1、Hepatitis B surface antigen Elecsys Systems 1010/2010/E170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l0123HBsAg用途：用免疫學方法定性測定人血清或血漿中的乙肝表面抗原(HBsAg)。電化學發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys1010、2010免疫測定分析儀。概述:HBsAg是乙肝病毒顆粒（HBV）的外殼成份，為一條大小不一的多肽。HBV感染者的血液中除存在完整的HBV病毒顆粒外，還含有較小的非傳染性空殼顆粒，其數(shù)量極多并含有乙肝表面抗原。HBsAg決定簇a是引起免疫反應的主要成份

2、，普遍存在于HBsAg顆粒上。另外，還有d、y、w、r等主要決定簇。檢測人血清或血漿中的HBsAg可以查明HBV感染。HBsAg是首選的免疫學標志物。在臨床癥狀出現(xiàn)前的數(shù)天或數(shù)周，HBsAg就已存在。急、慢性乙肝患者體內(nèi)均含有HBsAg，但也有極少數(shù)HBV感染者體內(nèi)測不到HBsAg。HBsAg檢測用于診斷HBV感染和預防HBV通過血制品傳播。也可用于急、慢性乙肝患者的病程監(jiān)測，有時也可用于抗病毒療效觀察。此外，也可用作產(chǎn)前檢查的實驗室檢測項目之一，以盡早預防HBV的母嬰傳播。Elecsys HBsAg試驗采用單克隆抗HBsAg抗體。原理：采用雙抗體夾心法原理，整個過程18分鐘完成。 第1步：5

3、0l標本、生物素化的抗HBsAg單克隆抗體和釕（Ru）標記的抗HBsAg單克隆抗體混勻，形成夾心復合物。 第2步：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應結合到微粒上。 第3步：反應混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學發(fā)光，通過光電倍增管進行測定。Elecsys自動將標本產(chǎn)生的光電信號與從HBsAg定標液得出的Cutoff值相比較。試劑：M： 鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/ml，生物素結合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。R1：生物素化的抗HBsAg

4、單克隆抗體（灰蓋），1瓶，10ml，濃度高于0.5mg/l，磷酸緩沖液0.1mol/l，pH7.4含防腐劑。R2：Ru(bpy)32+標記的抗HBsAg單克隆抗體（黑蓋），1瓶，10ml。濃度高于0.8mg/l，磷酸緩沖液0.1mol/l，pH 8.0含防腐劑。Cal 1 陰性定標液（白蓋），2瓶，1.3ml/瓶人血清, 含防腐劑Cal 2 陽性定標液（黑蓋），2瓶，1.3ml/瓶，HBsAg濃度約為0.5IU/ml,人血清，含防腐劑儲存和穩(wěn)定性：存放在28 度，切莫倒置。未開封，可穩(wěn)定至標明的保質(zhì)期。M，R1 ，R2試劑開封后，28 度12周；在儀器2010上，4周。在儀器1010上，3周（

5、使用后放回28 度；開瓶使用時間累計約20小時）。Cal 1，Cal 2開封后， 28 度12周；在儀器上， 5小時。注意：保證定標液不污染瓶蓋。標本采集和準備：血清：按標準常規(guī)方法采集。血漿：肝素鈉、EDTA-K3或枸櫞酸鈉抗凝。不要使用肝素鋰抗凝血漿。標本在28度可穩(wěn)定5 Hepatitis B surface antigen Elecsys Systems 1010/2010/E170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l0123HBsAg天，-20oC可穩(wěn)定3個月。標本可凍融6次。有沉淀的標本使用前需離心。加熱滅活的標本可使用。標本和質(zhì)

6、控品禁用疊氮鈉防腐。標本、定標液和質(zhì)控品在測定前應預溫到室溫。檢測步驟方法：按儀器操作說明進行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動輸入測試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。Elecsys2010：將冷藏試劑預溫到20度后放置于儀器的試劑盤上，避免產(chǎn)生泡沫。系統(tǒng)自動控制試劑溫度和開/關試劑瓶蓋。將HBsAg Cal 1和Cal 2放在分析儀的標本測試區(qū)。只在標定時打開瓶蓋。條形碼自動提供定標所需的數(shù)據(jù)資料。定標完成后，將Cal 1和Cal 2放回28度保存。定標：每批HBsAg試劑盒必須用新鮮試劑和

7、HBsAg Cal 1,Cal 2定標一次。另外，以下情況需要再次定標：Elecsys2010： 一個月（同一批號試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒）Elecsys1010： 每一試劑盒做一次 7天（室溫2025 度） 3天（室溫2532 度）各種分析儀均適用的情況：根據(jù)要求進行標定：如質(zhì)控結果超出范圍時；根據(jù)規(guī)定進行多次標定。定標液范圍：(電化學發(fā)光信號計數(shù)) 陰性（Cal 1） 600-1200 陽性（Cal 2） 3000-8000質(zhì)控：用Elecsys HBsAg質(zhì)控品1和2 （PreciControl）。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時或每一次定標后測定一次。質(zhì)控間隔期應適用于各實

8、驗室的具體要求。檢測值應落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應采取校正措施。計算：儀器會自動根據(jù)Cal 1和Cal 2的測定值計算Cut-off值。每一個標本的結果以有反應性或無反應性以及Cutoff指數(shù)形式（標本信號/ Cutoff）報告。結果解釋：標本的Cutoff指數(shù)1.0判斷為HBsAg無反應性，可判定該標本HBsAg陰性，不需進一步的試驗。標本的Cutoff指數(shù)1.0判斷為HBsAg有反應性。所有呈現(xiàn)有反應性的標本必須重新測定一次，并且每份標本做二次測定。如果二次均為無反應性，標本可確認為HBsAg陰性。如果二次重復測定中有一次為有反應性，則該標本確認為重復有反應性。重復有反

9、應性的標本必須用中和試驗(ElecsysHBsAg證實試驗)進行測定。如中和試驗陽性,標本判定為HBsAg陽性。干擾因素：該方法不受黃疸（膽紅素30mg/dl）、溶血（血紅蛋白1.4g/dl）、脂血（脂質(zhì)2800mg/dl）和生物素5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時后才能采血。不受類風濕因子干擾（2000U/ml）。HBsAg濃度高達1.5百萬Hepatitis B surface antigen Elecsys Systems 1010/2010/E170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l0123HBsAgIU/ml也不出現(xiàn)鉤狀效應。21種常用藥物經(jīng)試驗對本測定無干擾。根據(jù)目前所知，所有HBsAg測定方法均不能夠檢測出全部被感染的標本和病人。因此，陰性結果不能絕對排除HBV接觸或感染的可能性。有HBV接觸史的人，HBsAg陰性可能是因其體內(nèi)HBsAg含量低于檢測下限或抗原對所用抗體無反應性的緣故。接受過小鼠單抗治療或診斷的病人可能會出現(xiàn)假陽性反應。偶爾會遇到抗鏈酶親和素抗體和抗釕抗體的干擾。Elecsys HBsAg測定結果應結合病人病史、臨床其他檢查結果綜合