1、乙型肝炎病毒講義乙型肝炎病毒講義全球有3.5億 人口攜帶HBV我國為高流 行區，HBV攜 帶者達10%檢測指標？乙型肝炎病毒講義2全球有3.5億我國為高流乙型肝炎病毒講義2 乙型肝炎病毒分類 嗜 乙型肝炎病毒 肝 正嗜肝DNA病毒屬：土撥鼠肝炎病毒 DNA 地松鼠肝炎病毒 病 毒 DNA病毒屬：鴨乙型肝炎病毒 科 乙型肝炎病毒講義3 一、生物學性狀1.形態與結構 (1)大球形顆粒(2)小球形顆粒(3)管形顆粒乙型肝炎病毒講義4一、生物學性狀1.形態與結構 乙型肝炎病毒講義4 電鏡下的HBV乙型肝炎病毒講義5 電鏡下的HBV乙型肝炎病毒講義5(1)大球形顆粒(Dane顆粒)大球形顆粒：有感染性的

2、完整的病毒顆粒。直徑：42nm外層=包膜：脂質雙層+HBsAg、PreS1Ag、 PreS2Ag 主蛋白：HBsAg（226）中蛋白：HBsAg-PreS2Ag（281） 大蛋白：HBsAg-PreS2Ag-PreS1Ag（400）乙型肝炎病毒講義6(1)大球形顆粒(Dane顆粒)大球形顆粒：有感染性的完整內層=衣殼：20面體、27nm衣殼蛋白：HBcAg+ HBeAg核心：不完全雙鏈環狀DNA、 DND多聚酶等乙型肝炎病毒講義7內層=衣殼：20面體、27nm乙型肝炎病毒講義7(2)小球形顆粒小球形顆粒：直徑：22nm，中空顆粒。為過剩的表面抗原，無DNA。(3)管形顆粒管形顆粒：由小球形顆粒

3、聚集而成。乙型肝炎病毒講義8(2)小球形顆粒小球形顆粒：直徑：22nm，中空顆粒。為過剩2.HBV基因結構與功能1)HBV基因結構： 不完全雙鏈環狀DNA長鏈(負股)：3200核苷酸 短鏈(正鏈)：50100%粘性末端：5-250個核苷酸直接重復序列（DR1 DR2區） (5-TTCACCTCTGC)11DR作用:DNA成環,病毒復制 乙型肝炎病毒講義92.HBV基因結構與功能1)HBV基因結構：乙型肝炎病毒講義乙型肝炎病毒講義10乙型肝炎病毒講義10 2)HBV基因功能 開放讀框： S區、 C區、 P區、 X區 S區: S基因、PreS1基因、PreS2基因 HBsAg、 PreS1Ag、

4、PreS2Ag C區: PreC基因-C基因、 C基因 Pre-C蛋白HBeAg、 HBcAg 乙型肝炎病毒講義11 2)HBV基因功能乙型肝炎病毒講義11P區:DNA多聚酶X區:HBxAg反式激活HBV基因增強HBV基因的復制和表達反式激活宿主細胞的某些原癌基因肝癌 短鏈(正鏈)：復制 乙型肝炎病毒講義12P區:DNA多聚酶乙型肝炎病毒講義12 3.抗原組成(1)表面抗原(HBsAg) PreS1Ag、PreS2Ag(2)核心抗原(HBcAg) (3)e抗原(HBeAg)乙型肝炎病毒講義13 3.抗原組成(1)表面抗原(HBsAg)乙型肝 (1)表面抗原(HBsAg)1)存在于三型顆粒中；2

5、)是HBV感染的主要標志；3)可刺激產生：抗-HBs保護性抗體 和細胞免疫應答4)分亞型 抗原表位：a, d/y, w/r; 亞型：adr(漢)、adw(少數民族)、ayr、ayw；5)抗-HBs：有免疫力； 制備疫苗乙型肝炎病毒講義14 (1)表面抗原(HBsAg)1)存在于三型顆粒中； 制PreS1Ag、PreS2Ag1)具有吸附表位；2)與病毒的復制有關-病毒復制指標；3)可刺激產生：抗- PreS1 抗- PreS2： 見與急性肝炎恢復期的早期， 提示HBV正在或已經清除；4)抗-PreS1：較長 抗-PreS2：急性期血清，持續時間僅23個月； 阻斷結合乙型肝炎病毒講義15PreS1

6、Ag、PreS2Ag1)具有吸附表位； 阻斷結合乙(2)核心抗原(HBcAg)1）為衣殼蛋白，僅存在于Dane顆粒中；2）不易在血液中檢出；3）感染的肝細胞核、胞質、膜上存在；4）可刺激產生：抗-HBc非保護性抗體 和細胞免疫應答；5）抗HBc：IgM：提示BHV處于復制狀態， 具有強的傳染性； IgG：感染的標志；乙型肝炎病毒講義16(2)核心抗原(HBcAg)1）為衣殼蛋白，僅存在于Dane乙型肝炎病毒講義培訓課件乙型肝炎病毒講義18乙型肝炎病毒講義18 病毒抗原抗體系統檢測結果分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc結果分析+-HBV感染或無癥狀攜帶者+-急性或慢性乙型肝炎

7、，或無癥狀攜帶者+-+急性或慢性乙型肝炎（傳染性強，“大三陽”）+-+急性感染趨向恢復（“小三陽”）-+既往感染恢復期-+-既往感染恢復期-+既往感染或“窗口期”-+-既往感染或接種過疫苗乙型肝炎病毒講義19 病毒抗原抗體系統檢測結果分析HBsAgHBeAg抗-HBs 4.HBV的復制周期 乙型肝炎病毒講義20 4.HBV的復制周期乙型肝炎病毒講義20 5.動物模型與細胞培養 黑猩猩動物模型:致病機理、疫苗 鴨乙型肝炎病毒：篩選藥物、免疫耐受 機制 病毒DNA轉染的細胞培養系統：篩選藥物 乙型肝炎病毒講義21 5.動物模型與細胞培養乙型肝炎病毒講 6.抵抗力 1.抵抗力強于HAV 2.低溫、干

8、燥、紫外線：耐受 3.70乙醇：不被滅活 4.100 10分鐘可滅活；0.5%過氧乙酸、5%次氯酸鈉、環氧乙烷乙型肝炎病毒講義22 6.抵抗力乙型肝炎病毒講義22 二、致病性與免疫性 傳染源 乙型肝炎患者：潛伏期（30-160天）急性期、慢性期無癥狀HBV攜帶者 傳播途徑 血液、血制品等醫源性傳播：不嚴格集體預防接種、藥物注射 針刺、文身等 母嬰傳播：宮內感染、分娩、哺乳 生活密切接觸傳播：唾液、共用牙刷、剃須刀 性傳播：我國不是主要傳播方式 乙型肝炎病毒講義23 二、致病性與免疫性 傳染源乙型肝炎病毒致病與免疫機制 1.致病無癥狀HBV攜帶者 急性肝炎 慢性肝炎 重癥肝炎 與肝硬化和肝癌密切

9、相關乙型肝炎病毒講義24致病與免疫機制 1.致病乙型肝炎病毒講義24 2.免疫性細胞免疫：如HBcAg 具有T細胞表位， 特異性CTL的直接殺傷作用 細胞因子的抗病毒效應 細胞凋亡作用體液免疫： 如HBsAg、PreS1Ag、 PreS1Ag乙型肝炎病毒講義25 2.免疫性乙型肝炎病毒講義25 3.HBV的致病機制細胞介導的免疫損傷： CTL-HBcAg多肽急性肝炎：病毒感染少量肝細胞，CTL可將其全部殺傷。重癥肝炎：病毒感染大量肝細胞，細胞免疫過強。慢性肝炎：機體免疫力低下，不能殺傷大量感染細胞， 病毒不斷釋放，又無有效抗體中和病毒。慢性HBsAg攜帶者：垂直感染、成人感染。乙型肝炎病毒講義

10、26 3.HBV的致病機制細胞介導的免疫損傷： C體液免疫所致的免疫損傷：血清中：HBsAg- HBsAb, HBeAg- HBsAb 肝外損傷：膜性腎小球腎炎、皮疹、多發性關節炎、小動脈炎等，與重癥肝炎有關。自身免疫所致的損傷：肝特異性脂蛋白抗原(LSP):體液免疫、細胞免疫： LSP抗體、抗核抗體、抗平滑肌抗體 乙型肝炎病毒講義27體液免疫所致的免疫損傷：乙型肝炎病毒講義274.病毒變異與逃逸免疫1)S基因-a表位基因(145、126氨基酸)：點突變、插入突變 HBsAg- HBsAb不能結合、親和力 逃避體液免疫、診斷逃逸2)Pre-C基因：G1896A TGG28 TAG終止密碼子 H

11、BeAg合成障礙血清學表現不典型3)C基因：CTL靶抗原改變 CTL逃逸突變株病毒變異與逃逸免疫的作用：HBV感染慢性化乙型肝炎病毒講義284.病毒變異與逃逸免疫乙型肝炎病毒講義285.HBV與原發性肝癌流行病學調查：感染人群高217倍。Southen印跡核酸雜交：肝癌組織有HBV DNA整合，50%為X基因片段動物實驗：新生土撥鼠感染與HBV相似的土撥鼠肝炎病毒3年后，100%發生肝癌。乙型肝炎病毒講義295.HBV與原發性肝癌乙型肝炎病毒講義29三、微生物學檢查1.HBV抗原、抗體檢測 ELISA法： HBsAg- HBsAb； HBeAg- HBsAb ； HBsAb 。必要時檢查Pre

12、S1Ag、PreS2Ag和PreS1Ab、PreS2Ab1.血清HBV DNA檢測 核酸雜交法、PCR法3.血清DNA多聚酶檢測 已被HBV DNA檢測取代乙型肝炎病毒講義30三、微生物學檢查1.HBV抗原、抗體檢測乙型肝炎病毒講義30 病毒抗原抗體系統檢測結果分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc結果分析+-HBV感染或無癥狀攜帶者+-急性或慢性乙型肝炎，或無癥狀攜帶者+-+急性或慢性乙型肝炎（傳染性強，“大三陽”）+-+急性感染趨向恢復（“小三陽”）-+既往感染恢復期-+-既往感染恢復期-+既往感染或“窗口期”-+-既往感染或接種過疫苗乙型肝炎病毒講義31 病毒抗原抗體系統檢測結果分析HBsAgHBeAg抗-HBs乙型肝炎病毒講義32乙型肝炎病毒講義32四、預防及免疫 1.控制傳染源，切斷傳播途徑2.人工主動免疫： 疫苗（血源性、基因工程-HBsAg) 3.人工被動免疫：