1、正交實驗提取兩棲蓼中生物堿的研究【摘要】目的研究利用有機溶劑提取兩棲蓼中生物堿的最優條件。方法以乙醇的水溶液為提取劑，利用正交實驗的方法設計實驗條件。結果溶劑提取法提取兩棲蓼中生物堿的最正確條件為：乙醇濃度75%，提取時間3h，固液比112。結論利用正交實驗確定了兩棲蓼中生物堿提取的最正確條件：乙醇濃度75%，提取時間3h，固液比112。【關鍵詞】兩棲蓼乙醇提取生物堿正交實驗兩棲蓼PlygnuaphibiuL.，生于湖泊、河流淺水中和水邊濕地，分布于吉林、遼寧、河北、山西、山東、陜西、湖北、云南、貴州等地。兩棲蓼為蓼科蓼屬植物，蓼科植物藥用歷史悠久，歷代本草均有收載，大多具有清熱解毒、理氣止滯

2、、除濕化滯、活血化瘀、固脫等成效，用于癰癤瘡毒、痢疾腸炎、赤白帶下、跌打損傷、月經不調等癥14。1儀器與材料1.1儀器水蒸氣蒸餾裝置；脂肪抽出器天長市千玻教學儀器；HH-S恒溫水浴鍋江蘇省金壇市正基儀器。1.2材料兩棲蓼，2022-05采自淮南師范學院泉山校區，經安徽淮南師范學院生物系謝影老師鑒定為兩棲蓼；化學試劑均為分析純。2方法2.1材料預處理新穎的兩棲蓼全草用去離子水洗凈切成塊盛在托盤中，放入105的電熱鼓風枯燥箱中殺青10in，然后在溫度為80的電熱鼓風枯燥箱中烘干約24h。將烘干的兩棲蓼在粉碎機中粉碎，過60目篩備用。2.2實驗設計乙醇濃度、提取時間、固液比是影響生物堿提取的主要因素

3、，選用以上3個考察因素，每個因素設立3個程度(表1)57。按照正交實驗表以乙醇為浸提液提取干粉中的生物堿，提取完成后過濾，棄去殘渣。對提取液進展蒸餾回收得到乙醇和提取物。向提取物中參加適量1l/L的硫酸，形成酸水液和沉淀，濾去酸水液中的沉淀，參加適量的濃氨水調至pH值910。然后加氯仿萃取，生物堿溶在下層的氯仿層中，用分液漏斗別離。對萃取液進展蒸餾回收氯仿和提取物，蒸去氯仿后稱量計算提取率8，9。表1因素程度略2.3實驗步驟取10g兩棲蓼干粉，用濾紙包好放在干凈枯燥的脂肪抽出器中，再向脂肪抽出器中按比例參加的不同濃度的乙醇和幾粒沸石，用水浴鍋加熱，不斷回流，按照實驗設計回流一定時間后再將回流后

4、的液體進展恒溫蒸餾要重新加沸石回收乙醇，直到沒有液體蒸出為止，此時剩下的即為粗產物，含有一定的雜質，下一步將進展提純。向提取物中參加適量1l/L的硫酸，形成酸水液和沉淀，濾去酸水液中的沉淀，參加適量的濃氨水調至pH值910。將酸水液倒入分液漏斗中參加30l的氯仿萃取3次，合并3次的氯仿層于已加沸石稱重的錐形瓶中，再將錐形瓶放入恒溫水浴鍋蒸餾回收氯仿。錐形瓶中剩余物即為純潔的生物堿。轉貼于論文聯盟.ll.3結果3.1提取率測定將提取的氯仿層放入已稱重質量為1的錐形瓶中，蒸去氯仿即得純潔的生物堿，再次稱重得錐形瓶質量2。生物堿提取率=(2-1)/兩棲蓼干粉質量。結果見表2。表2正交實驗結果略3.2

5、極差分析法對總生物堿提取工藝的影響經比照實驗最后確定出最優工藝條件通過表3正交實驗結果方差分析說明，3個因素均顯著影響兩棲蓼生物堿的提取率。由極差分析可知影響因素:乙醇濃度固液比提取時間，兩棲蓼生物堿提取的最正確條件為固液比112，提取時間3h，乙醇濃度75%。表3L9(33)的正交實驗結果略3.3最正確工藝條件確定優選出最正確工藝后，進展驗證實驗，以確保重復性和正確性。按A3B21即用兩棲蓼干粉10g，112的固液比，75%的乙醇濃度，每次提取3h的條件下進展3次平行實驗。結果見表4。表4A3B21下總堿的提取量略由表4可知，在A3B21條件下兩棲蓼總生物堿提取率高于表3中的實驗結果，總生物堿得率為10.467%，在本實驗的范圍內，A3B21為最正確的工藝選擇。通過重復驗證得知，該條件確實為最正確條件。4討論該實驗就是研究利用有機溶劑提取兩棲蓼中活性成分生物堿10，11。正交實驗結果說明，在以乙醇為浸提液提取兩棲蓼內生物堿