1、XXXXX檢測試劑盒（XXXXX 法）4.產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果的綜述XXXXX有限公司產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述目錄 TOC o 1-5 h z 立項依據(jù)1背景介紹1全球的發(fā)病情況1中國的發(fā)病情況1臨床現(xiàn)狀1目前現(xiàn)有的檢測技術(shù)1需要解決的關(guān)鍵點1項目概況1研發(fā)過程1 HYPERLINK l bookmark4 o Current Document 項目設(shè)計開發(fā)策劃階段1必要性分析2可行性分析2 HYPERLINK l bookmark6 o Current Document 項目設(shè)計開發(fā)輸入階段3依據(jù)的法律法規(guī)和標準3預期用途與技術(shù)原理3方法的選擇3技術(shù)設(shè)計3工藝設(shè)計4性能要求設(shè)計4研發(fā)進度安排5

2、HYPERLINK l bookmark8 o Current Document 項目設(shè)計開發(fā)輸出階段6小試階段6中試階段9試生產(chǎn)階段12 HYPERLINK l bookmark18 o Current Document 項目設(shè)計開發(fā)驗證階段13 HYPERLINK l bookmark20 o Current Document 項目設(shè)計開發(fā)確認階段 14臨床試用14臨床試驗18結(jié)果綜述19參考文獻20產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述立項依據(jù)背景介紹（介紹相關(guān)疾病情況如臨床表現(xiàn)、發(fā)病機理、我國每年發(fā)病率等、檢 測技術(shù)或手段的臨床現(xiàn)狀、目前的檢測手段存在的問題、需要解決的 關(guān)鍵點等。）全球的發(fā)病情況中國

3、的發(fā)病情況臨床現(xiàn)狀目前現(xiàn)有的檢測技術(shù)需要解決的關(guān)鍵點項目概況（簡單介紹本項目的一些基本情況，如項目來源，立項背景，將 來規(guī)劃，臨床意義等。）研發(fā)過程XXXXXX試劑盒的臨床前研究從20XX年X月開始，至今已完 成的研究工作分成如下五個階段：項目設(shè)計開發(fā)策劃階段項目設(shè)計開發(fā)輸入階段項目設(shè)計開發(fā)輸出階段項目設(shè)計開發(fā)驗證階段項目設(shè)計開發(fā)確認階段4.2.1項目設(shè)計開發(fā)策劃階段產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述（綜述）4.2.1.2可行性分析（從技術(shù)可行性、臨床可行性、市場可行性進行介紹。請注意，不要存在夸大或宣傳性表述。）技術(shù)可行性技術(shù)分析（從技術(shù)發(fā)展情況，技術(shù)成熟可靠情況，技術(shù)風險分析情況等方面分析試劑盒的技術(shù)

4、可行性。）資源分析（從研發(fā)人員，儀器設(shè)備資源，辦公及研發(fā)場地等方面分析項目的可行性。）臨床可行性（從臨床檢測容量和適應癥臨床現(xiàn)狀及趨勢兩個方面闡述該檢測方法在現(xiàn)有臨床實踐應用的范圍以及將來可實現(xiàn)的臨床檢測。）市場可行性（從國外市場現(xiàn)狀和國內(nèi)市場現(xiàn)狀，分析中報試劑盒的市場意義。）一、 國外市場現(xiàn)狀（檢索分析國外已上市或正在研究的同類產(chǎn)品）二、國內(nèi)市場現(xiàn)狀（檢索分析國內(nèi)已上市或正在研究的同類產(chǎn)品）產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述4.2.2項目設(shè)計開發(fā)輸入階段主要是根據(jù)項目立項要求，參考同類產(chǎn)品資料，產(chǎn)品相關(guān)法規(guī)、 指南和標準等，進行試劑盒檢測方法選擇，技術(shù)及工藝設(shè)計，研發(fā)進 度安排等方面的設(shè)計及評審。依據(jù)的

5、法律法規(guī)和標準a）醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例b）體外診斷試劑注冊管理辦法c）體外診斷試劑說明書編寫指導原則d）醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)督管理辦法e）體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則f）醫(yī)療器械使用質(zhì)量監(jiān)督管理辦法g）醫(yī)療器械通用名稱命名規(guī)則h）醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導原則YY/T0287:2017 /ISO13485:2016醫(yī)療器械 質(zhì)量管理體系 用于法規(guī)的要求j）（項目相關(guān)技術(shù)審評指導原則、標準等）預期用途與技術(shù)原理方法的選擇本研究依托XXXXX公司自主開發(fā)的XXXXX平臺，擬開發(fā)出一 套XXXX檢測產(chǎn)品，適用于XXXX樣本，可有效檢測XXXXXXo 4.2.1.4技術(shù)設(shè)計樣本處理：從XXXX樣本中提

6、取高質(zhì)量的DNA；產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述文庫構(gòu)建：通過對 的DNA文庫;測序分析：將制備好的DNA文庫在 平臺進行高通量測序，從而得到目標區(qū)域的DNA序列信息，通過數(shù)據(jù)分析，獲得靶基 因的突變狀態(tài)。工藝設(shè)計根據(jù)采用的建庫技術(shù)和測序平臺，進行原材料篩選和反應體系的 研究，制定一套可靠、簡便、高效、經(jīng)濟的實驗流程。性能要求設(shè)計依據(jù)設(shè)計方案，確定擬開發(fā)產(chǎn)品的性能要求如下：A.企業(yè)參考品的要求：a）陽性符合率檢測企業(yè)陽性參考品，符合率應為100%。b）陰性符合率檢測企業(yè)陰性參考品，符合率應為100%。c）精密度檢測企業(yè)重復性參考品，重復檢測10次，符合率應為100%。d）檢測限（根據(jù)實際情況而定，如突

7、變頻率應不高于5%,濃度應不高于50ng/pL。）B.臨床檢測要求：a）與臨床對比方法相比較，陽性符合率應不低于？ ，陰性符 合率應不低于？ %, KAPPA值應不小于？ ？。產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述4.2.1.7研發(fā)進度安排20XX年X月20XX年X月，完成立項書、策劃階段評審、 項目任務書、風險分析評估并編制風險管理報告和設(shè)計開發(fā)計劃書、 設(shè)計開發(fā)輸入及輸入階段評審。20XX年XX月20XX年X月，完成原料評價、工藝優(yōu)化、企業(yè)參考品的建立以及性能初步評價。20XX年XX月20XX年X月，完成樣品試制及參考值范圍 的確定，樣品試制階段的驗證和評審。20XX年XX月20XX年XX月，進行中試階段

8、。完成產(chǎn)品分 析性能的評價、與第三方已上市試劑盒的比較，實際儲存條件下的穩(wěn) 定性試驗和評價，開展中試階段的驗證，輸出說明書、技術(shù)要求、采 購清單、生產(chǎn)、檢驗儀器清單、原料、中間產(chǎn)品、成品的檢驗操作規(guī) 程、生產(chǎn)工藝文件和操作規(guī)程、產(chǎn)品配方、標簽、包裝圖紙以及產(chǎn)品 注冊所需的其他文件和材料，形成設(shè)計開發(fā)輸出文件清單，進行中試 階段的評審。20XX年XX月20XX年XX月，試生產(chǎn)階段。完成三批產(chǎn)品 的試生產(chǎn)和檢驗工作，技術(shù)資料的完善，生產(chǎn)、檢驗文件的調(diào)整和完 善，對試生產(chǎn)階段進行評審總結(jié)。20XX年XX月20XX年XX月，注冊檢驗階段。完成3個生產(chǎn)批次樣品在醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)依據(jù)產(chǎn)品技術(shù)要求的注冊檢驗

9、。產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述20XX年XX月20XX年XX月，臨床評價階段。通過臨床文 獻資料、臨床經(jīng)驗數(shù)據(jù)、臨床試驗等信息對產(chǎn)品是否滿足使用要求或 者預期用途進行確認。項目設(shè)計開發(fā)輸出階段小試階段本階段的工作包括主要原材料的選擇、生產(chǎn)工藝的研究及反應體 系的建立、生產(chǎn)一批試劑盒用于參考值范圍的確定。具體內(nèi)容如下：主要原材料的選擇在主要原材料的研究階段，分別對主要原材料的生產(chǎn)廠家和不同 陽性對照品設(shè)置方法進行篩選，最終確定XXXXXXXX （分別介紹各 主要原材料分別選擇哪個供應商）具體篩選過程如下：舉例：（1）XXX的選擇比較XXX公司和XXX公司生產(chǎn)的XXXX，通過XXX （檢測 標準），XX

10、X（對比得出原材料選擇廠家的優(yōu)勢），故選用XXX公司 生產(chǎn)的XXX。生產(chǎn)工藝的研究及反應體系的建立在生產(chǎn)工藝的研究及反應體系的建立階段，對樣本用量、試劑加 樣量、反應條件（包括溫度、時間、循環(huán)數(shù)等）進行了確定，具體確 定過程如下：（對每種反應物和反應條件，分別比較使用不同用量和不同反應 條件對結(jié)果的影響。）產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述試劑盒小試生產(chǎn)按照上述已確定的試劑盒生產(chǎn)工藝進行XXXXXX試劑盒的試制， 初步確定了試劑盒的生產(chǎn)工藝，試制的試劑盒用于進一步的研發(fā)試驗。試劑盒批號：XXXXX試劑盒規(guī)格：XXX人份/盒試劑盒數(shù)量：XXX盒參考值范圍的確定一、參考值的建立收集經(jīng)臨床確診為 （適用樣本）

11、樣本共計？例， 包括陰性樣本？ ？例，陽性樣本?例。分別采用本產(chǎn)品和臨床對比 方法檢測收集到的檢測結(jié)果。采用受試者工作特征（ROC）曲線 的方式對本中報產(chǎn)品用于結(jié)果判斷的臨界值予以確認，并建立參 考值。經(jīng)確認，XXXX的Cut-off為？ %；靈敏度可達？ %， 特異性可達？ ？。二、參考值的驗證收集經(jīng)臨床確診為 （適用樣本） 一樣本共計？例， 其中包括本試劑盒中報位點的陽性樣本？例和陰性樣本？ 例。分別采用本產(chǎn)品和對比方法檢測收集到的樣本的（檢測范 圍）將第一部分研究中得到的參考值用于對本申報產(chǎn)品檢測結(jié)果的結(jié)果判斷，若樣本檢測結(jié)果的數(shù)值參考值，判為陽性； 若樣本檢測結(jié)果的數(shù)值S參考值，判為陰

12、性。通過統(tǒng)計本產(chǎn)品檢 測結(jié)果的陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa系數(shù)等參產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述數(shù)，驗證參考值的有效性。通過驗證全部基因位點檢測結(jié)果統(tǒng)計 分析后kappa值均大于？，同臨床對比方法檢測結(jié)果有很高的 一致性，參考值符合設(shè)計開發(fā)要求，考核試劑具有良好的檢測準 確性。企業(yè)參考品盤該階段參考品的建立，并不代表就是最終的企業(yè)參考品盤，因為 到了注冊檢驗的階段，都有可能會更改。企參可以使用臨床樣本提取 的核酸，或者商業(yè)化的細胞系提取的核酸，但不推薦使用質(zhì)粒。現(xiàn)階 段若臨床樣本較難獲得，可以全部采用細胞系。對于陽性參考品，不用每種基因或突變都包含不同的突變頻率或 融合拷貝，只要保證所

13、有的陽性參考品中包含了試劑盒聲稱能檢測的 所有基因及位點（以NGS產(chǎn)品為例）。一、企業(yè)參考品的制備制備用原材料來源于 （如臨床樣本或者外購細胞系，供 應商的選擇），采用 生產(chǎn)的核酸提取試劑提取核酸，經(jīng)（確認的方法（不能是本試劑盒），可采用數(shù)字PCR、Sanger測序、已上市的其它試劑盒）確認基因變異情 況、突變頻率或融合拷貝數(shù)，用 測定核酸濃 度、純度后，進行分裝，儲存于口。二、企業(yè)參考品盤的構(gòu)成（企參的組成包括陽性參考品、陰性參考品、檢測限參考品、重 復性參考品四種類型。每一種類型都可能包含多份。每一份企參，可產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述以是單基因或單位點，也可以是多基因或多位點。若是混合的，應是

14、 不同基因或者同基因不同外顯子的位點進行混合。）三、企業(yè)參考品盤的檢定標準（參考試劑盒的技術(shù)要求設(shè)定。）四、企業(yè)參考品儲存條件和有效期（不必全部研究完成，完成多少提供多少。對于實時效期，企 業(yè)聲稱為10個月，是否有研究數(shù)據(jù)支持？若研究周期沒有持 續(xù)到10個月后，可以考慮采用加速破壞試驗、阿倫尼烏斯方 程推理的方式，根據(jù)加速破壞試驗的研究結(jié)論推導試劑盒的實 時效期。）中試階段本階段的工作主要包括連續(xù)生產(chǎn)三批試劑盒，進行產(chǎn)品分析性能 的評價、與已上市試劑盒的比較，實際儲存條件下的穩(wěn)定性試驗和評 價，輸出試生產(chǎn)所需的資料，具體內(nèi)容如下：試劑盒中試生產(chǎn)按照已經(jīng)確定的試劑盒生產(chǎn)工藝連續(xù)生產(chǎn)3批XXXXX

15、X試劑（XXXXX測序法）。第一批第二批第三批試劑盒批號試劑盒規(guī)格試劑盒批量4.2.3.2.2產(chǎn)品分析性能評估產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述一、成品試劑盒性能評估（定性產(chǎn)品重點確定最低檢測限的摸索，定量產(chǎn)品的話重點確定線性 范圍）分別用3批中試成品試劑盒檢測企業(yè)參考品盤，考核生產(chǎn)工藝性 能，企業(yè)參考品的檢測準確性為100%，檢測特異性為100%；檢測限、 精密度均符合產(chǎn)品設(shè)計開發(fā)要求。二、特異性性能評估（主要是干擾物質(zhì)和交叉反應的研究結(jié)果。）三、與已上市試劑盒檢測結(jié)果比較（根據(jù)待評價方法和對比方法對所有樣本的檢測結(jié)果分別計算陽性 符合率（Positive Percent Agreement， PPA）

16、、陰性符合率（Negative Percent Agreement， NPA）、陽性預測值（Positive Predictive Value， PPV）。）穩(wěn)定性研究一、試劑盒穩(wěn)定性研究。分別用3批中試成品試劑盒檢測企業(yè)參考品盤，考核三批試劑盒 的實時效期穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性和運輸穩(wěn)定性。a.實時效期穩(wěn)定性（不必全部研究完成，完成多少提供多少。對于實時效期，企 業(yè)聲稱為10個月，是否有研究數(shù)據(jù)支持？若研究周期沒有持續(xù)到 10個月后，可以考慮采用加速破壞試驗、阿倫尼烏斯方程推理的 方式，根據(jù)加速破壞試驗的研究結(jié)論推導試劑盒的實時效期。詳細10產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述描述整個研究過程。需

17、要說明的是，因為注冊申報階段，穩(wěn)定性研究需要采用GMP車 間試生產(chǎn)的產(chǎn)品，因此，將來為了注冊申請，仍然需要采用試生產(chǎn) 的三批試劑盒進行再次研究）將連續(xù)生產(chǎn)的3批XXXXXX試劑盒（XXXXX測序法）置于實 際儲存條件下，分別儲存？個月、？個月、？個月、？個月后（根據(jù) 實際情況設(shè)計），按時取出適量的試劑盒檢測企業(yè)參考品，評估試劑 盒檢測結(jié)果的陽性符合率、陰性符合率、檢測限和精密度。本產(chǎn)品在實時儲存？個月、？個月、？個月、？個月后，企業(yè)參 考品的檢測準確性為100%，檢測特異性為100%，檢測限、精密度均 符合產(chǎn)品技術(shù)要求。這說明本產(chǎn)品在實際儲存條件下，可穩(wěn)定保存？ 個月。b.凍融穩(wěn)定性將連續(xù)生產(chǎn)

18、的3批XXXXXX試劑盒置于實際儲存條件下，分別 于凍融？次、凍融？次、凍融？次后（根據(jù)實際情況設(shè)計），按時取 出適量的試劑盒檢測企業(yè)參考品，評估試劑盒檢測結(jié)果的陽性符合率、 陰性符合率、檢測限和精密度。本產(chǎn)品在凍融3次、凍融5次、凍融7次后，企業(yè)參考品的檢測 準確性為100%，檢測特異性為100%，檢測限、精密度均符合產(chǎn)品技 術(shù)要求。c.開瓶穩(wěn)定性將連續(xù)生產(chǎn)的3批XXXXXX試劑盒置于實際儲存條件下，分別11產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述于開瓶后儲存？個月、？個月、？個月（根據(jù)實際情況設(shè)計），按時 取出適量的試劑盒檢測企業(yè)參考品，評估試劑盒檢測結(jié)果的陽性符合 率、陰性符合率、檢測限和精密度。本產(chǎn)品在

19、開瓶后儲存？個月、？個月、？個月后，企業(yè)參考品的 檢測準確性為100%，檢測特異性為100%，檢測限、精密度均符合產(chǎn) 品技術(shù)要求。d.運輸穩(wěn)定性將連續(xù)生產(chǎn)的3批XXXXX試劑盒置于實際儲存條件下，分別 于運輸3天、運輸7天后，按時取出適量的試劑盒檢測企業(yè)參考品， 評估試劑盒檢測結(jié)果的陽性符合率、陰性符合率、檢測限和精密度。本產(chǎn)品在運輸3天、運輸7天后，企業(yè)參考品的檢測準確性為 100%，檢測特異性為100%，檢測限、精密度均符合產(chǎn)品技術(shù)要求。 二、適用樣本穩(wěn)定性研究（分別考核適用樣本的保存效期穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性（或有其他 樣本穩(wěn)定性）。考慮到珍貴樣本的特殊性，保存穩(wěn)定性可考慮使用回溯 研究，收

20、集已保存3個月，6個月，9個月，12個月等不同采集日期 的樣本，用臨床當時已用各種對比方法測得的臨床結(jié)果或者其他指標 作為參考標準評價樣本的保存的保存穩(wěn)定性。，運輸穩(wěn)定性同試劑盒 運輸穩(wěn)定性，真實運輸3天和7天，甚至更長時間。）試生產(chǎn)階段按照確定的試劑盒生產(chǎn)工藝生產(chǎn)3批試劑盒，原材料供應充足及 時、生產(chǎn)工藝成熟穩(wěn)定、設(shè)備齊全且運轉(zhuǎn)良好。12產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述第一批第二批第三批試劑盒批號試劑盒規(guī)格試劑盒批量使用3批試劑盒檢測企業(yè)參考品盤，考核生產(chǎn)工藝性能，企業(yè)參考品的檢測準確性為100%,檢測特異性為100%;檢測限、精密度均 符合產(chǎn)品技術(shù)要求。試劑盒（規(guī)格：XX人份/盒）可用于留樣觀察、

21、注冊檢驗。項目設(shè)計開發(fā)驗證階段（如創(chuàng)新申報提交時未到此階段，可大概描述一些計劃和進展）為確保設(shè)計和開發(fā)輸出滿足設(shè)計開發(fā)輸入的要求，對XXXXXX 試劑盒（XXXXX測序法）進行驗證，計劃U 20XX年XX月對該試 劑盒進行注冊檢驗。XX年XX月，國家藥品監(jiān)督管理局已指定出 檢測機構(gòu)）對該試劑盒實施注冊檢驗。注冊指定檢驗通知單見附件）。（如已完成注冊檢驗，則簡單描述注檢情況，并附上注檢報告。）為確保設(shè)計和開發(fā)輸出滿足設(shè)計開發(fā)輸入的要求，對XXXXXX 試劑盒（XXXXX測序法）進行驗證，20XX年XX月（XX檢測機 構(gòu)）對該試劑盒進行了注冊檢驗，20XX年XX月獲取了注冊檢驗報 告，結(jié)論為“本品

22、按產(chǎn)品技術(shù)要求檢驗，結(jié)果符合規(guī)定。同時對該產(chǎn) 品的技術(shù)要求出具預評價意見，結(jié)論為“產(chǎn)品標準基本滿足相關(guān)標準 的要求”。注冊檢驗報告見附件。13產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述項目設(shè)計開發(fā)確認階段臨床試用 一、一致性研究（在一個對比方法無法滿足所有適用范圍的對比評估時，可選用 多種對比法。）XXXXXX對試生產(chǎn)的XXXXXX試劑盒（XXXXX測序法）進 行了試用，檢測了來自不同醫(yī)院的臨床樣本，分別采用對比方法 XXXXX法和XXXXX法的檢測結(jié)果和醫(yī)院提供的其他臨床分子診 斷結(jié)果作為對比驗證方法。一致性分析結(jié)果見下表，由下表可見 XXXXXX試劑盒（XXXXX測序法）對XXXXXX的檢測具有較好 的陰性符

23、合率、陽性符合率，與臨床分子診斷結(jié)果具有較高的總符合 率和一致性，初步驗證了 XXXXX公司生產(chǎn)的XXXXXX試劑盒 （XXXXX測序法）對XXXXXXX的檢測具有較高的準確性和有效 性。具體報告見資料6.3產(chǎn)品的創(chuàng)新內(nèi)容及臨床應用的顯著價值。14產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述臨床試用過程一致性分析結(jié)果方法檢測 指標樣本總 數(shù)L 上八W 樣本數(shù)陽性 符合 率陰性 符合率總 符合率對比方法（+）對比方法（-）申報試劑 盒（+）申報試劑 盒（-）申報試劑 盒（+）申報試劑 盒（-）方法1方法215產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述二、藥物療效相關(guān)的臨床研究（如適用）收集XXXXXX試劑盒（XXXXX測序法）檢測為陽性

24、的32例患者的靶向藥物臨床研究信息，結(jié)果顯示，XX例治療有效，XX例無效。有效率為XX%。具體用藥療效分析見下表，具體臨床試用報告見資料6.4產(chǎn)品的創(chuàng)新內(nèi)容及臨床應用的顯著價值。靶向藥物療效相關(guān)的臨床研究試劑盒檢測結(jié)果藥物用藥樣本數(shù)有效例數(shù)臨床試驗（臨床試驗內(nèi)容按照實際進展情況，有多少寫多少）（如處在臨床準備階段，大概描述臨床試驗的計劃，方案，預計取 得的成果等）本項目計劃在 XXX醫(yī)院、XXX醫(yī)院、XXX醫(yī)院、XXX醫(yī) 院4家臨床機構(gòu)開展1000例以上的臨床試驗，臨床試驗方案擬定 稿見附件。（如臨床試驗已完成，總結(jié)臨床研究的最后結(jié)果。）18產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述通過與 方法進行對比，檢測？例臨床樣本，用四格表方式計算各基因的陽性符合率（或敏感度）、陰性符合率（或特異度）、 總符合率。結(jié)果如下表，具體臨床試驗報告見附件。檢測指標陽性符合率陰性符合率總符合率4.3結(jié)果綜述對上述研究進行總結(jié)描述，并闡述后續(xù)的成果，比如試劑盒的組分、 發(fā)表的文章、申請的專利及其狀態(tài)、申請國家支持項目、省市支持項 目等。19產(chǎn)品研發(fā)過程及結(jié)果綜述4.4參考文獻注明引用的參考文獻，格式應符合標準要求。一：專著、論文集、報告序號主要責任者.文獻題名文獻類型標