1、益陰明目合劑對高眼壓大鼠超微構造的影響【摘要】目的：研究益陰明目合劑對實驗性缺血大鼠視神經超微構造的影響。方法:用高眼壓方法制作ister大鼠眼缺血模型，分為6組，分別為空白組、造模組、預防組、益陰明目合劑低劑量組(低劑量組)、益陰明目合劑高劑量組(高劑量組)和復明片組，電鏡觀察各組大鼠的視神經超微構造。結果:預防組，高/低劑量組、復明片組視神經的顯微構造均優于造模組，遜于空白組。結論：益陰明目合劑能有效改善視神經缺血缺氧狀況，對青光眼后期造成的視神經損害有一定的作用。【關鍵詞】益陰明目合劑超微構造視神經EffetfYiyininguDetinnptiNerverphlgyinratithEx

2、perientalIsheiRetinpathyANGJing-b，HENEi-rng，LIUB-qin,LINHai-qing,YUen-zhu1.TheAffiliatedHpsitalfShangdngUniversityfTraditinalhineseediine,Jinan250011,hina；2.ShandngUniversityedialShl,Jinan250000,hinaAbstratbjetive:TtinvestigatetheeffetfYiyininguDetinnptinerverphlgyinratithexperientalisheiretinpathy.

3、ethds:Sixtyratsererandlydividedintsixgrups:Kngbaigrup,Zagrup,Yufanggrup,LJilianggrup,HighJilianggrup,Fuinggrup.Theratsereinjuredbyinreasingintraluarpressurefeyes.Theirstrutureandultrastrutureftheptinerveerebserveditheletinirspe.Results:TheptinerveultrastrutureintheratsfedithYiyininguDetinandFuingpia

4、nisbetterthanthezagrupandlessthanthekngbaigrup.nlusin:YiyininguDetinanrelivetheexperientalisheiretinpathysignifiantly,indiatingaprisingtherapeutieffetsnisheidaagefptinervebeausefglaua.KeyrdsYiyininguDetin;ultrastruture;ptinerve青光眼是重要的致盲性眼病，中晚期青光眼引起的嚴重視功能損害目前仍無確切可靠而有效的治療方法，近年來我們運用中藥益陰明目合劑治療該病獲得了滿意的臨床

5、療效。本課題通過觀察益陰明目合劑對高眼壓大鼠超微構造的影響，進一步討論其作用機制，為臨床應用提供根據。2實驗方法2.1模型制作與取材60只ister大鼠隨機分為空白組、造模組、預防組、益陰明目合劑低劑量組(低劑量組)、益陰明目合劑高劑量組(高劑量組)、復明片組。其中空白組行正常喂養20d；造模組高眼壓造模后喂養20d；預防組益陰明目合劑按照2l/kg喂養20d，高眼壓造模后喂養20d；益陰明目合劑低、高劑量組造模后分別以5l/kg、10l/kg喂養20d，復明片組造模后按照0.15g/kg喂養20d。造模方法為0.5戊巴比妥10l/lkg腹腔注射麻醉加眼球外表麻醉后，將連接生理鹽水輸液管的7號

6、輸液針頭直接刺入ister大鼠雙眼前房，輸液瓶距大鼠雙眼高度為145，此時在眼內形成約110Hg的眼壓，可觀察到球結膜蒼白，眼底血流中斷，視神經網膜缺血。加壓1.5h拔出針頭。每組喂養完畢后，取雙側視盤篩板后視神經纖維，約12大小，迅速置入3%戊二醛固定液，4h后入磷酸緩沖液(PB)并置4冰箱保存。轉貼于論文聯盟.ll.2.2透射電鏡標本的制備與觀察在視盤篩板后視神經纖維標本中，每組隨機選取5例，進展常規超薄切片制備：3%戊二醛和1%鋨酸雙固定，逐級乙醇和丙酮脫水，Epn812環氧樹脂包埋，LKB-型超薄切片機切片(厚度約70n)，醋酸雙氧鈾和枸櫞酸鉛電子雙染色，JE-1200EX電鏡觀察并拍

7、照。3實驗結果預防組、低、高劑量藥物干預組，復明片組的視盤篩板后視神經纖維均好于模型組，略差于空白對照組。3.1對照組圖1髓鞘膜完好，沒有明顯異常；軸索中微絲微管排列規那么，線粒體構造明晰，嵴形態正常。神經纖維間膠質細胞的細胞器豐富，可見細胞核、內質網、高爾基復合體、線粒體、溶酶體等，其超微構造正常。3.2模型組圖2髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列紊亂，線粒體腫脹或部分空化，嵴構造缺失。神經纖維間膠質細胞的細胞器稀疏，核周池腫脹形成多個大泡，內質網和線粒體腫脹嵴構造缺失，其超微構造異常。圖3低倍下另一個視野。髓鞘膜斷裂、扭曲、層面別離；軸索中微絲微管缺失、線粒體腫脹或空化，以致整個軸索被均勻的高

8、密度物質占據，超微構造極度異常。3.3預防組圖4髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列規那么。神經纖維間膠質細胞的細胞器豐富，超微構造根本正常，核周池與部分內質網和線粒體有輕度腫脹或模糊。圖5髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列規那么，大多數線粒體構造明晰，嵴形態正常。3.4低劑量藥物干預組圖6髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列規那么。神經纖維間膠質細胞的細胞器可見，核周池、內質網和線粒體腫脹。圖7低倍下另一個視野，大部分髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列規那么，線粒體構造根本正常。仍有一些髓鞘膜斷裂、扭曲、層面別離；軸索中微絲微管缺失、線粒體腫脹或空化，以致整個軸索被均勻的高密度物質占據。3.5高劑量藥物干預組圖

9、8髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列規那么，線粒體構造根本正常。神經纖維間膠質細胞的細胞器可見，核周池、內質網輕度腫脹。圖9低倍下另一視野，髓鞘膜完好，沒有明顯異常；大部分軸索中微絲微管排列規那么，線粒體構造明晰，嵴形態正常。仍有一些髓鞘膜扭曲。3.6復明片干預組圖10髓鞘膜完好；軸索中微絲微管排列規那么，線粒體構造根本正常。神經纖維間膠質細胞的細胞器豐富，核周池、高爾基復合體、內質網有輕度腫脹。圖11低倍下另一視野，髓鞘膜完好，沒有明顯異常；大部分軸索中微絲微管排列規那么，線粒體構造明晰，嵴形態正常。仍有一些髓鞘膜扭曲。4討論在發生青光眼疾病時，眼壓升高能造成視神經缺血缺氧性損害，筆者應用電鏡技

10、術從形態學角度證實這一點，并初步討論了中藥在預防和治療該損害方面的作用。決定眼內組織部分血液供給的因素包括灌注壓和部分阻力，眼的灌注壓等于部分血壓與眼壓之差，當發生青光眼時，眼壓升高，部分灌注壓降低甚至接近于零，此時眼的自動調節機制無法調節眼內組織的血供，眼內組織發生缺血缺氧。因此缺血缺氧成為青光眼重要的病理改變。筆者采用了電鏡的樣品制備方法,既進步了光鏡照片的分辨率,又可使顯微和亞顯微構造對應分析。電鏡觀察結果顯示:預防組、低/高劑量組、復明片組顯微構造均好于模型組，能顯著改善視神經的纖維鞘膜、微絲微管，線粒體得到很好的修復，顯著改善了視神經缺血缺氧損害。其中高劑量組對髓鞘膜、微絲微管及線粒

11、體的改善明顯好于低劑量組，臨床應用可選用高劑量對患者進展治療。預防組和高劑量改變相似，以預防為主治療時較小劑量即可以到達很好效果。高劑量與復明片比擬相似，對高爾基復合體的改善略強于復明片，其機理有待于進一步研究。現代藥理研究說明，本方中的單味中藥或組方用藥具有去除自由基的作用。金昔陸1采用離體大鼠肝線粒體膜的脂質過氧化模型和黃嘌呤氧化酶-魯米諾化學發光法，研究來自內南五味子的戈米辛J對脂質過氧化的影響和去除超氧陰離子自由基(-2)的才能，結果說明戈米辛J具有抑制羥自由基(H)誘導的脂質過氧化和去除-2的作用。五味子能進步血清SD活性，對氧自由基具有顯著拮抗作用,減輕脂質過氧化對組織或細胞的損傷，增強機體對自由基損傷的防御機能2。馬志茹等3通過單掃示波極譜法檢測枸杞子和黃精對-2和羥自由基(H)的抑制作用,來研究枸杞子和黃精對活性氧自由基(-2和H)的去除作用，結果說明，枸杞子和黃精對-2和H具有明顯的抑制作用，