1、微生物平板劃線法STEPSTEP1 細(xì)菌的培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng) 細(xì)菌培養(yǎng)是一種用人工方法使細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的技術(shù)。細(xì)菌在自然界中分布極廣，數(shù)量大，種類多，它可以造福人類，也可以成為致病的原因。大多數(shù)細(xì)菌可用人工方法培養(yǎng)，即將其接種于培養(yǎng)基上，使其生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)菌用于研究、鑒定和應(yīng)用。細(xì)菌培養(yǎng)是一個(gè)復(fù)雜的技術(shù)。STEPSTEP2 培養(yǎng)基 在土壤、水、食品、空氣以及人和動(dòng)、植物中，不同種類的細(xì)菌混雜地生活在一起。若要研究其中某種細(xì)菌，就必須將各種細(xì)菌進(jìn)行分離，以得到只含有這一種細(xì)菌的純培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)菌分離成純種后，常需要接種到有關(guān)的培養(yǎng)基中，以測(cè)試其各種生物學(xué)性狀，不同的細(xì)菌需要不同的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

2、培養(yǎng)基的種類按其物理性狀分為： 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基按用途分為： 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基STEPSTEP3 細(xì)菌接種方法常見(jiàn)的幾種細(xì)菌的培養(yǎng)和基接種方法舉例 平板劃線接種法斜面培養(yǎng)基接種法液體培養(yǎng)基接種法穿刺接種法菌種 葡萄球菌和大腸桿菌的混合菌液大腸桿菌培養(yǎng)物大腸桿菌培養(yǎng)物枯草桿菌培養(yǎng)物變形桿菌培養(yǎng)物痢疾桿菌培養(yǎng)物培養(yǎng)基 普通瓊脂平板瓊脂斜面培養(yǎng)基普通肉湯培養(yǎng)基半固體瓊脂培養(yǎng)基平板劃線法 平板劃線法主要是借劃線而將細(xì)菌在瓊脂平板表面分散開(kāi)，使單個(gè)細(xì)菌能固定在某一點(diǎn)，生長(zhǎng)繁殖后形成單個(gè)的菌落從而達(dá)到分離純種的目的。常用于分離單個(gè)菌落，也可用于觀察細(xì)菌的生

3、長(zhǎng)狀況和觀察某些生化反應(yīng)。平板劃線法接種方法（一）標(biāo)記 在培養(yǎng)皿底面，用記號(hào)筆注明接種的菌名、接種者姓名、日期等。 細(xì)菌在自然界中分布極廣，數(shù)量大，種類多，它可以造福人類，也可以成為致病的原因。細(xì)菌培養(yǎng)是一個(gè)復(fù)雜的技術(shù)。細(xì)菌培養(yǎng)是一種用人工方法使細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的技術(shù)。在培養(yǎng)皿底面，用記號(hào)筆注明接種的菌名、接種者姓名、日期等。然后將接種環(huán)移開(kāi)火焰，待其冷卻。（5）劃線完畢，將瓊脂平板放進(jìn)皿蓋，將培養(yǎng)皿倒放，送進(jìn)37溫箱培養(yǎng)。若要研究其中某種細(xì)菌，就必須將各種細(xì)菌進(jìn)行分離，以得到只含有這一種細(xì)菌的純培養(yǎng)。液體培養(yǎng)基平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法（四）分離劃線接種細(xì)菌（四區(qū)接種法）（4）旋轉(zhuǎn)瓊脂

4、平板90度，接種環(huán)不必再滅菌，接三區(qū)連續(xù)平行劃線，劃滿平板其余部分，此視為四區(qū)。（四）分離劃線接種細(xì)菌（四區(qū)接種法）平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)菌用于研究、鑒定和應(yīng)用。平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法（二）滅菌接種環(huán) 點(diǎn)燃酒精燈，右手以持筆式握持接種環(huán)，并放置火焰中燒灼滅菌，先將接種環(huán)的接種絲部分置于火焰中，待金屬絲燒紅并蔓延至金屬端，再直接燒灼金屬環(huán)直至燒紅，然后由金屬環(huán)至金屬桿方向快速通過(guò)火焰，隨后再反方向通過(guò)火焰，如此23次。然后將接種環(huán)移開(kāi)火焰，待其冷卻。平板劃線法接種方法（三）取菌種 左手持裝有金黃色葡萄球菌或大腸桿菌菌液的試管，用持有接種環(huán)

5、的右手手掌及小指拔取試管塞，將試管管口迅速通過(guò)火焰23次進(jìn)行滅菌。 將已滅菌且已冷卻的接種環(huán)伸入菌種管中，取一接種環(huán)的菌液，然后退出菌種管，將菌種管管口及試管塞再次通過(guò)火焰23次滅菌，塞好試管塞，放至原來(lái)的位置。 平板劃線法接種方法（四）分離劃線接種細(xì)菌（四區(qū)接種法） （1）左手手掌持瓊脂平板培養(yǎng)基，大拇指與中指輕輕將平皿蓋子拿起，右手持接種環(huán)在瓊脂平板上端來(lái)回劃線，涂成一細(xì)菌薄膜（約占平板的1/10），視為一區(qū)。劃線時(shí)使接種環(huán)與接種平板面呈3040度角，以腕力在平板表面行輕而快地來(lái)回滑動(dòng)動(dòng)作。 平板劃線法接種方法 （2）旋轉(zhuǎn)瓊脂平板90度，燒灼接種環(huán)，以殺滅環(huán)上的殘留細(xì)菌，將接種環(huán)觸及培養(yǎng)基表面以使其冷卻。滅菌接種環(huán)通過(guò)薄膜處作連續(xù)平行劃線（約占平板1/5），此視為二區(qū)。平板劃線法接種方法 （3）旋轉(zhuǎn)瓊脂平板90度，灼燒接種環(huán)滅菌并使之冷卻。將滅菌接種環(huán)接二區(qū)連續(xù)平行劃線（約占平板1/4），此為三區(qū)。 （4）旋轉(zhuǎn)瓊脂平板90度，接種環(huán)不必再滅菌，接三區(qū)連續(xù)平行劃線，劃滿平板其余部分，此視為四區(qū)。 各區(qū)接種線間盡量互不交接，以達(dá)到細(xì)菌逐漸稀釋的目的。 平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法 （5）劃線完畢，將瓊脂