1、高三生物第二講細胞工程的原理及應用課件胚胎或幼齡動物的組織器官細胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養貼壁生長接觸抑制傳代培養洗滌、稀釋、分離動物細胞培養不能最終培養成生物體原代細胞傳代細胞2.動物細胞培養過程原代培養和傳代培養細胞懸浮液10代細胞50代細胞無限傳代原代培養傳代培養多數組織細胞固定在表面生長和分裂隨細胞增多，細胞就會停止分裂增殖3.動物細胞培養的條件3.動物細胞培養的條件(1)無菌、無毒的環境3.動物細胞培養的條件(1)無菌、無毒的環境(2)必須的營養物質 （葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、激素、促生長因子、動物血清等。）3.動物細胞培養的條件(1)無菌、無毒的環境(2)必須的營養物質 （

2、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、激素、促生長因子、動物血清等。）(3)適宜的溫度: 36.50.5度3.動物細胞培養的條件(1)無菌、無毒的環境(2)必須的營養物質 （葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、激素、促生長因子、動物血清等。）(3)適宜的溫度: 36.50.5度(4)充足的氧氣和適宜的酸堿度: O2和CO2（95%空氣和5% CO2 ）4.動物細胞培養與植物組織培養的比較項目植物組織培養動物細胞培養培養基的物理性質培養基的成分結果目的取材其他條件植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產藥物、殺蟲劑等轉基因植物的培育蛋白質生物制品的生產皮膚移植材料的培育檢測有毒物質生理、病理、藥理學研究植物幼

3、嫩的部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件4.動物細胞培養與植物組織培養的比較項目植物組織培養動物細胞培養培養基的物理性質培養基的成分結果目的取材其他條件固體液體植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產藥物、殺蟲劑等轉基因植物的培育蛋白質生物制品的生產皮膚移植材料的培育檢測有毒物質生理、病理、藥理學研究植物幼嫩的部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件4.動物細胞培養與植物組織培養的比較項目植物組織培養動物細胞培養培養基的物理性質培養基的成分結果目的取材其他條件固體液體水、礦質元素、維生素、蔗

4、糖、氨基酸、激素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產藥物、殺蟲劑等轉基因植物的培育蛋白質生物制品的生產皮膚移植材料的培育檢測有毒物質生理、病理、藥理學研究植物幼嫩的部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件4.動物細胞培養與植物組織培養的比較項目植物組織培養動物細胞培養培養基的物理性質培養基的成分結果目的取材其他條件固體液體水、礦質元素、維生素、蔗糖、氨基酸、激素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等新的植株或組織新的細胞系或細胞株植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產藥物、殺蟲劑等轉

5、基因植物的培育蛋白質生物制品的生產皮膚移植材料的培育檢測有毒物質生理、病理、藥理學研究植物幼嫩的部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件1、概念（二） 動物細胞核移植1、概念 將動物的一個細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成為一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體（克隆動物）。（二） 動物細胞核移植2、分類胚胎細胞核移植：體細胞核移植：2、分類胚胎細胞核移植：體細胞核移植：細胞分化程度低，恢復全能性容易2、分類胚胎細胞核移植：體細胞核移植：細胞分化程度低，恢復全能性容易細胞分化程度高，恢復全能性不容易2、分類3體

6、細胞核移植過程卵細胞A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質細胞核細胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵細胞1.核移植的受體細胞是什么？處在什么時期？思考2.通過什么手段激活受體細胞，構建重組胚胎？ 1.核移植的受體細胞是什么？處在什么時期？M中期卵母細胞思考2.通過什么手段激活受體細胞，構建重組胚胎？ 1.核移植的受體細胞是什么？處在什么時期？M中期卵母細胞誘導方法：物理或化學方法激活受體細胞，完成細胞分裂和發育進程。思考2.通過什么手段激活受體細胞，構建重組胚胎？ 4、體細胞核移植技術的應用前景：在畜牧業中可以加速家畜遺傳改良的進程保護瀕危物種醫藥衛生領域生產醫用蛋白質及

7、組織器官的移植了解胚胎發育和衰老過程；追蹤研究疾病的發展過程和治療疾病細胞A細胞B雜種細胞（三） 動物細胞融合細胞A細胞B雜種細胞物理法化學法（三） 動物細胞融合細胞A細胞B雜種細胞物理法化學法（三） 動物細胞融合滅活的病毒1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式（三） 動物細胞融合1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。（三） 動物細胞融合1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。形成單核的雜交細胞（三） 動物細胞融合1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程

8、。形成單核的雜交細胞細胞膜的流動性（三） 動物細胞融合1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。形成單核的雜交細胞細胞膜的流動性物理法：離心、振動、電激（三） 動物細胞融合1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。形成單核的雜交細胞細胞膜的流動性物理法：離心、振動、電激化學法：聚乙二醇（PEG)（三） 動物細胞融合1.概念：2.結果：3.原理：4.誘導方式指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。形成單核的雜交細胞細胞膜的流動性物理法：離心、振動、電激化學法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒（三） 動

9、物細胞融合5.意義：6. 應用：5.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。6. 應用：5.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。6. 應用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段5.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。6. 應用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術制造單克隆抗體7植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞融合方法誘導手段用途7植物體細胞

10、雜交與動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞融合方法誘導手段用途細胞膜的流動性細胞膜的流動性7植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞融合方法誘導手段用途細胞膜的流動性細胞膜的流動性用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后，誘導原生質體融合用胰蛋白酶使細胞分散后，誘導細胞融合7植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞融合方法誘導手段用途細胞膜的流動性細胞膜的流動性用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后，誘導原生質體融合用胰蛋白酶使細胞分散后，誘導細胞融合離心、電刺激、振動、顯微操作、聚乙二醇等誘導與植物體細

11、胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導7植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞融合方法誘導手段用途細胞膜的流動性細胞膜的流動性用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后，誘導原生質體融合用胰蛋白酶使細胞分散后，誘導細胞融合離心、電刺激、振動、顯微操作、聚乙二醇等誘導與植物體細胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導克服遠緣雜交不親和的障礙，擴展雜交親本范圍，培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等（四）單克隆抗體1、概念（四）單克隆抗體1、概念由單個B淋巴細胞經過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產生的化學性質單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。 2、制

12、備過程2、制備過程注射抗原2、制備過程注射抗原B淋巴細胞2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養篩選,繼續培養足夠數量的、能產生特定抗體的細胞群2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養篩選,繼續培養足夠數量的、能產生特定抗體的細胞群2、制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養篩

13、選,繼續培養足夠數量的、能產生特定抗體的細胞群2、制備過程體外培養注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養篩選,繼續培養足夠數量的、能產生特定抗體的細胞群2、制備過程體外培養注射到小鼠腹腔注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養篩選,繼續培養足夠數量的、能產生特定抗體的細胞群單克隆抗體2、制備過程體外培養注射到小鼠腹腔3、單克隆抗體的應用單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高3、單克隆抗體的應用單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質，并與抗原特異性結合3、單克隆抗體的應用單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高作為診斷試劑：準確

14、識別各種抗原物質，并與抗原特異性結合優點：準確、高效、簡易、快速3、單克隆抗體的應用單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質，并與抗原特異性結合用于運載藥物：制成“生物導彈”治療疾病：主要用于癌癥治療優點：準確、高效、簡易、快速3、單克隆抗體的應用單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質，并與抗原特異性結合用于運載藥物：制成“生物導彈”治療疾病：主要用于癌癥治療優點：準確、高效、簡易、快速優點：療效高、毒副作用小3、單克隆抗體的應用易錯點辨析1.容易混淆的三種細胞雜種細胞、重組細胞和雜交細胞易錯點辨析1.容易混淆的三種細胞雜種細胞、重

15、組細胞和雜交細胞(1)雜種細胞：植物體細胞雜交過程中，兩種細胞去掉細胞壁之后形成的原生質體融合，融合的原生質體形成細胞壁之后形成的細胞叫雜種細胞。易錯點辨析1.容易混淆的三種細胞雜種細胞、重組細胞和雜交細胞(1)雜種細胞：植物體細胞雜交過程中，兩種細胞去掉細胞壁之后形成的原生質體融合，融合的原生質體形成細胞壁之后形成的細胞叫雜種細胞。(2)重組細胞：體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞之后形成的細胞叫重組細胞。易錯點辨析1.容易混淆的三種細胞雜種細胞、重組細胞和雜交細胞(1)雜種細胞：植物體細胞雜交過程中，兩種細胞去掉細胞壁之后形成的原生質體融合，融合的原生質體形成細胞壁之后形成的細胞叫雜種細胞。

16、(2)重組細胞：體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞之后形成的細胞叫重組細胞。(3)雜交細胞：動物細胞融合形成的細胞常稱為雜交細胞。2.植物體細胞雜交和動物細胞融合的結果及原理(1)植物體細胞雜交過程： 結果:原理：2.植物體細胞雜交和動物細胞融合的結果及原理(1)植物體細胞雜交過程： a.植物細胞融合;b.雜種細胞的植物組織培養。結果:原理：2.植物體細胞雜交和動物細胞融合的結果及原理(1)植物體細胞雜交過程： a.植物細胞融合;b.雜種細胞的植物組織培養。結果:形成雜種植株，產生了一個生物體。原理：2.植物體細胞雜交和動物細胞融合的結果及原理(1)植物體細胞雜交過程： a.植物細胞融合;b.雜

17、種細胞的植物組織培養。結果:形成雜種植株，產生了一個生物體。原理：細胞膜的流動性和細胞的全能性。(2)動物細胞融合結果：原理：(2)動物細胞融合結果： 動物細胞融合形成雜交細胞，雜交細胞進行細胞培養，獲得大量的克隆細胞，但沒有形成生物體。原理：(2)動物細胞融合結果： 動物細胞融合形成雜交細胞，雜交細胞進行細胞培養，獲得大量的克隆細胞，但沒有形成生物體。原理： 細胞增殖和細胞膜的流動性，不包含細胞全能性。3.克隆動物與試管動物認識的誤區(1)誤區一：試管動物與克隆動物的產生都是無性生殖。(2)誤區二：試管動物(哺乳類)的產生是在體外進行的，克隆動物(哺乳類)的產生是在體內進行的。3.克隆動物與試管動物認識的誤區(1)誤區一：試管動物與克隆動物的產生都是無性生殖。糾正：試管動物的產生是有性生殖，克隆動物的產生是無性生殖。(2)