1、PAGE PAGE 11簡答題：第三章：核酸1、簡述DNA雙螺旋穩定的因素及其作用。（11頁）答： eq oac(,1)氫鍵作用。已知DNA雙螺旋的穩定因素是堿基對中的氫鍵由于G、C之間是三個氫鍵，而A、T之間是兩個氫鍵。 eq oac(,2)堿基堆積力。分布于雙螺旋結構內側的嘌呤與嘧啶堿呈疏水性，大量鄰近堿基對的堆積，使其內部形成了強有力的疏水區，與介質水分子隔開。 eq oac(,3)其他作用因素。例如離子強度。磷酸集團上的負電荷與介質中陽離子之間形成離子鍵，可以有效地屏蔽磷酸基之間的靜電斥力。2、RNA有哪些主要類型？各有何生理功能？（12頁）答：核糖體RNA（rRNA）：這些RNA分子

2、在代謝上十分穩定，是生物體內蛋白質合成的“機器”核糖體的重要成分。轉移RNA（tRNA）：它們在代謝上也是穩定的，在蛋白質的生物合成過程中起接受、轉運和摻入氨基酸的作用。信使RNA（mRNA）：從DNA上把遺傳密碼即蛋白質中氨基酸排列順序的信息接受過來，并起模板作用合成蛋白質。3、試比較DNA與RNA化學組成的異同。（12頁）答：不同： eq oac(,1)戊糖不同：DNA為脫氧核糖；RNA為核糖。 eq oac(,2)堿基不同：RNA還有U（尿嘧啶），DNA含有T（胸腺嘧啶）。相同：RNA和DNA都含有A(腺嘌呤)、G（鳥嘌呤）、C（胞嘧啶）。4、簡述DNA復性的必要條件和機制。（12頁）答

3、：復性的必要條件： eq oac(,1)鹽濃度必須高，足以使兩鏈之間磷酸基團上負電荷的排斥力消失，通常用0.15到0.5mol/L的NaCl。 eq oac(,2)溫度必須適當高，足以防止鏈內隨機形成氫鍵。復性的最適溫度比Tm值低20到25。機制：復性是一個比較慢的過程，實際上重新繞成螺旋這一過程并不限制復性速度。變性DNA的兩條互補單鏈之間要形成氫鍵，必須使配對的堿基處于正確位置，因為在變性DNA溶液里兩條互補鏈之間處于正確位置是一個隨機的過程。在變性的DNA溶液中，混合的自由單鏈碰撞是隨機的，每一復性的DNA分子并非都是由原始配對的互補鏈形成的。隨機碰撞也可以產生分子雜交。第六章：遺傳物質

4、1、作為遺傳物質的DNA，其攜帶和轉運的遺傳信息有哪些？（15頁）答： eq oac(,1)含有細胞合成每一個蛋白質中的氨基酸順序； eq oac(,2)有合成每個蛋白質的起始和終止信號； eq oac(,3)有決定某一單位時間里哪些特定的蛋白質被合成并且究竟合成多少個蛋白質分子的一個信號裝置。2、原核生物基因組的特點是什么？ eq oac(,1)小，一般具有單一DNA復制起點； eq oac(,2)單個染色體，一般呈環狀； eq oac(,3)染色體DNA或RNA并不和蛋白質形成固定地結合物； eq oac(,4)少量重復序列； eq oac(,5)功能上密切相關的基因構成操縱子或高度集中，

5、并且常轉錄成為基因mRNA。第七章：DNA復制1、一個細菌要遺傳，其復制必須滿足什么條件？答： eq oac(,1)一個復制周期的起始； eq oac(,2)對起始頻率的控制； eq oac(,3)復制后的染色體分配到子代細胞。2、DNA聚合酶I發揮聚合活性時所需的條件有哪些？答： eq oac(,1)模板（有模板底物引物（RNA）Mg2+）； eq oac(,2)適宜的溫度； eq oac(,3)必須有3OH末端的引物，且此引物必須與模板正確形成氫鍵； eq oac(,4)合成從53方向進行。3、簡述DNA連接酶作用的條件。答： eq oac(,1)DNA連接酶催化一個DNA鏈的5磷酸根與另

6、一DNA鏈的3羥基形成磷酸二酯鍵，這兩個鏈都必須與同一另外的鏈互補結合，而且兩鏈必須相鄰。 eq oac(,2)只能連接一個切口而不能連接一個豁口； eq oac(,3)所需的能量或來自NAD（如大腸桿菌）或ATP（如T4誘導的連接酶和動物細胞中的連接酶）。4、請簡要說明復制過程的復雜性。答：復制過程十分復雜，涉及許多酶和蛋白質的協同作用。目前雖對大部分復制有關的酶和蛋白質結構和性質已弄清楚，但對DNA的雙鏈究竟是如何解開，以及怎樣保持其復制真實性仍是知其然而不知所以，以下事實足以表明過程的復雜性： eq oac(,1)復制需要為解螺旋提供能量； eq oac(,2)單鏈DNA傾向于鏈內堿基配

7、對； eq oac(,3)一個酶只能催化有限的生理生化反應； eq oac(,4)一系列的防護措施既能防止復制錯誤的產生又能消除偶然出現的錯誤； eq oac(,5)DNA分子均以高度壓縮狀態和環狀超螺旋狀態存在，必須解決由此給復制系統帶來的強大幾何強制口。第八章：DNA損傷修復和基因突變1、簡述突變產生的途徑。答：突變體的產生需要堿基順序發生變化，這種變化可以由于DNA復制錯誤自發地產生或者由以下五種途徑促進產生。 eq oac(,1)插入的不能正確配對的堿基未被除去； eq oac(,2)插入的一個異構化的堿基在緊接著的復制中可以發生替換； eq oac(,3)先插入的堿基發生化學變化，成

8、為具有不同配對特性的堿基； eq oac(,4)在復制期間一個或多個堿基的漏減或插接。第九章：轉錄簡述述大腸桿菌RNA聚合酶的特點。答：大腸桿菌RNA聚合酶有五個亞基組成，2，亞基很容易從全酶上掉下來，亞基在酶作用的某個階段掉下來之后，剩下的2成為核心酶，而2稱為全酶。是識別因子。在RNA聚合酶的亞基結構中，、和亞基對酶活性的重組是必需的，則是不必須的，其功能尚不清楚。核心酶具催化活性，而亞基本身沒有催化活性，其作用是識別DNA分子上RNA合成的起始信號。但亞基不能單獨與DNA結合，它結合到核心酶后可能引起酶構型的變化，因而改變核心酶與DNA結合的特性。亞基是僅有的可以單獨與DNA結合的亞基，

9、它參與RNA聚合酶與模板反應，同時亞基也與核心酶和亞基結合以及轉錄的終止有關。（或）也可與終止因子發生直接反應。亞基具有與的結合點，參與特定的基因表達，可能與酶和DNA上的啟動區域的反應有關。大腸桿菌RNA聚合酶還含有2個Zn原子，它們與亞基相連接。2、簡述原核生物轉錄終止子的結構特點。答： eq oac(,1)具有一個反向重復的序列； eq oac(,2)第二區域是在靠近推測的莖的環端（有時全部在莖中），是一個高含GC區； eq oac(,3)第三個區（有時不存在）是一個TA序列（可能在莖的開始），在mRNA中產生一個6-8個尿嘧啶接著一個腺嘌呤順序。3、簡要說出原核生物mRNA與真核生物m

10、RNA的區別。答： eq oac(,1)從原核生物來說，mRNA是多順反子，壽命短，翻譯是偶聯的，所以合成出來的RNA不需加工；真核生物mRNA是單順反子，壽命長，mRNA轉錄出來是前體，需加工，且在細胞核中合成，再進入細胞質，不是偶聯的。 eq oac(,2)原核生物mRNA的5端在起始密碼上有SD序列與翻譯起始有關，而真核生物mRNA沒有。 eq oac(,3)真核生物mRNA的5端有帽子3端有PolyA尾，而原核生物mRNA沒有。 eq oac(,4)原核生物mRNA沒有內含子，而真核生物mRNA有內含子，需加工變成成熟的mRNA。4、簡要括原核生物啟動子結構和功能。答： eq oac(

11、,1)在左邊距mRNA開始轉錄的第一個堿基510個堿基的地方有一段序列叫Pribow box即10區，決定轉錄的方向。 eq oac(,2)35區位于Pribow box左側，是啟動子中另一重要區域，在35區也存在與Pribow box類似的一個順序，35區決定轉錄的頻率。 eq oac(,3)起始位點的序列，它是影響轉錄的起始效率。5、簡述真核生物RNA聚合酶的特點。答：真核生物的基因組比原核生物大，RNA聚合酶也更為復雜。其相對分子質量大都在500 000左右，有814個亞基，并含有Zn2+。RNA聚合酶單獨不能起作用，需負責識別啟動子元件序列的輔助因子，真核生物RNA聚合酶中沒有細菌因子

12、的對應物，因此必須借助各種轉錄因子才能選擇和結合到啟動子上，對鵝膏蕈堿，含有三種RNA聚合酶，分別為RNA聚合酶I、RNA聚合酶、RNA聚合酶。第十章：翻譯1、說出蛋白質合成所需的重要組成。答：蛋白質的合成也就是生物體內遺傳信息傳遞的“翻譯”過程。它需要大約兩百多種生物大分子，其中包括核糖體（由RNA和蛋白質組成）、mRNA、tRNA，以及包括同功受體tRNA、氨酰tRNA合成酶、可溶性蛋白質因子（起始因子、延伸因子和釋放因子）的參加的協同作用，以上即為蛋白質合成所需的重要組分2IF-1，IF-2,IF-3GTPIF-1，IF-2,IF-3GTP答：原核生物起始總反應式是：30S+50S+mR

13、NA+fMet-tRNA f 70SmRNAfMet-tRNAf+GDP+Pi 在一定濃度Mg2+的生理條件下，核糖體亞基很容易締結, 所以首先70S核糖體必須在IF-1和IF-3作用下解離。IF-3（IF-1）IF-3（IF-1）70S=50S+30S 50S+30SIF-3然后形成30SIF-1、2、3復合物。這三個因子有結合的協同作用，并且都結合在靠近16SrRNA的3端序列，位于核糖體的界面，從而妨礙了50S亞基的結合，進而形成30S（小亞基）起始復合物：30S IF-1、2、3+mRNA+fMet-tRNAf+GTP30S IF-1、2mRNAfMet-tRNAf GTP+IF-3。

14、共價交鏈實驗表明，當形成30S復合物時，S7、S1、S11、S12、S18和S21等蛋白質與核糖體識別mRNA起始位點有關。70S起始合物（簡稱起始復合物）的生成和IF-2的再循環通過以下步驟進行。50S亞基的加入伴隨著GTP被IF-2（依賴于核糖體的GTPase）水解，然后IF-2（和IF-1）及GDP、Pi從核糖體釋放出來。3、簡述大腸桿菌的乳糖操縱子模型。答：乳糖操縱子模型的基因組成是由調節基因控制位點和一組功能相關的結構基因組成。控制位點包括啟動基因和操作基因。大腸桿菌的乳糖轉錄子一般也稱為乳糖操縱子。包括三個結構基因：Z、Y、a分別編碼半乳糖苷酶、半乳糖苷透性酶、半乳糖苷轉乙酰酶，此

15、外還有一個操縱序列0，一個啟動序列P及一個調節基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與0序列結合，使操縱子受阻遏而處于轉錄失活狀態。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物，基因激活蛋白CAP結合位點，由P序列、0序列和CAP結合位點共同構成LAC操縱子的調控區，三個酶的編碼基因即由一控制區調節實現基因產物的協調表達。第十一章：原核基因表達的調控1、簡單描述大腸桿菌乳糖操縱子的結構及轉錄過程。答：結構基因：半乳糖苷酶基因（lacZ）、編碼半乳糖苷透性酶的基因（lacY）、半乳糖苷轉乙酰酶基因（lacA）。過程：乳糖操縱子調控是當培養基中沒有乳糖時，存在于操縱子上游的調節基因編碼表達的阻遏蛋白結合到

16、操縱子中的操縱基因上，阻止了結構基因的表達。此時，在細胞中只有幾個半乳糖苷酶分子，但將大腸桿菌轉到乳糖培養基中時，由于誘導物分子結合在阻遏蛋白的特異部位，引起阻遏蛋白構象改變，不能結合到操縱基因上，使RNA聚合酶能夠正常催化轉錄存在于操縱子上的結構基因，即操縱子被誘導表達，半乳糖苷酶分子數量迅速增加，在這個系統中的誘導物分子不是乳糖本身，而是乳糖的同分異構體異乳糖。因為乳糖進入大腸桿菌細胞后被轉化成了異乳糖。2、說出為什么大腸桿菌在有葡萄糖和乳糖時，首先利用葡萄糖，而沒有葡萄糖時才利用乳糖？答：葡糖糖效應：在葡萄糖存在的情況下，即使在細菌培養基中加入乳糖等誘導物與其相對應的操縱子，也不會啟動產

17、生代謝這些糖的酶。這是因為葡萄糖是最常用的碳源。細菌所需要的能量主要從葡萄糖獲得，在這種情況下，細菌無需開動一些不常用的基因去利用稀有糖，但葡萄糖存在可抑制細菌細胞中的腺苷酸環化酶，減少了環腺苷酸(CAMP)的合成，與它結合的正受體PrCAP因找到配體而不能形成復合物，CAMPCAP是一個重要的正調節物質，可以與操縱子的啟動子區結合啟動基因轉錄，所以葡萄糖存在時，不易形成CAMPCAP受其調控基因不表達。如果培養基中葡萄糖含量下降，腺苷酸環化酶活力就會相應提高，CAMP合成增加，CAMP與CAP形成復合物并與啟動子結合促進乳糖操縱子的表達，這種情況成為葡萄糖效應或稱為降解物抑制作用。3、簡述乳

18、糖操縱子的負調控機制。負調控機制：是當培養基中沒有乳糖時，存在于操縱子上游的調節基因，編碼表達的阻遏蛋白結合到操縱子中的操縱子基因上，阻止了結構基因的表達（即Lac基因被調節基因編碼表達的阻遏蛋白所阻遏）。此時，在細胞中只有幾個半乳糖苷酶分子。調控機制：在乳糖培養基中時，由于誘導物分子結合在阻遏蛋白的特異部位，引起阻遏蛋白構象改變，不能結合到操縱基因上，使RNA聚合酶能夠正常催化轉錄存在于操縱子的基因結構，即操縱子被誘導表達，半乳糖苷酶分子數量迅速增加。第十二章：可轉移的遺傳因子述轉座因子在與遺傳學中的應用。答： eq oac(,1)用于難篩選的基因的轉移； eq oac(,2)作為基因定位的

19、標記； eq oac(,3)篩選插入突變； eq oac(,4)構建特殊菌株； eq oac(,5)克隆難以進行表型鑒定的基因； eq oac(,6)用于F因子處在特定位置上的Hfr菌株的構建； eq oac(,7)帶有特定基因的轉到噬菌體的構建； eq oac(,8)特定區段缺失菌株的構建。第十四章：真核基因組及基因表達調控真核生物rRNA基因（rDNA）的特點。答：rRNA是細胞中主要的轉錄產物之一，在高等真核生物中要求有眾多為rRNA編碼的基因拷貝。這些基因都位于細胞核內。在許多高等真核生物中，這些基因一前一后地串聯排列。每個轉錄單位被不轉錄的間隔區分開。被轉錄的區域被RNA聚合酶和新生

20、的RNA鏈包圍著。新生RNA鏈和蛋白質聯系在一起產生前體核糖體粒子。這些粒子中含有成熟核糖體中的蛋白質以及還有一些非核糖體核蛋白，這些蛋白質具有內切酶活性，參與rDNA初級轉錄產物的加工。概述參與真核生物基因轉錄調控的DNA序列。答：絕大多數真核基因調控機制幾乎普遍涉及編碼基因兩側的DNA序列順式作用元件。順式作用元件是指可影響自身基因表達活性的DNA序列。在不同真核基因的順式作用元件中也會時常發現一些共有序列，如TATA盒、CCAAT盒等。這些共有序列就是順式作用元件的核心序列，它們是真核RNA聚合酶或特異轉錄因子的結合位點。順式作用元件通常是非編碼序列，但是并非都位于轉錄起始點上游(5-端

21、)。根據順式作用元件在基因中的位置、轉錄激活作用的性質及發揮作用的方式，可將真核基因的這些功能元件分為啟動子、增強子及沉默子等。第十七章：重組DNA與遺傳工程1、重組DNA技術的要素。答： eq oac(,1)載體； eq oac(,2)工具酶； eq oac(,3)外源DNA，即要克隆或表達的DNA片段； eq oac(,4)原核或（表達系統）真核宿主細胞。2、重組DNA技術的意義與應用。答：現代DNA技術使我們能夠分離和擴增某一個具體基因，從而可以研究基因的精細結構及功能，是人類從分子水平上對各種生命現象的認識產生了一個巨大的飛躍。人們利用重組DNA技術，使基因在細菌或培養的真核細胞中表達

22、而獲得有重大意義的醫藥產品如干擾素、激素、免疫調節因子及蛋白質疫苗等。利用重組DNA技術，人們還可以創造出新的抗病、抗蟲害和高產的動植物品種。 附錄資料:不需要的可以自行刪除 隧道知 識 小 點 路基按其斷面的填挖情況分為路堤式、路塹式、半填半挖式三類。路肩是路面兩側路基邊緣以內地帶，用以支護路面、供臨時停靠車輛或行人步行之用。路基土石方工程按開挖的難易分為土方工程(松土、普通土、硬土三級)與石方工程(軟石、次堅石、堅石三級)。拱墻是上部拱圈和下部邊墻的統稱.隧道仰拱是指隧道底部（反拱形，所以叫仰拱），這部分在隧道襯砌中一般是先澆筑的，澆筑后模板臺車就可以在仰拱砼上定位和支撐，來進行隧道拱墻砼

23、的澆筑。 鑿毛是用一種斬斧的工具把已經完成的混凝土結構面鑿出一條條凹痕.。作用是使兩個施工階段的施工面粘結牢固。通常在現澆結構中，在現澆板澆注完畢后，要鑿毛，進行下一層柱墻的澆注，讓混凝土粘結牢固。超前小導管，是隧道工程掘進施工過程中的一種工藝方法，主要用于自穩時間短的軟弱破碎帶、淺埋段、洞口偏壓段、砂層段、砂卵石段、斷層破碎帶等地段的預支護。 質量控制點是指為了保證作業過程質量而確定的重點控制對象、關鍵部位或薄弱環節。 質量控制點，簡稱為控制點，又稱管理點。搜索它對生產現場質量管理中需要重點控制的質量特性進行控制，體現了生產現場質量管理的重點管理的原則，只有抓住了生產線上質量控制的重點對象，

24、并采取相應的管理措施，才算抓住了質量的要害，然后通過“抓重點帶一般”，保證整條生產線的產品質量穩定和提高。因此，正確地確定質量控制點，是搞好生產現場質量管理的重要前提。 （1）全遂拱部系統采用22組合中空錨桿； （2） 邊墻及臨時支護采用22全長粘結型砂漿錨桿； （3）錨桿必須設置鋼墊板、錨頭、止漿塞等配件； （4）超前小導管采用42無縫鋼管，壁厚3.5mm; (5) 大管棚采用89或108鋼管，壁厚6mm; （6）防水板EVA，厚度不小于1.5mm; （7）無紡布,重量400g/m2; (8)單面自貼式防水板（自帶無紡布），主材EVA自厚1.5mm, 自粘層厚0.5mm,無紡布,重量400g/m2 ; (9)中埋式止水帶、外貼式止帶及鋼邊橡膠止水帶：寬度不小于300mm; （10）環向盲溝:50單壁打孔波紋管（外裹無紡布）， 縱向盲溝：80或100單壁打孔波紋管（外裹無紡布）； 橫向導水管：100PVC管； 注漿管：30PVC管； 7、 隧道施工應堅持：“弱爆破、短進尺、強支護、早封閉、 勤測量” 8、I18橫撐連接處或與鋼架連接處均設置鋼墊板： 240*200*16mm。 9、三級圍巖僅部分緩傾巖層段設置拱部180度格柵鋼架及 25超前錨桿。 10、大拱腳采用的鋼墊板分別是：1000*300*16 mm、240*200