1、項目名稱稱：基于“肝肝藏血主主疏泄”的臟象象理論研研究首席科學學家：王慶國 北京中中醫藥大大學起止年限限：20111.1至至20115.88依托部門門：國家中醫醫藥管理理局二、預期期目標本項目的的總體目目標： 1、系系統梳理理肝藏血血主疏泄泄的臟象象理論，澄清其其歷史源源流，明明確理論論的含義義、內容容及相互互關系，發展與與創新肝肝臟象理理論，探探索臟象象學說及及中醫理理論發展展與創新新的新模模式。 2、確立立肝藏血血主疏泄泄功能異異常的主主要宏觀觀表現及及微觀指指標，建建立肝藏藏血主疏疏泄功能能異常狀狀態的判判別模式式。 3、闡釋釋肝藏血血主疏泄泄功能的的生理調調控機制制，分析析肝藏血血與主

2、疏疏泄間的的關聯網網絡。 4、揭示示從肝論論治臨床床療效產產生的機機制和規規律。 5、闡釋釋肝藏血血主疏泄泄在神經經內分泌泌免疫網網絡中特特異的功功能區域域、傳導導通路以以及特異異的反應應狀態，揭示肝肝藏血主主疏泄的的基本科科學內涵涵。 五年預期期目標: 1.闡明明肝藏血血主疏泄泄的基本本含義、學說內內容及兩兩者間的的關系。闡明肝肝藏血主主疏泄的的應用范范圍與原原則。 2.澄清清肝藏血血主疏泄泄理論的的演變史史，探索索適合臟臟象學說說及中醫醫理論發發展與創創新的新新模式。 3、編制制健康人人群調查查量表，完成3300例例正常健健康人四四時八節節的動態態追蹤調調查研究究；1220例健健康志愿愿者

3、兩種種應激狀狀態前后后的比較較研究。建立肝肝藏血主主疏泄調調控機體體的狀態態判別模模式，探探討肝藏藏血與主主疏泄的的內在調調控機制制及內在在相關性性。 4、完成成1000只大鼠鼠、200只樹鼩鼩四時八八節的動動態研究究。5、完成成1000例月經經規律的的健康志志愿者月月經周期期觀測及及應激反反應測試試。6、完成成1200例健康康志愿者者兩種應應激狀態態前后的的比較研研究。建建立肝藏藏血主疏疏泄調控控機體的的狀態判判別模式式，探討討肝藏血血與主疏疏泄的內內在調控控機制及及內在相相關性。7、編制制四種疾疾病的臨臨床調查查量表，完成每每種疾病病各8000例以以上的臨臨床橫斷斷面調查查；建立立肝藏血血

4、主疏泄泄功能異異常狀態態的判別別模式。8、完成成臨床觀觀測與干干預，五五種疾病病各3000例；揭示五五種疾病病從肝論論證的機機制和證證治規律律。9、建立立4-88種可反反映肝藏藏血主疏疏泄功能能異常狀狀態的抑抑郁癥等等5種疾疾病的病病證結合合動物模模型及其其判別方方法。10、完完成動物物模型功功能區神神經元活活性、血血管反應應性、腸腸敏感性性、內分分泌腺體體反應性性等功能能測定、化學物物質的含含量變化化、化學學物質的的反饋作作用等相相關指標標的檢測測，完成成關鍵組組織部位位的基于于測序技技術的轉轉錄組（數字基基因表達達譜）、小RNNA分析析；完成成不少于于20個個關鍵分分子的mmRNAA及蛋白

5、白質水平平的驗證證；完成成關鍵分分子相關關調控網網絡的分分析，揭揭示出與與肝藏血血主疏泄泄功能密密切相關關的共性性分子網網絡。 11、完完成養血血調肝方方對抑郁郁癥等55種疾病病的反證證及該方方對肝藏藏血主疏疏泄功能能密切相相關的共共性分子子網絡的的作用機機制研究究；完成成實質性性肝損傷傷對肝藏藏血主疏疏泄功能能密切相相關的共共性分子子網絡影影響的研研究。 12、完完成相關關各項數數據分析析及挖掘掘；完成成信息管管理系統統的平臺臺建設；建立基基于熵理理論分析析方法與與隱結構構分析方方法的應應用規范范。 13、發發表相關關學術論論文3000篇左左右，其其中SCCI 220篇左左右，出出版相關關學

6、術著著作2部部。 14、培培養博士士研究生生50名名，碩士士研究生生80名名，博士士后6名名；形成成多學科科交叉、中青年年為主的的創新性性研究梯梯隊。三、研究究方案1、以肝肝藏血主主疏泄為為核心的的肝臟象象理論研研究本項目應應用歷史史分析的的方法進進行中醫醫理論研研究。即即采用知知識考古古學等思思想史研研究思路路與中醫醫傳統文文獻方法法結合，系統梳梳理從先先秦時期期到新中中國成立立前歷代代中醫及及相關文文獻，以以肝主疏疏泄為切切入點，分析肝肝主疏泄泄及相關關專題的的對象形形成、陳陳述方式式、概念念的擴散散、主題題策略的的選擇等等內容，對文獻獻中肝藏藏血主疏疏泄應含含義及其其診治體體系生成成變化

7、進進行具體體分析，以發現現構成某某一時期期醫學思思想整體體的深層層結構“知知識型”或“基本信信碼”，也就就是話語語，根據據話語的的轉變來來分析肝肝藏血主主疏泄應應含義及及其診治治體系的的演變及及背后的的原因，以分析析其形成成和轉變變的歷史史；在肝肝藏血主主疏泄及及其相關關理論學學術發展展史的基基礎上，確立其其理論內內涵、應應用范圍圍與原則則，論證證其在臟臟象學說說、臟腑腑辨證以以及臨床床各科疾疾病診治治中的地地位與作作用，解解決學術術分歧與與爭議。1.1 肝藏血血主疏泄泄及其相相關理論論的知識識考古學學研究話語構構成分析析：應用用知識考考古學，對文獻獻中肝藏藏血主疏疏泄及其其相關研研究單元元進

8、行話話語構成成分析，分別對對肝藏血血主疏泄泄及其相相關研究究單元在在辨證論論治體系系中進行行對象形形成、陳陳述方式式、概念念擴散、主題從從屬等話話語構成成的四要要素分析析。即：歷代醫醫學文獻獻中肝藏藏血主疏疏泄對象象的形成成，也就就是在診診治過程程中應用用肝藏血血主疏泄泄疾病范范圍的確確定、肝肝藏血主主疏泄病病癥之間間的劃分分方法；肝藏血血主疏泄泄在診治治體系中中陳述方方式，即即肝藏血血主疏泄泄以什么么方式、與哪些些概念、以什么么次序關關系出現現在診治治體系中中；肝藏藏血主疏疏泄的界界定，即即在診治治體系中中，在肝肝藏血主主疏泄與與肝藏血血主疏泄泄等其它它概念、學說的的相互關關系中，肝藏血血主

9、疏泄泄是怎樣樣被界定定的；肝肝藏血主主疏泄的的從屬的的主題，即肝藏藏血主疏疏泄是在在論述什什么問題題時才出出現。話語轉轉型分析析：分析析肝藏血血主疏泄泄及其相相關研究究單元知知識型的的斷裂點點，確定定其話語語形成系系統的成成分轉換換、話語語形成體體系特征征性的關關系轉換換、各種種不同話話語形成成規則之之間的轉轉換、各各種實證證性之間間的關系系的轉換換。1.2 肝藏血血主疏泄泄及其相相關理論論學術發發展史的的確立在肝藏血血主疏泄泄及其相相關理論論等的關關系中確確定肝藏藏血主疏疏泄的含含義與應應用范圍圍、應用用原則，并在肝肝藏血主主疏泄臨臨床適用用范圍改改變的基基礎上確確立其學學術的演演變史；闡明

10、其其所在診診治體系系的構成成要素、診斷和和治療原原則、處處方原則則及其從從一個時時期到另另一個是是其轉換換的歷史史。1.3 肝藏血血主疏泄泄理論內內涵的確確定在肝藏血血主疏泄泄及其相相關理論論學術發發展史的的基礎上上，確立立其理論論內涵、應用范范圍與原原則，論論證其在在臟象學學說、臟臟腑辨證證以及臨臨床各科科疾病診診治中的的地位與與作用，解決學學術分歧歧與爭議議。2、生理理狀態下下肝藏血血主疏泄泄功能的的調控機機制研究究2.1 依據現現代文獻獻提取的的信息，編制半半開放式式健康人人群調查查他評量量表。遵遵循臨床床流行病病學抽樣樣調查的的相關各各項要求求，依據據20005年全全國1%人口抽抽樣調

11、查查資料數數據，在在全國多多家醫院院的體檢檢中心、學校及及社區，開展體體檢無器器質性病病變中青青年人群群3000例（男男：女=1：11）動態態追蹤調調查，分分別在一一年四時時八節（立冬、冬至、立春、春分、立夏、夏至、立秋、秋分），分時時間段從從軀體癥癥狀、情情緒、生生活質量量、生活活事件、相關指指標（生生命特征征、體質質體能、血常規規、一滴滴血、虹虹膜儀、脈象儀儀、舌象象儀、面面色分析析儀、神神經遞質質、退黑黑素等）及一般般情況等等信息，建立數數據庫。 2.2采采用方差差分析、秩和檢檢驗等統統計方法法，分析析宏觀表表現及微微觀指標標的關聯聯性；在在不同季季節的差差異性；以及隨隨季節變變化的動動

12、態規律律。 2.3 應用隱隱結構模模型對調調查數據據庫進行行多維樣樣本聚類類分析，由計算算機自動動搜索對對調查人人群進行行分類，分析其其中與肝肝藏血主主疏泄狀狀態相關關的人群群，而后后提取該該人群的的特征性性癥狀與與指標，建立肝肝藏血主主疏泄功功能狀態態的判別別模型。 2.4動動物四時時八節的的動態觀觀測選取W大大鼠1000只，樹鼩220只，根據北北京市氣氣象局氣氣象科學學研究所所提供。20111年11月-220166年1月月5年的的四時八八節的氣氣候參數數：包括括日照百百分數、平均溫溫度、日日溫差、平均氣氣壓、日日降水量量、平均均風力、平均相相對濕度度、平均均濕度/平均溫溫度共88項。分分別

13、選取取四時八八節（立立冬、冬冬至、立立春、春春分、立立夏、夏夏至、立立秋、秋秋分）八八個時間間點，動動態觀察察動物的的表征，進行褪褪黑素、神經遞遞質等多多項指標標的檢測測，建立立數據庫庫，描述述動物四四時八節節各項指指標的動動態變化化曲線，提取動動物狀態態的核心心指標，建立動動態變化化判別模模式，分分析肝藏藏血主疏疏泄功能能與時間間節律的的相關性性。3、健康康志愿者者應激狀狀態下肝肝藏血主主疏泄功功能的調調控機制制研究3.1婦婦女月經經周期應應激研究究：選取取月經規規律的健健康志愿愿者1000人，連續觀觀測其三三個月經經周期的的情緒、軀體癥癥狀以及及一般性性指標的的變化，并與月月經期、黃體期期

14、、月經經后期分分別進行行應激狀狀態測試試，主要要進行心心理認知知測試，檢測多多導腦電電等指標標，建立立數據庫庫進行分分析，探探索月經經周期中中肝藏血血狀態變變化與疏疏泄功能能的相關關性，并并總結肝肝藏血主主疏泄異異常狀態態下應激激變化規規律，探探討肝藏藏血主疏疏泄的內內在機制制。3.2健健康志愿愿者應激激刺激前前后不同同狀態與與肝藏血血主疏泄泄關系的的研究：選取1120例例（男：女=11：1）健康志志愿者，采用情情緒圖片片、面孔孔、音樂樂、聲音音、文字字和影片片等刺激激材料，根據研研究需要要控制其其情緒類類型以及及愉悅度度和喚醒醒度水平平。通過過自我回回憶、材材料刺激激、社會會交互作作用等誘誘

15、發手段段使被試試處于一一定情緒緒狀態。在情緒緒表達抑抑制、認認知重評評、向上上和向下下情緒調調節、情情緒分類類、內隱隱情緒任任務、快快速呈現現、視覺覺掩蔽、線索靶范式式、情感感啟動范范式、延延遲反應應任務、n-bbackk等經典典的實驗驗范式中中，綜合合運用行行為學測測試、生生理多導導儀記錄錄、事件件相關電電位（EERP）和功能能磁共振振成像（fMRRI）等等技術手手段，從從反應時時、正確確率、EERP成成分的波波幅和潛潛伏期、腦區激激活以及及腦功能能聯結等等多個方方面分析析肝臟在在情緒產產生、調調節和情情緒與認認知相互互作用中中的地位位及相應應心理、生理機機制。 給予志志愿者進進行較大大強度

16、的的運動任任務負荷荷，通過過主觀報報告、問問卷調查查和客觀觀評分確確定和劃劃分研究究對象的的情緒狀狀態。進進行運動動前后心心理量表表評測、視力系系統測定定、腦電電圖、腦腦血流圖圖、肝血血流圖的的檢測，以及微微循環系系統指標標的檢測測，探討討運動前前后肝藏藏血功能能的調節節機制。并分析析藏血與與疏泄之之間的相相關性。4、信息息學管理理系統及及分析方方法研究究4.1 編寫數數據庫程程序，應應用現代代信息管管理學方方法，根根據研究究中文獻獻、臨床床、實驗驗各項研研究數據據的特點點，編制制關聯數數據庫，對相關關信息進進行統一一規范、標示及及編碼，從而形形成統一一的數據據庫錄入入平臺。 4.2針針對研究

17、究目標及及相關研研究數據據的特點點，進行行算法研研究，完完善基于于熵理論論的數據據分析方方法及隱隱結構模模型的分分析方法法，并編編寫為軟軟件開展展網絡化化運行，為整體體項目搭搭建數據據分析平平臺。4.3應應用兩種種數據分分析方法法，對四四種疾病病的臨床床宏觀表表現及微微觀指標標進行綜綜合分析析，提取取與肝藏藏血主疏疏泄相關關的病證證結合下下宏觀表表現與微微觀表現現的共性性特點和和個性特特征。4.4應應用兩種種數據分分析方法法，對四四種疾病病提取肝肝藏血主主疏泄相相關的病病證結合合下動物物模型的的宏觀表表征與微微觀指標標進行分分析，提提取其共共性特點點和個性性特征，建立動動物模型型的判別別模式。

18、4.5對對項目組組臟象研研究的各各項數據據進行綜綜合分析析，提煉煉肝藏血血主疏泄泄的共性性生物學學基礎。4.6 應用信信息平臺臺對各項項研究進進行實時時錄入、盲法核核對及質質量監控控。5、抑郁郁癥、經經前期綜綜合征從從肝論治治的研究究5.1 流行病病學調查查5.1.1編制制調查表表。由專專家組根根據研究究目的，通過參參考大量量文獻，充分考考慮可行行性及有有效性，設計抑抑郁癥（輕中度度）、經經前期綜綜合征（重度，PMDDD）流流行病學學調查內內容，并并進行預預調查，在此基基礎上，修改制制定研究究用調查查表。5.1.2開展展流行病病學調查查。應用用編制的的調查表表，對符符合上述述疾病診診斷和納納入

19、標準準的患者者開展流流行病學學橫斷面面調查，采集患患者的一一般個人人信息、軀體癥癥狀、情情緒精神神癥狀、舌象、脈象，并對部部分患者者進行相相關微觀觀指標檢檢測。5.1.3資料料整理與與分析。建立流流行病學學研究數數據庫，對資料料進行邏邏輯檢查查和處理理；運用用方差分分析、LLogiist回回歸分析析等方法法，確立立肝主疏疏泄調暢暢情志功功能異常常的主要要宏觀表表現及微微觀指標標，建立立宏觀與與微觀相相結合的的肝主疏疏泄調暢暢情志功功能異常常狀態的的判別模模式。5.2 臨床療療效研究究5.2.1從肝肝論治抑抑郁癥（輕中度度）臨床床療效。病例選選擇 符合中中國精神神疾病分分類方案案與診斷斷標準第第

20、3版（CCMMD-）的抑抑郁癥發發作診斷斷標準且且中醫辨辨證為肝肝氣郁證證、符合合納入標標準的患患者。分組方方法 采用隨隨機數字字表將受受試者隨隨機分配配至方藥藥對證組組（自擬擬方舒郁郁）、方方藥次對對證組（自擬方方舒郁加加減）。療程及及隨訪 療程程8周，對治療療后臨床床痊愈、顯效及及有效的的患者，治療后后長期隨隨訪，觀觀察是否否復發。臨床療療效評定定方法 于治治療前、治療11w、22w、44w、66w、88w末，采用漢漢密爾頓頓抑郁量量表、臨臨床療效效總評量量表、疾疾病嚴重重程度量量表、中中醫證候候積分表表、副反反應量表表進行療療效及副副反應評評定。5.2.2從肝肝論治經經前期綜綜合征（重度

21、，PMDDD）臨臨床療效效。病例選選擇 符合西西醫經前前期綜合合征（重重度，PPMDDD）診斷斷標準且且中醫辨辨證為肝肝氣逆證證、符合合納入標標準的患患者。分組方方法 采用隨隨機數字字表將受受試者隨隨機分配配至方藥藥對證組組（自擬擬方白香香丹）、方藥次次對證組組（自擬擬方白香香丹加減減）。療程及及隨訪 療程程2個月月經周期期，對治治療后臨臨床痊愈愈、顯效效及有效效的患者者，治療療后進行行遠期隨隨訪，觀觀察是否否復發。臨床療療效評定定方法 采用用癥狀狀嚴重程程度每日日報告、經經前期綜綜合征（重度，PMDDD）肝肝氣逆證證癥狀嚴嚴重程度度醫生記記錄表、副反反應量表表進行療療效和副副反應評評定。5.

22、3臨臨床療效效的作用用機制5.3.1臨床床研究腦功能能區定位位研究 小樣樣本選取取健康志志愿者，抑郁癥癥（輕中中度）肝肝氣郁證證患、經經前期綜綜合征（重度，PMDDD）肝肝氣逆證證患者，采用BBLODD-fMMRI技技術，觀觀察上述述研究對對象治療療前后相相關腦區區（激活活、抑制制）的位位點及其其數目、強度，并與對對照組比比較，探探討其腦腦功能活活動區的的異同點點。定位下下的腦功功能區血血流灌注注及相關關指標信信號檢測測 利利用利用用單光子子/正電電子發射射計算機機斷層顯顯像（SSPECCT/PPET）及磁共共振波譜譜成像（MRSS）技術術，在研研究內容容基礎上上，探查查其局部部腦血流流狀態及

23、及葡萄糖糖物質代代謝變化化，評估估其腦功功能，揭揭示抑郁郁癥（輕輕中度）肝氣郁郁證患、經前期期綜合征征（重度度，PMMDD）肝氣逆逆證相關關腦區功功能改變變。外周聯聯系途徑徑相關指指標變化化 檢檢測各組組受試對對象血漿漿中相關關微觀指指標，并并通過組組間及治治療前后后對照，比較各各組療效效差異，探討抑抑郁癥（輕中度度）、經經前期綜綜合征（重度，PMDDD）不不同病證證的神經經體液機機制。5.3.2模型型動物及及離體細細胞實驗驗。動物模模型造模模及評價價 經經前期綜綜合征（重度，PMDDD）肝肝氣逆證證大鼠模模型：應應用情志志刺激為為主多因因素造模模法制備備經前期期綜合征征（重度度，PMMDD）

24、肝氣逆逆證大鼠鼠模型。動物模模型評價價：采集集模型動動物證候候表征進進行證候候歸屬評評價，檢檢測模型型動物生生物指標標進行疾疾病歸屬屬評價。 動物物模型相相關腦區區定位及及定位下下的神經經機制 進行行相應腦腦區定位位并應用用腦微透透析灌流流技術，實時檢檢測去甲甲腎上腺腺素（NNE）、5-羥羥色胺（5-HHT）等等關鍵指指標水平平變化。動物模模型外周周血及不不同腦區區關鍵指指標變化化特點與與關鍵基基因功能能驗證 檢測測模型動動物相關關腦區、外周血血中關鍵鍵生物指指標含量量，篩選選出與經經前期綜綜合征（重度，PMDDD）肝肝氣逆證證密切相相關的神神經遞質質和激素素。進行行模型動動物的基基因表達達譜

25、分析析及關鍵鍵基因的的分布、定位及及功能驗驗證，篩篩選其發發病及藥藥物干預預密切相相關靶基基因。相關指指標的分分子機制制及其信信號轉導導 取取正常大大鼠相應應部位神神經元進進行體外外培養，用上述述病證的的人或動動物血清清、腦脊脊液處理理細胞，免疫熒熒光和WWestternn Bllot尋尋找病證證相關神神經遞質質或激素素的受體體及其介介導的細細胞內信信號轉導導。6、腸易易激、高高血壓、肝硬化化三種疾疾病病證證臨床流流行病學學橫斷面面調查6.1 通過對對三種疾疾病現代代文獻分分析，提提取與肝肝藏血主主疏泄相相關的癥癥狀、證證候要素素、證候候；依據據此信息息建立臨臨床信息息采集量量表，通通過預調調

26、查進行行量表的的聯合信信度檢測測。 6.2 應用臨臨床信息息采集表表，在全全國多中中心同步步開展大大樣本約約8000例/病病的臨床床流行病病學橫斷斷面普查查。分別別對符合合現代疾疾病診斷斷和各項項納入標標準的患患者進行行臨床軀軀體癥狀狀、情緒緒精神癥癥狀的調調查，并并采用統統一的檢檢測標準準，檢測測相關實實驗室指指標。其其中主要要指標包包括：三三種疾病病同性指指標血液流流變學指指標、血血脂、血血糖、血血清促腎腎上腺皮皮質激素素釋放激激素（CCRH）；血清清皮質醇醇，血漿漿去甲腎腎上腺素素（NEE）、55-羥色色胺（55-HTT）等；各種疾疾病特有有指標。6.3 建立臨臨床信息息數據庫庫，進行行

27、多種統統計分析析，主要要包括：頻數分分析描述述調查人人群特征征；方差差分析方方法統計計不同疾疾病不同同分期的的差異性性；相關關分析方方法統計計宏觀癥癥狀與微微觀指標標的相關關性；LLogiist回回歸分析析、判別別分析提提取特征征癥狀、指標；并結合合無監督督數據分分析方法法（如基基于熵的的分析、隱結構構模型）確立肝肝藏血主主疏泄功功能異常常的主要要宏觀表表現及微微觀指標標，及其其在三種種疾病中中的共性性表現特特點和個個性特征征；建立立宏觀與與微觀相相結合的的肝藏血血主疏泄泄功能異異常狀態態的判別別模式。7、應用用養血調調肝系列列方劑對對三種疾疾病患者者進行藥藥物干預預7.1按按照三種種疾病現現

28、代醫學學的疾病病診斷標標準，及及較為公公認的中中醫證候候診斷標標準，選選擇腸易易激綜合合征肝郁郁脾虛證證3000例、脾脾胃虛寒寒證1000例；高血壓壓病肝陽陽上亢證證3000例、肝肝火熾盛盛證1000例；肝硬化化脾腎陽陽虛、肝肝氣滯血血瘀證1100例例、肝腎腎陰虛、氣滯血血瘀證2200例例。按照照臨床為為理論創創新服務務，為實實驗研究究奠定基基礎的原原則，按按照1：1：11：1的的比例，分別設設立安慰慰劑對照照組、方方證對應應組、方方證次對對應組、非干預預證候對對照組，參照新新藥創制制的研究究方法，應用養養血調肝肝方劑的的免煎顆顆粒，進進行臨床床干預研研究。 7.2依依據建立立的肝藏藏血主疏疏

29、泄功能能異常狀狀態的判判別模型型編制臨臨床觀測測量表，對納入入研究的的患者分分別在治治療前、治療后后及隨訪訪期，采采集其宏宏觀臨床床癥狀、體征及及微觀指指標，建建立數據據庫。 7.3 應用方方差分析析、秩和和檢驗、判別分分析、因因子分析析、多維維尺度分分析等多多種統計計方法，分析各各項癥狀狀、指標標在治療療前后的的差異性性；不同同證候類類型間的的差異性性；不同同疾病間間的異同同性等。并綜合合分析結結果分析析從肝論論證的干干預機制制及證治治規律。8、肝藏藏血主疏疏泄現代代科學內內涵的實實驗研究究8.1肝肝藏血主主疏泄功功能異常常的病證證結合動動物模型型的構建建8.1.1 建建立公認認的疾病病動物

30、模模型。分分別采用用慢性應應激和嗅嗅球切除除法制備備抑郁癥癥大鼠模模型，采采用孤養養加慢性性不可預預見性應應激和新新生鼠母母子分離離復合避避水應激激法建立立腸易激激綜合征征大鼠模模型，采采用雙腎腎一夾法法和自發發高血壓壓大鼠構構建高血血壓大鼠鼠模型，采用腹腹腔注射射二甲基基亞硝胺胺法和皮皮下注射射四氯化化碳法誘誘導肝纖纖維化大大鼠模型型。以上上的疾病病模型分分別按照照現行的的疾病診診斷標準準進行嚴嚴格的評評價，合合格動物物納入研研究。8.1.2 進進行動態態、全面面的信息息采集。對上述述符合疾疾病診斷斷的動物物模型，從模型型成立的的時間點點起，擬擬定動物物信息觀觀察表，進行規規范化的的動態信信

31、息采集集，以評評價其證證候屬性性。信息息采集表表的條目目主要來來自于：動物實驗驗研究文文獻提示示的反映映疾病的的動物宏宏觀表征征 和反反映證候候屬性的的動物宏宏觀表征征 ；臨床證候候研究文文獻提示示的與證證候密切切相關的的理化指指標；本項目組組的臨床床研究提提示的與與具有診診斷和鑒鑒別診斷斷意義的的臨床癥癥狀和可可用于證證候判別別的理化化指標特特征模式式。8.1.3 動動物證候候屬性的的辨識。 動物物證候屬屬性的辨辨識以臨臨床診斷斷標準為為依據，采用課課題組前前期建立立的以宏宏觀特征征組合、微觀指指標特征征組合、方劑反反證相結結合的三三維動物物證候判判別方法法進行辨辨識。首首先通過過宏觀特特征

32、組合合和微觀觀指標特特征組合合確定各各疾病模模型的證證候演變變規律。通過不不同疾病病造模方方法的比比較，篩篩選出較較優的抑抑郁癥肝肝氣郁結結證、腸腸易激綜綜合征肝肝郁脾虛虛證、高高血壓肝肝陽上亢亢證、肝肝硬化肝肝腎陰虛虛氣滯血血瘀等病病證結合合動物模模型。8.1.4方劑劑反證。在上述述病證結結合動物物模型證證候屬性性穩定的的時間窗窗內，分分別采用用對證的的養血調調肝方藥藥和次對對證的方方藥進行行干預治治療，并并以模型型組和正正常組作作為對照照，進一一步佐證證模型動動物的證證候屬性性。各模模型的干干預藥物物和臨床床組統一一，以相相互應證證。8.2 肝藏血血主疏泄泄的調控控機制研研究8.2.1分組

33、組。通過過上述篩篩選得到到的穩定定的反映映肝藏血血主疏泄泄異常狀狀態的病病證結合合動物模模型作為為實驗組組，以不不符合相相應證候候診斷的的疾病模模型和正正常組作作為對照照，從整整體、器器官、分分子三個個層面分分析肝藏藏血主疏疏泄的調調控機制制，觀測測指標分分為共性性的核心心指標和和反映疾疾病個性性的二級級指標以以及探索索性的基基因分析析指標等等三大類類。8.2.2核心心指標和和疾病相相關的二二級指標標的檢測測。采用用HPLLC電電化學檢檢測、EELISSA、免免疫組化化、RTT-PCCR等，研究： （11）核心心指標圍圍繞慢性性應激相相關的調調控網絡絡，包括括：1）整體體指標：行為學學實驗、腦

34、血流流圖、肝肝血流圖圖、功能能核磁共共振。2）血液液指標：神經遞遞質（包包括DAA、NAA、NEE、5-HT、Achh等）；內分泌泌激素（包括CCRH、ACTTH、皮皮質醇、褪黑素素等）；血管舒舒縮因子子（包括括ET、CGRRP、 AnggII 等）、肝臟合合成（代代謝）的的生物活活性分子子（如 HSPP70、Hcyy 等）。3）組織織檢測指指標：神神經遞質質、激素素及其受受體在特特定腦區區、疾病病相關的的效應器器官的表表達水平平（包括括DA、NA、5-HHT 、皮質醇醇等及其其受體）和病理理形態學學檢測。（2）疾疾病相關關的二級級指標1）抑郁郁癥：氨氨基酸神神經遞質質含量/受體表表達（GGl

35、uNMDDA受體體、GAABAGABBA受體體），離離子通道道和信號號轉導分分子分析析、對信信號轉導導分子調調節物質質（包括括PDEE4等），適應應性調控控分子（包括GGRK、-arrresstinn等）2）腸易易激綜合合征：在在體結腸腸運動、離體結結腸平滑滑肌張力力、離體體腸粘膜膜短路電電流、外外周血PP物質含含量、GGABAA、肥大大細胞活活化程度度觀察、胸腺、脾臟臟臟體指數數計算、T淋巴巴細胞亞亞群水平平分析、外周血血環核苷苷酸水平平、外周周血前列列腺素EE2水平平等。3）高血血壓：224h動動態血壓壓、ATT1、 NO 、ANNP、 AVPP、 CCa2+ PPGI22 、TTXA22

36、、 精精氨酸加加壓素等等。4）肝硬硬化：外外周血HHA、PPCIIII、LLN、IIVCC、 TTGF-1，血血清肝功功能（包包括ALLT,AAST,ALBB等）、肝組織織血管緊緊張素受受體、TTGF1、SSmadd4、SSmadd7等。8.2.3數字字化基因因表達譜譜分析和和smaall RNAA分析。在上述述的研究究結果進進行分析析和整合合，初步步確定肝肝藏血主主疏泄的的共性的的特定反反應腦區區。對特特定反應應區域的的組織樣樣本，采采用測序序技術數數字化基基因表達達譜分析析和smmalll RNNA分析析，結合合生物信信息學分分析，進進一步探探索其可可能的分分子調控控機制。8.2.4共性性

37、調控機機制的提提取。綜綜合研究究結果，采用神神經網絡絡、圖模模型等多多種數據據挖掘方方法，對對上述各各調控分分子進行行關聯和和分析，初步建建立起調調控網絡絡。并實實現分子子、組織織器官和和整體水水平的功功能狀態態的逐級級整合，刻畫出出肝藏血血主疏泄泄的多級級的特定定調控網網絡。8.3養養血調肝肝方干預預的效應應機制研研究8.3.1分組組。采用用本研究究構建的的反映肝肝藏血主主疏泄功功能異常常狀態的的病證結結合動物物模型，隨機分分為模型型組、對對證治療療組、次次對證治治療組，同時設設正常對對照組。8.3.2 肝肝藏血主主疏泄的的分子調調控網絡絡的檢測測。在證證候穩定定的時間間窗內分分組給藥藥，觀

38、察察養血調調肝藥物物對于22.2.4獲得得的特定定指標群群的影響響，從而而驗證肝肝藏血主主疏泄的的調控網網絡并闡闡明養血血調肝藥藥物的作作用機制制。技術路線線圖四、年度度計劃年度研究內容容預期目標標第一年1、研究究實施方方案的論論證與討討論2、文獻獻整理研研究。3、生理理狀態研研究的文文獻分析析4、應激激研究的的文獻分分析5、信息息平臺建建設的籌籌建6、五種種疾病的的現代文文獻研究究7、五種種疾病臨臨床調查查的前期期準備8、五種種疾病動動物模型型的構建建9、動物物模型證證候評價價指標體體系的文文獻研究究1、擬定定課題實實施方案案，分割割研究任任務，簽簽訂研究究任務書書2、完成成知識考考古學分分

39、析肝藏藏血主疏疏泄有關關的研究究單元的的對象形形成分析析3、完成成肝臟象象功能生生理狀態態研究的的文獻分分析，編編制生理理狀態研研究調查查表，分分析北京京地區四四時八節節氣象變變化特點點5、完成成中醫理理論與應應激研究究相關的的文獻分分析，編編制月經經周期研研究調查查表，初初步篩選選志愿者者6、擬定定信息平平臺建設設方案，編制相相關程序序，進行行平臺試試運行7、建立立五種疾疾病現代代文獻數數據庫，完成數數據分析析8、擬定定五種疾疾病臨床床流行病病學調查查實施方方案，編編制調查查表，進進行人員員培訓，并完成成預調查查9、建立立五種疾疾病動物物病證結結合的證證候模型型10、發發表文章章10篇篇左右

40、第二年1、肝藏藏血主疏疏泄知識識考古學學研究2、開展展健康人人群及動動物的四四時八節節動態觀觀察3、進行行月經周周期動態態觀測4、正式式運行信信息平臺臺5、五種種疾病的的臨床流流行病學學調查6、五種種疾病動動物模型型的動態態觀察和和證候屬屬性辨識識7、模型型動物證證候屬性性的方劑劑反證研研究8、進行行課題中中期總結結與檢查查1、完成成知識考考古學對對肝藏血血主疏泄泄有關的的研究單單元進行行話語構構成分析析之陳述述方式分分析、概概念擴散散分析、主題從從屬分析析。2、完成成3000例健康康人群88個時間間點的動動態觀察察，完成成宏觀指指標與微微觀指標標的觀測測；3、完成成1000只大鼠鼠，200只

41、樹鼩鼩8個時時間點的的動態觀觀測4、完成成1000例健康康志愿者者月經周周期觀察察與應激激測試5、進行行信息平平臺使用用培訓，正式進進行平臺臺運行6、完成成五種疾疾病各8800例例全國多多中心臨臨床流行行病學調調查7、基于于臨床流流調數據據進行數數據分析析，建立立宏觀與與微觀相相結合的的“肝藏血血主疏泄泄”異常狀狀態的判判別模式式。8、4種種以上的的反映肝肝藏血主主疏泄功功能異常常狀態的的病證結結合動物物模型及及其判別別方法。9、撰寫寫課題中中期總結結報告，完成中中期檢查查10、發發表論文文10篇篇左右第三年1、完善善后三年年研究方方案2、肝藏藏血主疏疏泄有關關的研究究單元的的知識考考古學話話

42、語轉換換分析3、完成成健康人人及動物物生理四四時八節節研究4、開展展志愿者者應激狀狀態測試試研究5、信息息平臺多多中心質質量監控控及數據據庫建設設6、開展展五種疾疾病臨床床干預研研究7、動物物模型的的實驗室室指標檢檢測1、擬定定后三年年研究實實施方案案，編制制后三年年課題任任務書2、完成成肝藏血血主疏泄泄有關的的研究單單元的系系統成分分轉換分分析、話話語關系系轉換分分析。3、建立立健康人人生理研研究數據據庫，提提取核心心指標，描繪動動態變化化曲線，建立肝肝藏血主主疏泄生生理狀態態判別模模式4、建立立動物四四時八節節研究數數據庫，提取相相關核心心指標，描繪動動態變化化曲線5、建立立月經周周期變化

43、化及應激激測試的的數據庫庫，探討討肝藏血血主疏泄泄與情緒緒變化的的相關性性，揭示示其內在在機制6、擬定定應激研研究實施施方案，篩選研研究志愿愿者7、通過過信息平平臺對各各課題組組全國多多中心的的研究進進行動態態實時質質量監控控，建立立大型關關聯數據據庫。8、完成成五種疾疾病各1100例例的臨床床干預試試驗，檢檢測各項項指標9、完成成肝藏血血主疏泄泄可能相相關的核核心指標標及二級級指標的的檢測，分析其其在慢性性應激相相關的神神經內分分泌網絡絡的表現現特征10、發發表文章章10篇篇左右第四年1、肝藏藏血主疏疏泄的文文獻研究究2、志愿愿者應激激狀態前前后變化化的研究究3、信息息平臺的的數據匯匯交與分

44、分析4、五種種疾病的的臨床干干預研究究5、動物物模型的的基因組組學和蛋蛋白組學學研究1、完成成肝藏血血主疏泄泄的文獻獻研究2、進行行60例例健康志志愿者應應激測試試，分析析其應激激前后宏宏觀與微微觀指標標變化規規律3、完成成關聯數數據庫的的建設，進行數數據匯總總4、完成成五種疾疾病各2200例例的臨床床干預試試驗，檢檢測各項項指標，建立數數據庫5、完成成肝藏血血主疏泄泄相關特特定腦區區的數字字化基因因表達譜譜和smmalll RNNA分析析6、完成成肝藏血血主疏泄泄共性調調控網絡絡的提取取7、揭示示肝藏血血主疏泄泄相關特特定腦區區的基因因表達特特征和ssmalll RRNA表表達特征征8、發表

45、表文章110篇左左右第五年1、完成成應激狀狀態前后后變化的的研究2、進行行數據匯匯交與分分析3、完成成養血調調肝方藥藥對肝藏藏血主疏疏泄共性性調控網網絡的作作用及其其機制研研究4、總結結研究成成果，進進行結題題1、完成成1200例健康康志愿者者應激測測試，建建立數據據庫，分分析其內內在機制制2、通過過信息平平臺，進進行多種種數據分分析，進進行數據據匯交，綜合進進行數據據挖掘3、揭示示養血調調肝方藥藥的對肝肝藏血主主疏泄調調控的內內在機制制4、闡明明養血調調肝方藥藥的對肝肝藏血主主疏泄調調控網絡絡的效應應及其機機制5、發表表文章110篇左左右6、撰寫寫結題報報告，完完成結題題驗收一、研究究內容1

46、、肝臟臟象理論論的內涵涵、外延延及發展展源流研研究 以傳統中中醫文獻獻學的研研究方法法為基礎礎，借鑒鑒法國現現代思想想體系史史家米歇歇爾福福柯創立立知識考考古學的的研究方方法，結結合現代代數理挖挖掘技術術，以歷歷代中醫醫文獻與與史書、志書、筆記等等其它相相關古代代文獻為為研究對對象，系系統總結結、深入入闡明肝肝藏血主主疏泄及及相關理理論內在在涵義及及學術發發展源流流。其具具體研究究內容包包括：系系統梳理理從先秦秦時期到到新中國國成立前前歷代中中醫及相相關文獻獻，以肝肝主疏泄泄為切入入點，分分析肝主主疏泄及及相關專專題的對對象形成成、陳述述方式、概念的的擴散、主題策策略的選選擇等內內容，對對文獻

47、中中肝藏血血主疏泄泄的含義義及其診診治體系系生成變變化進行行具體分分析，以以發現構構成某一一時期醫醫學思想想整體的的深層結結構“知識識型”或“基本信信碼”，也就就是話語語，根據據話語的的轉變來來分析肝肝藏血主主疏泄的的含義及及其診治治體系的的演變及及其原因因，以分分析其形形成和轉轉變的歷歷史；在在肝藏血血主疏泄泄及其相相關理論論學術發發展史的的基礎上上，確立立其理論論內涵、應用范范圍與原原則，論論證其在在臟象學學說、臟臟腑辨證證以及臨臨床各科科疾病診診治中的的地位與與作用，解決學學術諸如如“體陰用用陽”“肝陽虛虛”等學術術分歧與與爭議；揭示相相關疾病病從肝論論治臨床床療效產產生的機機制和規規律

48、，進進一步豐豐富和發發展臟象象理論；同時探探討中醫醫理論發發展與創創新的規規律，嘗嘗試建立立一個以以歷史分分析為基基礎進行行中醫理理論研究究方法。 2、生理理狀態下下肝藏血血主疏泄泄功能的的調控機機制研究究（1）正正常健康康人肝藏藏血主疏疏泄與四四時節律律的相關關性研究究：遵循循臨床流流行病學學抽樣調調查的原原則，依依據中醫醫時間醫醫學五臟臟節律的的原理，在全國國多中心心對3000例（男女各各1500例）健健康人進進行四時時八節的的動態追追蹤調查查；全面面采集調調查者的的一般信信息、癥癥狀、情情緒、生生活質量量、實驗驗室指標標等多種種信息，建立數數據庫。（2）正正常動物物肝藏血血主疏泄泄與四時

49、時節律的的相關性性研究：選擇嚙嚙齒類動動物大鼠鼠與靈長長類動物物樹鼩，依據中中醫時間間醫學五五臟節律律的原理理，選取取一年中中的四時時八節，采集88個時間間點動物物的表征征，進行行動物行行為學檢檢測，以以及神經經遞質、退黑素素、血管管緊張素素、腎上上腺皮質質等神經經內分泌泌指標的的檢測，建立數數據庫。 在統統一的信信息管理理系統下下，應用用現代信信息學手手段，進進行數據據分析，提煉肝肝藏血與與疏泄功功能的節節律性變變化特點點；揭示示其調節節機制。3、健康康志愿者者應激狀狀態下肝肝藏血主主疏泄功功能的調調控機制制研究（1）婦婦女月經經周期應應激研究究：選取取月經規規律的健健康志愿愿者1000人，

50、連續觀觀測其三三個月經經周期的的情緒、軀體癥癥狀以及及一般性性指標的的變化，并與月月經期、黃體期期、月經經后期分分別進行行應激狀狀態測試試，主要要進行心心理認知知測試，檢測多多導腦電電等指標標，建立立數據庫庫進行分分析，探探索月經經周期中中肝藏血血狀態變變化與疏疏泄功能能的相關關性，并并總結肝肝藏血主主疏泄異異常狀態態下應激激變化規規律，探探討肝藏藏血主疏疏泄的內內在機制制。（2）健健康志愿愿者應激激刺激前前后不同同狀態與與肝藏血血主疏泄泄關系的的研究：選取健健康志愿愿者1220例（男女各各60例例）進行行情緒刺刺激和運運動負荷荷兩種應應激狀態態前后的的比較研研究，采采集志愿愿者應激激前后的的宏觀表表現、心心理與認認知功能能，以及及神經遞遞質、退退黑素、血管緊緊張素、腎上腺腺皮質等等神經內內分泌指指標的變變化并建建立數據據庫。4、五種種疾病肝肝藏血主主疏泄功功能異常常狀態的的判別研研究 在現代文文獻研究究基礎上上，借鑒鑒心理學