臨床免疫學檢驗實驗：單個核細胞的分離與活性鑒定_第1頁
臨床免疫學檢驗實驗：單個核細胞的分離與活性鑒定_第2頁
臨床免疫學檢驗實驗：單個核細胞的分離與活性鑒定_第3頁
臨床免疫學檢驗實驗：單個核細胞的分離與活性鑒定_第4頁
臨床免疫學檢驗實驗：單個核細胞的分離與活性鑒定_第5頁
已閱讀5頁，還剩6頁未讀， 繼續免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、單個核細胞的分離與活性鑒定實驗目的掌握外周血單個核細胞分離操作基本步 驟，注意事項；了解分離免疫細胞的常用方法；實驗原理各種血細胞的體積，形態，密度不同；紅細胞和粒細胞的密度較大，為1.092左右；淋巴細胞和單核細胞的密度為1.0761.090；血小板為1.0301.035。利用一種密度介于1.0761.090之間、近于等滲的溶液（聚蔗糖-泛影葡胺）進行等密度梯度離心，從而分離不同類別的血細胞；臺盼藍染色原理：試劑和器材1. 淋巴細胞分離液；2. 標本 肝素抗凝外周血；3. 生理鹽水；4. 0.5%臺盼藍染液5. 天平;6. 離心機；7. 顯微鏡；8. 試管，玻片實驗步驟1. 先取2ml淋巴細

2、胞分離液于離心管中；2. 另取一干凈試管，依次加入2ml 生 理鹽水和2ml 外周血， 并 混勻；3. 沿管壁緩慢將稀釋外周血疊加到淋巴細胞分離液上；4. 配平后，離心2000rpm， 20min；5. 小心吸出云霧層，移入另一試管；6. 加入4X體積生理鹽水，混勻，1500rpm, 10min, 棄上 清，重 復洗滌2次；7. 加1ml生理鹽水重懸；8. 取細胞懸液50l與等體積臺盼藍溶液混勻，靜置5min 后，鏡下計數200個細胞，統計活細胞數比例； 結果判斷及分析1. 活細胞折光性強，胞膜光滑，對染料排斥，拒染；2. 死細胞胞膜不完整，通透性增加，鏡下可見被染成藍色； 活細胞數率=活細胞數/總細胞數X100%注意事項1. 全程操作動作要輕，防止機械損傷；2. 淋巴分離液直接加入管底，避免浸沾管 壁；3. 加樣順序，切勿顛倒；4. 離心要配平，第一次離心時，要調至自 然降速；5. 收集目的細胞時，盡量避免吸入分離 液；方法學評價操作簡單，成本低，基本能夠滿足臨床和科研需要；純度不夠；思考題1. 現分離得到4ml單個核細胞懸液，鏡下用細胞計數板計數周圍4大格， 計數結果為600， 現欲將其濃度調整

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論