1、復習思考題1.什么是微生物？包括哪些主要類群？.微生物（microorganism）：是一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱。（放線菌霉菌酵母菌藻類原生動物。每畝耕作層土：細菌75kg、霉菌150kg、酵母菌7.5kg、藻類7.5kg、原生動物15kg。59.我國飲用水標準中規定，自來水中細菌總數不得高于多少？大腸菌群數不得超過多少？答：自來水中細菌總數應100個/mL,大腸菌群數不得超過3個/L.60.什么是正常菌群？試分析腸道正常菌群與人體的關系？答：生活在健康動物各部位，數量大，種類較穩定，一般能發揮有益作用的微生物群，稱為正常菌群。正常菌群與人體的關系：互生。生物拮抗作用；刺激免疫應

2、答；合成維生素，降解食物殘渣。61.在微生物的生物環境中存在著幾種關系？掌握概念，舉例說明。答：（1）互生：兩種可單獨生活的生物，當它們在一起時，通過各自的代謝活動而有利于對方，或偏利于一方的相互關系，稱為互生。這是一種“可分可合，合比分好”的松散的相互關系。例如人體腸道中正常菌群與人的互生，好氧性自生固氮菌與纖維素分解菌的互生等。共生：指兩種生物共居在一起，相互分工合作，相依為命，甚至形成獨特結構，達到難分難解，合二為一的極其緊密的一種相互關系。例如根瘤菌與植物的共生，瘤胃微生物與反芻動物的共生等。拮抗：指由某種生物所產生的特定代謝產物可抑制它種生物的生長發育甚至殺死它們的一種相互關系。例如

3、制作泡菜和牲畜青貯飼料的過程就存在拮抗作用。寄生：一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內（包括細胞體）或體表，從中奪取營養并進行生長繁殖，同時使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關系。（5）捕食：一般指一種大型的生物直接捕捉，吞食另一種小型生物以滿足其營養需要的相互關系。62.試述微生物在碳、氮循環中的作用。答：微生物在碳素循環中的作用：碳是構成各種生物體最基本的元素，是有機物和生物細胞的結構骨架，沒有碳就沒有生命。碳素循環包括：CO2的固定和CO2的再生。微生物在CO2的固定中的作用： 一些光能自養微生物，如藻類、光合細菌和藍細菌等可通過光合作用直接利用自然界中的CO2合成有機碳化物，

4、進而轉化為各種有機物；化能自養菌能利用化學能同化CO2微生物合成的有機物在數量和規模雖遠不及綠色植物，但在一些特殊環境(如植物難以生存的水域)中具有相當重要的作用。（百度）63.什么是富營養化？污水處理的原理及常用方法有哪些？ BOD5和COD的定義答：富營養化是指水體中因氮、磷等元素含量過高而導致水體表面藍細菌和藻類過度生長繁殖的現象。BOD5是水體中有機物含量的一個間接指標。一般指1L污水或待測水樣中所含的一部分易氧化的有機物，當微生物對其氧化、分解時，所消耗的水中溶解氧毫克數（其單位為mg/L）。BOD的測定條件一般規定在20下5晝夜，故常用BOD5（5日生化需氧量）符號表示。COD是水

5、體中有機物含量的一個簡便的間接指標。指1L污水中所含的有機物在用強氧化劑將它氧化后，所消耗氧的毫克數（其單位為mg/L）。64.什么是大腸菌群？答：一群能在37，24h發酵乳糖產酸產氣的G-，桿狀，無芽孢，兼性厭氧的腸道細菌。65.什么是免疫、類毒素、單克隆抗體、生物制品、疫苗？答：免疫：機體識別和排除抗原性異物的一種保護性功能。類毒素：用0.3%0.4%甲醛溶液對外毒素進行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性（抗原性）的生物制品。單克隆抗體：由一純系淋巴細胞克隆經分化、增殖后的漿細胞所產生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白分子。生物制品：在人工免疫中，可作為預防、治療和診斷用的來自

6、生物體的各種制劑。疫苗：用于預防傳染病的抗原制劑。66.外毒素與內毒素有可不同？答：外毒素是在病原細菌在生長過程中不斷向外界環境分泌的一類毒性蛋白，內毒素在活細胞中不分泌到體外，僅在細胞死亡后自溶或人工裂解時才釋放。外毒素毒性比內毒素毒性高。67.決定傳染結局的三因素是什么？68.什么是干擾素？其作用機制是什么？69.什么是抗原？有何特性？決定抗原免疫原性因素有哪些？抗原特異性由什么來決定？70.什么是抗體？分幾類？各有何特性？（IgG、M、A）71.抗原與抗體反應的一般規律是什么？答：特異性可逆性定比性階段性條件依賴性72.什么是補體？有何特性？答：補體是存在于正常人高等動物血清與中的一組非

7、特異性血蛋白（主要成分是球蛋白）。在免疫反應中，由于它具有能擴大和增強抗體的“補助”功能，故稱補體。補體本質是一類酶原，能被任何抗原-抗體的復合物激活，激活后的補體就能參與破壞或清除已被抗體結合的抗原或細胞，發揮其溶胞作用、病毒滅活、促進吞噬細胞的吞噬和釋放組胺等免疫功能。73.什么是補體結合試驗？其基本原理是什么？答：一種有補體參與，并以綿羊紅細胞和溶血素（紅細胞的特異抗體）是否發生溶血放映作為指示的一種高靈敏度的抗原與抗體結合反應補體可與任何抗體和抗原復合物相結合； 指示系統（由綿羊紅細胞和溶血素組成）遇未被抗原核抗體復合物所結合的游離補體（豚鼠的新鮮血清）時，就會發生肉眼可見的溶血反應。

8、74.微生物分類學有哪幾項具體任務？答：分類、鑒定、命名75.什么是學名？雙名法？答：76.什么是菌株？它如何表示？答：77.何謂三域學說？提出此學說的根據是什么？答：78.用于微生物鑒定的經典指標有哪些？ DNA堿基比例的測定79.微生物分類鑒定中的現代方法有哪些？ 核酸分子雜交法通過核酸分析鑒定微生物遺傳型 rRNA寡核苷酸編目分析微生物全基因組序列的測定 細胞壁的化學成分 全細胞水解液的糖型細胞化學成分用作鑒定指標 磷酸類脂成分的分析 枝菌酸的分析 醌類的分析 氣相色譜技術用于微生物鑒定數值分類法 80.熟記下列一些最基本的微生物學名或屬名： Bacillus subtilis 枯草芽孢

9、桿菌， Escherichia coli 大腸桿菌 Bacillus thuringiensis 蘇云金芽孢桿菌，Staphylococcus aureus金黃色葡萄球菌Halobacterium 鹽桿菌屬， Streptomyces griseus 灰色鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae 釀酒酵母， Aspergillus flavus 黃曲霉Aspergillus niger 黑曲霉， Penicillium chrysogenum 產黃青霉Rhizopus oryzae 米根霉81.掌握從土壤中分離某類微生物的方法模式題：例：從土壤中分離產生放線菌采集土樣（去除肥沃土

10、壤的表層土，取離地面5-20cm土層）；土壤稀釋液的制備（10倍梯度稀釋法）；高氏1號培養基的制備；倒平板；取適當稀釋的土壤稀釋液涂布到高氏1號平板上；于28的培養箱中培養5-6天；根據放線菌的菌落特征挑取放線菌菌落在平板或試管斜面上劃線培養，并結合鏡檢確定是否為純培養； 利用打孔法將帶有培養基的放線菌培養物接到涂有敏感菌的平板上，于培養箱中培養；根據是否有抑菌圈，確定該放線菌是否具有產生抗生素的能力；將能產生抗生素的放線菌接種到試管斜面上，培養好后于冰箱中保藏。82.實驗的原理、主要步驟、注意事項、成敗的關鍵及思考題。（僅供參考，具體見自己的實驗書和實驗報告） 實驗名稱 實驗原理 注意事項成

11、敗的關鍵思考題培養基的制備P16細菌-牛肉膏蛋白胨（應用廣泛的天然培養基）；放線菌-高氏1號；真菌-馬丁氏培養基蛋白胨很易吸濕，在稱取時動作要迅速P20平板分離技術與活菌計數平板分離法主要有：平板劃線分離法，；稀釋涂布平板法（有效分離純化微生物，測定樣品中活菌數量）平板菌落計數法是將待測菌落經適當稀釋，涂布在平板上，經過培養后在平板上形成肉眼可見的菌落。稀釋涂布平板法：菌懸液細胞密度適宜；涂布均勻，培養后菌落在整個平板表面分布均勻。平板劃線分離法：快速，接種環在平板上迅速滑動；平行線之間的距離小，使劃線次數增加；及時灼燒接種環上剩余的菌體P34普通光學顯微鏡的使用及微生物形態的觀察在顯微鏡的光

12、學系統中，物鏡的性能最為關鍵，它直接影響著顯微鏡的分辨率。其中，油鏡的放大倍數最大，使用時，需在載玻片和鏡頭之間加滴鏡油（即香柏油）（作用：增加透光強度，增加分辨率）。最小可分辨距離=不可將高倍鏡轉動經過加有鏡油的區域；二甲苯等清潔劑會對鏡頭造成損傷，不要使用過量的清潔劑或讓其在鏡頭上停留時間過長或有殘留；不要用手或其他紙擦拭鏡頭，以免使鏡頭粘上汗漬、油污或產生劃痕，影響觀察。先用低倍鏡搜尋、聚焦樣品，確定待觀察目標的大致位置后再轉換到高倍鏡或油鏡P47顯微鏡直接計數和懸滴觀察法顯微計數法的優點：直接、快速、操作簡單，缺點：所測的結果通常是死菌體和活菌體的總和，且難以對運動性強的活菌進行計數；

13、計數時，通常數5個中方格的總菌數，設5個中方格中的總菌數為A,菌液稀釋倍數為B(取100)，則：1mL菌液中的總菌數(其中，B取100)用接種環在培養下面上刮取時動作要輕，不要將瓊脂培養基一起刮起；計數板上的計數室的刻度非常精細，清洗時切勿使用刷子等硬物，也不可用酒精燈火焰烘烤計數板；取樣時先要搖勻菌液，加樣時計數室不可有氣泡產生。活細胞是透明的，因此在顯微計數或懸滴法觀察時均應適當減低視野亮度，以增大反差；進行顯微計數時應先在低倍鏡下尋找大方格的位置，找到計數室后將其移至視野中央，再換高倍鏡觀察和計數P56細菌的制片及簡單那染色對個體較小的細菌進行制片時采用涂片法；利用單一染料對菌體進行染色

14、的方法為簡單染色法；常用的微生物細胞染料都是鹽，分堿性染料和酸性染料，前者包括美藍（亞甲藍）、結晶紫、堿性復紅及孔雀綠等，后者包括酸性復紅及剛果紅等。通常用堿性染料進行簡單染色，因為微生物細胞在堿性、中性及弱酸性溶液中通常帶負電荷，而染料電離后染色部分帶正電荷，很容易與細胞結合使其著色；當細胞處于酸性條件下所帶正電荷增加時，可采用酸性染料著色；革蘭氏染色法可將細菌分成G+ 和G 兩種類型，這是由這兩種細菌細胞壁結構和組成的差異所決定的。G+細胞壁肽聚糖含量高，G細胞壁肽聚糖含量低。選用活躍生長期菌種染色，老齡的G+會被染成紅色而造成假陽性；涂片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性；脫色過度造成假

15、陰性。P75、76、84放線菌和霉菌的制片及形態觀察放線菌制片時，不采用涂片法，以免破壞細胞及菌絲體形態。通常采用插片法或玻璃紙法并結合菌絲體簡單染色進行觀察。對霉菌可以采取直接制片和透明膠帶法觀察。在印片過程中，用力要輕，且不要錯動，染色水洗時水流要緩，以免破壞孢子形態。在直接制片法觀察中，用鑷子取菌和用解剖針分散菌絲時要細心，盡量減少菌絲斷裂及形態被破壞，蓋蓋玻片時避免氣泡產生。無環境因素對微生物生長的影響物理、化學、生物及營養等不同環境因素影響微生物生長繁殖的機制不盡相同，而不同類型微生物對同一環境因素的適應能力也有差別。低濃度染料可抑制細菌生長，G+ 比G 對染料更加敏感制備平板厚度均勻，濾紙