（試管）、化驗單。

2、核對患者床號、姓名等。3.將患者頭部轉向操作者一側。4、進行手衛生后將一次性吸痰管末端拆開，連接吸引器，調節吸引器至適宜負壓（成人：40.0～53.3kPa；小兒：﹤40.0kPa）。5、將一次性吸痰管外包裝去除，戴手套持吸痰管試吸生理鹽水，檢測管道是否通暢。6、折疊一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工氣道至適宜深度，放開吸痰管末端，輕柔、靈活、迅速地左右旋轉上提吸痰管吸痰。見吸痰管內有痰液吸出，即折疊一次性吸痰管退出，將一次性吸痰管與吸引器分離（使人工呼吸機者，一次吸痰時間不超過15s，吸痰前后需吸入高濃度氧氣1～2min)。7、將痰液注入無菌容器（試管）內，如痰液黏稠可用一次性針筒向吸痰管末端注入少量生理鹽水，將痰液沖入無菌容器（試管）內。二、容器

1、較大的標本：含有少量生理鹽水的帶螺紋口的無菌塑料容器。

2、標本較小或拭子標本：MW﹠ETRANSWAB運輸培養基，適用于需氧和厭氧菌。三、采集方法（一）封閉性膿腫1、注射器穿刺抽取膿液。2、若無法抽到膿液，應先皮下注射少量無菌生理鹽水，再次穿刺抽吸膿液；若膿液過多，應先切開引流，在基底部或膿腫壁采集標本。膿液的量以大于1ml為宜。3、排除注射器內部及針頭的氣體，用無菌橡皮塞封閉針頭送檢；或直接打入血培養瓶中。疑為厭氧菌，應迅速將膿液打入厭氧血培養瓶中。（二）組織和活檢標本1、采集足夠大的組織，體積以1㎜為宜，避免在壞死區域采集。2、將小塊的組織放在運輸培養基內；較大的放在無菌容器中，并加入少量無菌生理鹽水。（三）開放傷口

1、無菌生理鹽水徹底沖洗淺表部位，去除表面的滲出物和碎屑。

2、用拭子深入傷口的基底部或傷口-正常組織邊緣部采集兩個標本，分別用于培養和革蘭氏染色。四、標本的識別

填寫患者信息、標本類型（深部組織、表淺組織、膿腫和穿刺物等）、標本的來源（腹腔、腿和上臂等），記錄標本采集的日期和時間及是否在使用抗菌藥物前采集，選擇檢查項目（需氧培養或厭氧培養）。五、標本的送檢為了更好的分離病原菌，標本應在采集后的30min內送到實驗室。送檢時應保持標本的濕潤（盡量采用運輸培養基，組織可以放在生理鹽水中）。在送檢前或運送過程中，禁止將標本放在冰箱。若不能及時送檢，運輸培養基中標本應室溫保存，但最長不可超過24h。

尿液標本采集和運送標準操作規程一、采集時機宜為抗菌藥物使用之前的清晨第一次尿液。二、采集方法（一）清潔中段尿1.女性：采樣前用肥皂水或0.1%的高錳酸鉀溶液等沖洗外陰，用手指分開陰唇，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10～20ml于無菌容器內。2.男性：采樣前用肥皂水或0.05%～0.1%的聚維酮碘（碘伏）溶液等消毒液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10～20ml于無菌容器內。3.回腸造口導尿管法：摘除導管，棄去里面的尿液，先用0.05%～0.1%的聚維酮碘溶液等消毒劑消毒吻合口，再將導尿管插入到清潔的吻合口，直至筋膜的深部采集10～20ml尿液于無菌容器內。（四）小兒收集包對于無自控能力的小兒可應用收集包采集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產生假陽性，所以只有在檢驗結果為陰性時才有意義。如果檢驗結果為陽性，應結合臨床進行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或導尿法留取尿液進行復檢。三、標本運送標本采集后應及時送檢并接種，室溫下保存時間不應超過2h（夏季保存時間應適當縮短或冷藏保存）。如果不能及時運送或接種，應4℃冷藏，但保