1、ELISA及相關(guān)免疫分析技術(shù)江蘇省臨床檢驗中心 許斌1ppt課件ELISA及相關(guān)免疫分析技術(shù)江蘇省臨床檢驗中心 許斌1p概述 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測，既可以做定性試驗也可以做半定量分析等優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA的影響因素較多，加強質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。2ppt課件概述 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實ELISA1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗發(fā)

2、展為ELISA （Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay）技術(shù)，酶聯(lián)免疫吸附劑試驗。特點 ：在聚苯乙烯固相載體表面組裝免疫活性物質(zhì)形成“免疫吸附劑” 酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，化學(xué)顯色劑進行信號放大； 有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程； 靈敏度、特異性相對較高。3ppt課件ELISA1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)ELISA原理雙抗體（原）夾心法 檢測抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價以上抗原,不能測小分子半抗原）。4ppt課件ELISA原理雙抗體（原）夾心法 檢測抗原（體）的常見方

3、法間接法 檢測抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（一般為抗人IgG）檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體，因有干擾須稀釋標(biāo)本。 固相包被抗原待測抗體酶標(biāo)記第二抗體底物5ppt課件間接法 檢測抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（一般為抗人Ig競爭法 檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。固相包被抗原待測抗體酶標(biāo)記特異抗體底物6ppt課件競爭法 檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測ELISA原理競爭中和法 以測抗體為例，包被抗體、待測抗體競爭結(jié)合加入的恒定量的中和抗原，酶標(biāo)記抗

4、抗體（抗人IgG），待測抗體量越多包被抗體結(jié)合越少，顯色越淺。捕獲法 一般用于檢測IgM抗體，包被抗人鏈，捕獲血清中的所有IgM抗體，加入定量特異抗原與捕獲的特異抗體結(jié)合，酶標(biāo)記特異抗體（或抗抗體）顯色。7ppt課件ELISA原理競爭中和法 以測抗體為例，包被抗體、待測抗ELISA捕獲法原理圖固相包被抗鏈抗體捕獲的IgM抗體酶標(biāo)記抗原底物8ppt課件ELISA捕獲法原理圖固相包被抗捕獲的IgM抗體酶標(biāo)記抗原底試劑盒選擇衛(wèi)生部規(guī)定乙肝試劑，丙肝試劑，艾滋病試劑，梅毒試劑及血型試劑必須使用經(jīng)衛(wèi)生部生物制品檢定所檢定合格，并貼有防偽標(biāo)簽的產(chǎn)品，試劑應(yīng)從靈敏度，特異性，精密度，穩(wěn)定性，簡便性，安全性及

5、經(jīng)濟性作出全面的評價。靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質(zhì)的最低量的能力；2）為試劑對人群或大量樣品中陽性檢出的能力（假陰性越少越好），取決于包被物的全面性。特異性：指試劑正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的能力（無假陽性），取決于包被抗原（體）及標(biāo)記抗原（體）的純度及特異性。精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍9ppt課件試劑盒選擇衛(wèi)生部規(guī)定乙肝試劑，丙肝試劑，艾滋病試劑，梅毒試劑CLSI I/LA23-AAssessing the quality of immunoassay systems:radiooimmunoassays and enzy

6、me,fluorescence,and luminescence immunoassays;approved guideline11.2:The lower immunochemical detection limit for an assay represents the lowest level of an ananlyte that can be reproducibly detected.the laboratory or test sensitivity is identical to the detection limit;use cut off valueClinical(dia

7、gnostic) sensitivity:the proportion of patients with a well-defined clinical disorder whose test values are positive or exceed a defined decision limit(i.e.,a positive result and identification of the patients who have a disease);use positive predictive value,false-negative results,et.al.10ppt課件CLSI

8、 I/LA23-AAssessing the q11ppt課件11ppt課件 12ppt課件 13ppt課件13ppt課件14ppt課件14ppt課件15ppt課件15ppt課件HBV基因型和血清學(xué)亞型以HBsAg的抗原決定族分血清學(xué)亞型共同決定族a，相互排斥的二對決定族d/y，w/r；w又分1-4；r又分q+和q-。共有9種亞型： ayw1，ayw2，ayw3，ayw4，ayr，adw2，adw4，adrq+，adrq- 只表明包膜蛋白氨基酸差異， 有流行病學(xué)意義16ppt課件HBV基因型和血清學(xué)亞型以HBsAg的抗原決定族分血清學(xué)亞型17ppt課件17ppt課件18ppt課件18ppt課件

9、保存參考品的國際機構(gòu)或組織英國國立生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)及控制品研究院（NIBSC）： 免疫血清學(xué) IU/ML德國鮑爾-艾立希研究院（PEI）： 病毒學(xué)、免疫血清學(xué)等，傳染病標(biāo)志物最全。PEI/ML法國國家中心實驗室（LNS）、法國輸血協(xié)會（SFTS）：病毒性肝炎、艾滋等血清盤。NG/ML荷蘭輸血中心實驗室（CLB）： 血型、病毒學(xué)、自身抗體等。丹麥國家血清研究院（SSI）： 病毒學(xué)、寄生蟲、免疫蛋白等。美國BBI：HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV-1等Panel。19ppt課件保存參考品的國際機構(gòu)或組織英國國立生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)及控制品研究院（穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性

10、試驗即將試劑存放于37保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標(biāo)，直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止，通常認(rèn)為37每穩(wěn)定一天相當(dāng)于410保存一個半月。簡便性：指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了，）定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。經(jīng)濟性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本而市場價格比較合理。20ppt課件穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑盒選擇試劑評價需要有權(quán)威的血清考核盤（Panel）進行檢測，一般實驗室不易從生檢所或臨檢中心取得，每進一次試劑評價一次也很麻煩

11、。可以通過間接的信息對試劑進行選擇。根據(jù)該試劑生檢所批批檢定報告，了解其質(zhì)量水平，按照質(zhì)量計劃選擇靈敏度高的或特異性高的試劑；通過詢問試劑包被物的組成，如原料來源（基因工程或合成多肽），片段的組合（按比例混合或化學(xué)合成），片段的長短等判斷試劑的優(yōu)劣；參考室間質(zhì)評評價報告中對試劑的評價結(jié)果，這比較客觀公正，因為統(tǒng)計數(shù)字均來自各參評醫(yī)院，反映了試劑在某一地區(qū)的使用情況；根據(jù)權(quán)威部門發(fā)布的試劑評價結(jié)果，了解市場上試劑的質(zhì)量優(yōu)劣。21ppt課件試劑盒選擇試劑評價需要有權(quán)威的血清考核盤（Panel）進行檢標(biāo)本的采集和保存可用作ELISA的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清，血漿，各種積液），分泌物（如唾液）和排

12、瀉物（如糞便，尿液）均可作為標(biāo)本以測定其中的抗原或抗體成分，一般使用血清。標(biāo)本采集時應(yīng)盡量避免溶血，因紅細(xì)胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)干擾立可讀方法的結(jié)果，可造成假陽性；長菌的標(biāo)本同樣的道理易產(chǎn)生假陽性。抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白元的干擾而造成假陽性，建議盡量不用抗凝血尤其是用肝素抗凝劑。標(biāo)本在冰箱中保存時間過長易導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深，一般血清置4冰箱5天內(nèi)完成測試。如需保存一周以上則要-20冰凍保存，融解時應(yīng)上下顛倒充分混勻，同時避免氣泡。ELISA的靈敏度1ng/ml水平上,標(biāo)本間的污染要盡量避免，尤其不應(yīng)與生化試驗用同一管標(biāo)本.最起碼應(yīng)先做免疫后做生化.22ppt

13、課件標(biāo)本的采集和保存可用作ELISA的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清標(biāo)本使用真空采血管分離膠不抗凝23ppt課件標(biāo)本使用真空采血管23ppt課件內(nèi)外干擾物質(zhì)的影響分析 溶血 脂濁 RF 自身抗體 AFP 補體 肝素 EDTA A 0.165 0.200 0.250 0.264 0.186 0.146 0.183 0.126 S 0.023 0.016 0.007 0.029 0. 010 0. 007 0.019 0.013A對照0.151 0.195 0.195 0.195 0 .116 0.116 0.116 0.116 S 0.038 0.008 0. 008 0.008 0.018 0.0

14、18 0.018 0.018 P 0.05 0.05 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.0124ppt課件內(nèi)外干擾物質(zhì)的影響分析 溶血 脂濁操作中注意事項ELISA實驗的結(jié)果受操作影響很大，每個步驟包括加樣，溫育，洗滌，顯色，酶標(biāo)儀讀數(shù)均應(yīng)認(rèn)真負(fù)責(zé)才能充分發(fā)揮ELISA的高靈敏，強特異的優(yōu)點。因此,應(yīng)建立實驗項目的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)。25ppt課件操作中注意事項ELISA實驗的結(jié)果受操作影響很大，每個步驟包儀器質(zhì)控為使儀器保持最佳工作狀態(tài)應(yīng)建立維護和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），所要控制的儀器包括移液器（加樣槍），水浴箱（溫箱），洗板機和酶標(biāo)儀。移液器：ELISA加

15、樣量小（5-100l），其準(zhǔn)確性直接影響實驗結(jié)果，利用稱重法檢查：吸取刻度指示量的水，萬分之一天平稱重后計算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在10%以內(nèi)； 水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實測溫度是否一致，允許有1的誤差； 洗板機 每個廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過2ul ，人工扣板時，墊紙不濕，定期檢查管孔是否堵塞； 酶標(biāo)儀 經(jīng)常維護其光學(xué)部分，防止濾光片霉變，定期檢測校正濾光片波長和線性范圍，使其保持良好的工作性能。26ppt課件儀器質(zhì)控為使儀器保持最佳工作狀態(tài)應(yīng)建立維護和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操加樣器合格標(biāo)準(zhǔn)水合格標(biāo)準(zhǔn)27ppt課件加樣器合格標(biāo)準(zhǔn)水合格標(biāo)準(zhǔn)27ppt課件

16、 酶標(biāo)儀校正程序濾光片波長精度檢查：將不同波長的濾光片從酶標(biāo)儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見分光光度計（波長精度0.3nm）于可見光區(qū)對每個濾光片進行掃描，其檢測值與標(biāo)定值之差為濾光片波長精度。通道差與孔間差檢測：通道差檢測是取一只酶標(biāo)板小孔杯（杯底須光滑，透明，無污染以酶標(biāo)板架作載體，將其（內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右）置于8個通道的相應(yīng)位置，蒸溜水調(diào)零，1于490nm處連續(xù)測三次,觀察其不同通道的檢測器測量結(jié)果的一致性，可用極差值來表示。孔間差的測量是選擇同一廠家，同一批號酶標(biāo)2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.100A左右）先后置

17、于同一通道，蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測，其誤差大小用1.96s衡量。零點飄移（穩(wěn)定性觀察）：取8只小孔杯分別置于8個通道的相應(yīng)位置，均加入200ul蒸溜水并調(diào)零，于490nm處每隔30分鐘測一次，觀察各個通道4小時內(nèi)吸光度的變化。28ppt課件 酶標(biāo)儀校正程序濾光片波長精度檢查：將不同波長的濾光片從酶酶標(biāo)儀校正程序精密度評價：每個通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同濃度的甲基橙溶解，蒸溜水調(diào)零，于490nm作雙份平行測定，每日測二次（上下午各一次），連續(xù)測定20天。分別計算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。線性測定：用電子天平精確稱取甲基橙配制5個系列

18、的溶液，于490nm平行測8次，取其均值。計算其回歸方程，相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計誤差s，并用1.96s表示樣品測量的誤差范圍.雙波長測定評價：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個通道檢測，每個通道測3次，51比較各組之間是否具有統(tǒng)計學(xué)差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果。一般酶標(biāo)儀無585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長為630nm）29ppt課件酶標(biāo)儀校正程序精密度評價：每個通道3只小杯分別加入200ul全自動酶標(biāo)儀定期校準(zhǔn)（年檢，維修后）主要參數(shù)：加樣精度（針間誤

19、差）， 攜帶污染率（加樣和管道）， 洗板效果， 光學(xué)系統(tǒng)。 30ppt課件全自動酶標(biāo)儀定期校準(zhǔn)（年檢，維修后）30ppt課件31ppt課件31ppt課件32ppt課件32ppt課件加樣 加樣應(yīng)用微量移液器（加樣槍)按規(guī)定的量加入微孔板的1/3處避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。每次加樣應(yīng)更換吸嘴，做到一人一吸頭，以免發(fā)生交叉污染;干吸頭預(yù)先在血清中抽吸三次。樣本稀釋，目的是為了減少非特異性反應(yīng)，所以一定要先加稀釋液后加樣本，特別注意加樣后要在微量振蕩器上振蕩30秒鐘，同時注意防止液體溢出。如后面操作步驟中加二種以上試劑時均需振蕩混勻。如用滴瓶滴加試劑應(yīng)先將滴瓶搖勻并擠去第一滴有氣

20、泡的試劑后加樣。33ppt課件加樣 加樣應(yīng)用微量移液器（加樣槍)按規(guī)定的量加入微孔板的1/溫育抗原抗體反應(yīng)需要在一定溫度下（37C），經(jīng)過一定的時間才能達到反應(yīng)的平衡點ELISA邊緣效應(yīng)是由溫育形成的。所以溫育一般采用能使反應(yīng)液溫度迅速達到平衡的水浴法。一種放在水浴箱的隔板上，另一種是放在溫箱的濕盒里。水要浸至板條的1/3處，不可將板條疊加放置。邊緣效應(yīng)（2ng/mlHBsAg一步法三種不同溫育法的結(jié)果） 水浴法 孵箱法 微波法A中央（S） 0.307（0.023） 0.282（0.028） 0.151（0.059） A周圍（S） 0.290（0.038） 0.357（0.047） 0.097

21、（0.038） P 0.05 0.01 2.1換算而來，常用于夾心法。B） C.O=0.5N，從抑止率公式換算而來， 常用于竟?fàn)帲泻头–） C.O=N+C（C為常數(shù)），用于間接法。D) C.O=CP+N（C為常數(shù)），用于間接法。此公式最客觀，但對生產(chǎn)廠家要求很高，陰陽性對照測定值要基本恒定。38ppt課件報告方式定性試驗 國內(nèi)外為便于統(tǒng)一計算，一律按S/C.O方式報告方式定量分析 用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋，ELISA測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以絕對量或單位表示。ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線每次都要和待測標(biāo)本做在同一塊板上。現(xiàn)有的ELISA定量試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線只有在較窄的濃度范圍內(nèi)成直線，要得到精確的

22、結(jié)果實屬不易。 因此嚴(yán)禁用定性試劑盒做定量分析。39ppt課件報告方式定量分析 用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋，ELISA灰區(qū)概念 把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區(qū)概念，即將CO值上下的一段區(qū)域定為陽性可疑，需重復(fù)實驗或換試劑重測以確定其陰陽性，如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報告+（陽性）。 灰區(qū)概念對血站系統(tǒng)的獻血員篩查尤為重要。 灰區(qū)的設(shè)置有二種： 1）C.O（1CV）， CV為該試劑的批內(nèi)CV (一般在15-20%間）； 2）C.O2s，s為實驗室做室內(nèi)質(zhì)控ROC的s。40ppt課件灰區(qū)概念 把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區(qū)概念41ppt課件41ppt課件確認(rèn)試驗抗原檢測中和試驗

23、抗體檢測RIBA（Recombinant Immunoblot Assay）：將病毒的各種抗原單獨包被在纖維素膜、尼龍膜等載體上，檢測不同抗原的反應(yīng)性。 或Western Blot：用十二烷基硫酸鈉SDS處理的待檢血清經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠PAGE電泳，使抗原與抗體分離，將抗原轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上，加入抗體，再用與酶或同位素標(biāo)記的二抗反應(yīng)，顯色或放射自顯影判定結(jié)果。42ppt課件確認(rèn)試驗抗原檢測中和試驗42ppt課件質(zhì)量審核型式檢查（編號唯一性、項目完整性、書寫完整性）儀器檢查（狀態(tài)、校準(zhǔn)）試劑檢查（效期）質(zhì)控檢查（室內(nèi)、室間）異常值檢查（及時與臨床聯(lián)系）43ppt課件質(zhì)量審核型式檢查（編號唯

24、一性、項目完整性、書寫完整性）43p44ppt課件44ppt課件45ppt課件45ppt課件HBsAg HBeAg HBcAb-IgG HBcAg-IgM HBeAb HBsAb 臨床意義 + + 急性HBV感染早期HBV復(fù)制活躍 + + + + 急慢性HBV感染，HBV復(fù)制活躍+ + + 急慢性HBV感染，HBV復(fù)制中躍 + + + + 急慢性HBV感染，HBV復(fù)制低躍 異型慢性乙型肝炎 + + + HBV復(fù)制停止或極低 + + 平靜的HBV攜帶狀態(tài)，HbsAg 極低測不出，HBsAg/抗HBs空白期 + HBV既往感染，未產(chǎn)生抗-HBs + + + 抗HBs出現(xiàn)前期，HBV復(fù)制低 + +

25、+ HBV感染恢復(fù)期 + + HBV感染恢復(fù)期+ + + 不同亞型再感染+ 整合 病后或接種疫苗后獲得免疫46ppt課件HBsAg HBeAg HBcAb-IgG HBcAHBsAg A. 急、慢性肝炎的診斷。 B. 獻血員和各種血制品的篩選。 C. 急性肝炎最早期的預(yù)后指標(biāo)。 D.流行病學(xué)調(diào)查。注意事項：一、 HBsAg假陽性 血清分離不佳或肝素抗凝血；二、 HBsAg假陰性 感染早期易形成抗原抗體復(fù)合物，這種情況需要檢測抗HBc-IgM及HBV DNA； 多數(shù)商用試劑盒檢測系統(tǒng)采用的為多克隆抗體檢測HBsAg的adr、ayw型，S區(qū)的點突變即可導(dǎo)致臨界測定值或陰性結(jié)果； 由于慢性病毒攜帶者

26、（低水平HBsAg攜帶者）或HBV感染潛伏期， HBsAg濃度低于檢測水平的下限。47ppt課件HBsAg47ppt課件抗-HBs： A. 預(yù)后：抗HBs經(jīng)常在肝炎癥狀出現(xiàn)后4-6個月出現(xiàn)，一般表示病毒清除，感染開始恢復(fù)。近年來的研究發(fā)現(xiàn)在抗HBs 陽性患者體內(nèi)有5%HBV DNA陽性，慢性肝炎中的一些抗HBs陽性者，肝細(xì)胞中可檢出HBsAg、HBeAg、HBV DNA，因此盡管自然感染者抗HBs陽轉(zhuǎn)后，大多數(shù)預(yù)后良好，但也不能過于樂觀，應(yīng)定期復(fù)查。 B. 流行病學(xué)調(diào)查。 C. 疫苗接種對象的篩選和效果觀察。接種疫苗后，抗HBs濃度超過10 IU/L，表明其具有保護性。加強免疫后4-8周，大于

27、100 IU/L，即便以后有所降低，其免疫力能維持10年以上。注意事項： A 懷疑假陽性結(jié)果時要進行中和試驗。 B 抗HBs經(jīng)常在HBsAg消失幾周至幾月后方呈陽性（窗期），極少數(shù)在HBsAg消失后即為陽性，同時可檢出抗HBs及HBsAg見于以下幾種情形：前后或同時感染兩種亞型HBV，抗HBs及HBsAg同時檢出通常要持續(xù)很久，且濃度均很高； 抗HBs假陽性；編碼HBsAg的基因變異使得HBsAg抗原性改變，原型抗HBs不能將其清除。48ppt課件抗-HBs：48ppt課件HBeAg： A. 評價血清傳染性：慢性HBsAg攜帶者中，HBeAg及HBV-DNA檢測可以用來評估其傳染危險性，90%

28、 HBeAg陽性HBsAg攜帶者可以傳染給她們的新生兒，而HBeAg陰性或抗HBe陽性的孕婦中只有10%會傳染給嬰兒。 B. 預(yù)后：急性期HBeAg的消失通常伴隨ALT的降低，預(yù)示著疾病的好轉(zhuǎn)；HBeAg持續(xù)陽性超過12周，提示HBV感染趨向慢性；HBeAg陽性的無癥狀者較少。注意事項： （1）假陰性：前C區(qū)基因變異導(dǎo)致不能生成和分泌HBeAg，血清中HBeAg陰性，但這種突變并不影響乙肝病毒的復(fù)制，仍可形成完整的病毒顆粒，該種情況下盡管檢測不到HBeAg，慢性HBV感染炎癥反應(yīng)也相當(dāng)強。HOOK 效應(yīng) （2）假陽性： 包被抗體不純（含有抗C）49ppt課件HBeAg：49ppt課件電化學(xué)發(fā)光HBeAg檢測的高線性50ppt課件電化學(xué)發(fā)光HBeAg檢測的高線性50ppt課件抗-HBe： A、反映血清感染性：通常情況下HBsAg（+）、抗HBe（+）病例的傳染性較低； B、監(jiān)視急性和慢性HBV感染：血清HBeAg