1、第四章植物胚胎培養及離體授粉陳傳紅 制作本章內容提要：一、胚胎培養的概念、內容與意義二、胚胎培養的方法三、胚乳培養的意義與方法四、植物的離體受精陳傳紅 制作一、胚胎培養 什么是胚胎？植物在受精后，受精卵形成合子，隨即進行第一次分裂，進而形成分生組織和幼胚，再發育成成熟胚。什么是胚胎培養？是指對植物的胚、子房、胚珠和胚乳進行離體培養，使其發育成完整植株的技術。陳傳紅 制作胚胎培養的意義1、通過離體授粉（試管受精）可克服種屬間受精障礙2、打破種子休眠3、縮短育種周期4、克服種子活力低下和自然不育等。5、用于研究胚胎發育的生理生化變化，以及影響胚發育的因素陳傳紅 制作植物不育機理1、自然隔離拒絕變異

2、種受精拒絕自花受精2、植物受精不育障礙的幾中形式花粉在柱頭上不萌發花粉管萌發，但胚敗育無同源染色體染色體，不能配對陳傳紅 制作應用縮短育種周期 如：柑橘克服種子生活力低下，使萌發率提高克服種子自然不育陳傳紅 制作胚胎培養的內容與概念胚胎培養的類型1、成熟胚培養2、幼胚胎培養胚珠培養1、未受精的胚胎培養2、受精后的胚胎的培養3、胚乳培養4、試管受精陳傳紅 制作胚發育和種子結構合子發育成胚珠被發育成種皮受精極核發育成胚乳陳傳紅 制作離體幼胚的培養方法1、材料的選擇與滅菌不同植物根據目的的不同，選材會有所不同，如：胚發育時期，取材時間胚胎滅菌方法。 陳傳紅 制作2、分離與培養幼胚培養的操作方法與成熟

3、胚培養方法基本相同，值得注意的是切取幼胚必須在高倍解剖鏡下進行，操作時要特別細心，盡量取出完整的胚。 3、三種明顯不同的生長方式一是，繼續進行正常的胚胎發育，維持“胚性生長”；二是，在培養后迅速萌發成幼苗，而不繼續進行胚性生長，通常稱為“早熟萌發”；三是，多數情況下，胚在培養基中能發生細胞增殖形成愈傷組織，并由此再分化形成多個胚狀體或芽原基。 陳傳紅 制作幼胚培養的關鍵： 提供幼胚所必需的營養和環境條件。影響培養的條件：(1) 培養基 (2) 生長調節物質 (3) 天然提取物的作用 (4) 溫光條件（以光暗交替培養較為有利） (5) 其他，如有較高的蔗糖濃度，高滲透 壓，較高濃度的氨基酸及無機

4、鹽。 (6) 培養基pH陳傳紅 制作胚齡與胚性發育的關系1、培養已經分化的成熟胚；2、培養未分化的幼胚；3、早期胚球培養。陳傳紅 制作2、胚乳離體培養的意義胚乳是由兩個單倍的極核和一個單倍的精子結合而成的3倍體組織。由它可獲得無子結實的3倍體植株，進而可將它加倍成6倍體植株。 3、胚乳離體培養的研究進展（1）僅能形成愈傷組織；（2）達到器官水平 ；（3）能形成完整植株。陳傳紅 制作4、胚乳培養的方法與技術關鍵胚乳培養的方法1）胚乳外植體的置備2）胚乳愈傷組織誘導與形態建成3）三倍體后代的特征 a、形態特征；b、再生植株的倍性。關鍵技術1）胚乳發育時期的影響2）胚性因子的作用3）培養基pH對胚乳

5、組織培養的影響陳傳紅 制作5、胚乳培養過程胚乳胚狀體發育成苗不定芽苗柚，柑桔和棗大麥, 水稻, 玉米, 蘋果, 馬鈴薯愈傷組織形態發生陳傳紅 制作胚珠培養：是將授粉的子房在無菌的條件下解剖后， 取出胚珠置于培養基培養的過程。有時也把胚珠連同胎座一起取下來培養。優點：可以解決像蘭科植物成熟胚較小不易培養的問題；在未受精的胚珠培養中，可誘發大孢子發育成單倍體，用于單倍體育種。三、植物胚珠和子房培養陳傳紅 制作1、作用a. 促進原胚繼續生長，使雜種幼胚發育成熟；成功例子：四季桔、柑、鳳仙花、洋蔥成功的植物：西葫蘆、萵苣、百合等b. 未授粉胚珠和子房，誘導孤雌生殖，產生雌性單倍體陳傳紅 制作2、外植體消毒和接種3、培養基及培養條件4、離體培養胚胎的發育 胚珠或授粉子房培養，合子胚可以更好地發育成植株。但如果條件不適，也容易從幼胚或珠心組織產生愈傷組織。 蕓香科易產生珠心胚。培養胚珠，獲得大量珠心胚，用以品種復壯、快速繁殖和獲得無病毒苗。同時，通過珠心組織培養，產生胚性愈傷組織，建立胚性組織培養實驗體系。陳傳紅 制作四、植物的離體受