1、專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題1 DNA的粗提取與鑒定閱讀與思考1.DNA的粗提取與鑒定的原理有哪些？2.DNA的粗提取與鑒定的操作分為幾步，每一步應(yīng)如何操作，操作的目的是什么？一、實驗原理1.血細(xì)胞在蒸餾水中會滲透吸水而破裂，釋放出內(nèi)容物。2.洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但對DNA沒有影響。3.DNA在物質(zhì)的量濃度為0.14 molL的氯化鈉溶液中的溶解度最低，利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。4. DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。5.DNA遇二苯胺（沸水?。兂伤{(lán)色。二、實驗設(shè)計1、實驗材料的選取雞血細(xì)胞做實驗材料。原因：1、雞血細(xì)胞核DNA含量豐富，材

2、料易得2、雞血細(xì)胞極易吸水脹破若是動物細(xì)胞，如何獲取DNA濾液？為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂？在低濃度的溶液中紅細(xì)胞會吸水脹破。二、實驗設(shè)計2、破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液若是植物細(xì)胞，如何獲取DNA濾液？加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA釋放；食鹽有利于DNA溶解。二、實驗設(shè)計2、破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液濾液中的雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成分？為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠除去雜質(zhì)？可能有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)用高濃度的鹽溶液能除去高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使DNA析出，能除去在低鹽溶液中的雜質(zhì)。二、實驗設(shè)計3、去除濾液中的雜質(zhì)

3、方案二與方案三的原理有什么不同？方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白質(zhì)，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三是利用DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離。二、實驗設(shè)計3、去除濾液中的雜質(zhì)濾液+同體積95%冷卻酒精 白色絲狀物析出：鑒定：100DNA二苯胺 藍(lán)色物二、實驗設(shè)計4、DNA的析出與鑒定方法步驟加入物質(zhì)目的1.制備雞血細(xì)胞液2.提取細(xì)胞核物質(zhì)3.溶解核內(nèi)的DNA4.析出含DNA的粘稠物5.濾出含DNA的粘稠物6.DNA的黏稠物再溶解7.過濾含DNA的NaCl溶液8.提取雜質(zhì)較少的DNA9.DNA的鑒定檸檬酸鈉溶液20 m1蒸餾水2 mo1 /L的NaCI溶液蒸餾水2 mo1 /L的NaCI溶液冷卻的95 的酒精二苯胺試劑加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂 溶解DNA 使2mol/L的NaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得DNA最大限度地釋出 使含DNA