1、酸性藥物在微乳液相色譜體系中的保存舉動【摘要】以酸性藥物萘普生、布洛芬、雙氯芬酸、苯丙氨酸和2，4-二氯苯氧基乙酸為研究工具，探究了酸性藥物在微乳液相色譜體系中保存機理，創立了酸性藥物的容量因子(k)與外貌活性劑濃度、助外貌活性劑濃度、親脂性有機溶劑濃度以及活動相ph值之間的相干模子。效果表白，外貌活性劑、助外貌活性劑和親脂性有機溶劑的濃度以及活動相ph值的變革對酸性藥物的容量因子的影響完全與理論模子相符合。所創立的保存模子能較好地反響在微乳液相色譜體系中微乳液構成和ph值對酸性藥物保存舉動的影響。【關鍵詞】微乳液相色譜；保存模子；保存舉動；萘普生；布洛芬；雙氯芬酸；苯丙氨酸；2，4-二氯苯氧

2、基乙酸retentinbehavirfaiddrugsinireulsinliquidhratgraphyshijie-hua*，liting，zhuxia-hui(llegefpharaeutialsienes，statekeylabratrybreedingbasefgreenheistrysynthesistehnlgy，zhejianguniversityftehnlgy，hangzhu310032)abstrattheretentinehanisfaiddrugssuhasnaprxen，ibuprfen，dilfena，phenylalanineand2，4-dihlrphenxy

3、aetiaidinireulsinliquidhratgraphyhasbeendisussed.theretentindelingbeteenapaityfatrs(k)faiddrugsinireulsinliquidhratgraphyandnentratinfsurfatant，surfatantandlipphilirganislventandphvalueasset.theresultsshedtheeffetfhangefnentratinfsurfatant，surfatantandlipphilirganislventandphvaluenapaityfatrsfaiddru

4、gsinireulsinliquidhratgraphyasfullynsistentiththetheretialdeling.theretentindelinganbetterreflettheeffetfpsitinfireulsinslutinandphvaluenretentinbehavirfaiddrugsinireulsinliquidhratgraphy.keyrdsireulsinliquidhratgraphy；retentindeling；retentinbehavir；naprxen；ibuprfen；dilfena；phenylalanine；2，4-dihlrph

5、enxyaetiaid1弁言微乳液由外貌活性劑、助外貌活性劑(醇)、親脂性有機溶劑(油)及水構成的，粒徑為納米級的液滴(疏散相)疏散到另一種不相混溶的液體(一連相)中所形成的膠體疏散體系。微乳液相色譜(el)是以微乳液為活動相的高效液相色譜體系13。el與傳統高效液相色譜(hpl)比擬具有奇特的選擇性及高效性，已擔當到了越來越多的存眷412。本實行研究了在十二烷基硫酸鈉sds-異丁醇-異辛烷-磷酸鹽緩沖溶液構成的/微乳液作為活動相的微乳色譜體系中，微乳構成的變革對酸性藥物萘普生、布洛芬、雙氯芬酸、苯丙氨酸、2，4-二氯苯氧基乙酸(見表1)的保存舉動的影響；以溶質在三相中的平衡為根據，創立微乳色

6、譜體系中酸性藥物的保存模子，為微乳液相色譜的生長提供理論基矗表1酸性藥物的分子布局及醇-水分派系數(lgp)略table1leularstruturesandtanl-aterpartitineffiients(lgp)faididrugs2實行部門2.1儀器與試劑alliane2695型高效液相色譜儀和2996型二極管陣列檢測器(美國aters公司)，eper化學事情站(美國aters公司)；zy1104型18液相色譜柱(1004.6，10，北京闡發儀器廠)；電子天平(上海梅特勒-托利多儀器)。萘普生、布洛芬、雙氯芬酸、l-苯丙氨酸、2，4-二氯苯氧基乙酸(浙江產業大學藥學院藥物闡發實行室提

7、供)；十二烷基硫酸鈉(化學純，廣西汕頭市西隴化工場)；異丁醇(闡發純，上海化學試劑采購供給聯化工場)；異辛烷(闡發純，上海凌峰化學試劑)；甲醇(色譜純，上海陸都試劑)；和(闡發純，浙江湖州化學試劑廠)；3(闡發純，浙江新安化工團體股份)。2.2擬三相圖制作助外貌活性劑(異丁醇)/外貌活性劑(sds)按必然質量比混淆，然后外貌活性劑混淆液與油(異辛烷)的質量比別離為100，9.80.2，9.50.5，91，82，73，64，55，46，37，28，19混淆，攪拌勻稱，各混淆液在25下滴加水或磷酸鹽緩沖溶液。根據相變和溶液電導率的變革制作擬三相圖。2.3樣品溶液和活動相的配制別離稱取適量的萘普生、

8、布洛芬、雙氯芬酸、苯丙氨酸、2，4-二氯苯氧基乙酸置于10l容量瓶中，用微乳液溶解并稀釋至刻度，配制成1g/l的樣品溶液，利用前經0.22纖維素膜過濾。稱取適量sds置于500l容量瓶，參加25l/lkh2p4(或k2hp4)溶液，超聲至sds溶解，再參加適量的異丁醇和異辛烷，并用25l/lkh2p4(或k2hp4)稀釋至刻度，超聲處置懲罰2in后，用稀h3p4調治至所需ph值。利用前用0.45微孔濾膜真空過濾。效果與討論3.1/微乳液地區簡直定微乳液是由外貌活性劑、助外貌活性劑、油和水按得當比例自覺形成的無色透明、各向同性、低粘度的熱力學穩定體系。當構成比例差異時，微乳液布局也不雷同。為了獵

9、取穩定的/微乳液，通過擬三相圖的制作確定/微乳液地區，如圖1所示。從圖1可知，隨著sds-異丁醇-異辛烷-磷酸鹽緩沖溶液的比例的改變，微乳布局產生顯著變革。在微乳區中，歸屬于穩定的/微乳地區較小，且該地區的巨細隨著異丁醇/sds比例的增大抵有縮校別的，水相中離子強度和ph值的巨細，對穩定的/微乳地區的影響較校當異丁醇sds31，(異丁醇+sds)異辛烷31，磷酸鹽緩沖溶液(異丁醇+sds)2.11時，可得到較穩定的/微乳液。3.2溶質的保存模子的探究微乳液是一種親脂性有機溶劑(油)修飾的膠束溶液，親脂性有機溶劑疏散在膠束相內，形成微乳液滴。因此溶質在微乳色譜體系中的保存模子可以按親脂性有機溶劑

10、修飾的膠束色譜(l)體系舉行處置懲罰。如今，普及以為溶質在膠束液相色譜(l)中的保存重要取決于溶質在水相、膠束相和修飾后結實相三相之間的平衡14(見圖2)。圖1sds-異丁醇-異辛烷-磷酸鹽緩沖溶液體系的相圖略fig.1phasediagrasfsdiuddeylsulfate(sds)-isbutanl-istane-phsphatebufferslutinsystesa乳濁區(eulsin)；b液晶區(liquidrystalregin)；/微乳區(/ireulsin)；d共存區(existeneregin)；e/微乳區(/ireulsin)；f多相區(ultiphase)。圖2溶質在el

11、中三相間的平衡表示圖略fig.2sluteequilibriaangbulkslvent，ireulsindrpletandsurfatant-difiedstatinaryphaseinel：sds；：異丁醇(isbutanl)；s：溶質分子(sluteleule)。假定在所觀察的微乳構成范疇內，微乳構成的變革及溶質不影響外貌活性劑(sds)的臨界膠束濃度()；在所觀察的助外貌活性劑(異丁醇)及外貌活性劑(sds)濃度范疇內，sds對結實相的結合修飾到達飽和的穩定狀態；親脂性有機溶劑(異辛烷)只存在于微乳液滴相內部。那么按照arstrng等14提出的在膠束液相色譜體系中，溶質的保存和選擇性重

12、要取決于溶質在水相、膠束相和結實相之間的三相分派平衡。對付酸性溶質分子在微乳液相色譜體系中存在著以下分派平衡干系：1酸性溶質(ha)在水相中的電離平衡；2ha和a-在水相與微乳液滴()間的分派平衡；3ha和a-在水相與修飾的結實相(s)之間的分派平衡；4微乳液滴()相中的ha和a-與修飾的結實相之間的分派平衡。對付酸性藥物溶質的分子(ha)而言，在微乳液相色譜體系中的容量因子(k)可界說為：k-根據溶質在三相間的平衡干系，式1可形貌為：kaha，a式中，h為活動相中的濃度，ka為溶質的電離常數。as和a-別離為以去質子溶質情勢存在于修飾結實相和水相中的濃度；has和ha別離為溶質存在于修飾結實

13、相和水相中的濃度；a和ha別離為在微乳液滴相中去質子溶質和溶質的濃度；為外貌活性濃度；為比擬(結實相體積與活動相體積之比)。和表現溶質a-和ha在水相與結實相間的分派常數，該常數的巨細受微乳色譜體系中助外貌活性劑的數目()影響；，和，為溶質a-和ha在水相與微乳液滴相間的分派常數，該常數受微乳色譜體系中助外貌活性劑的數目()和微乳液滴中的親脂性有機溶劑數目()影響。按照文獻15，16提出的外貌活性劑、助外貌活性劑(醇)濃度對溶質在膠束液相色譜體系中的保存模子。在微乳色譜體系中，外貌活性劑、助外貌活性劑(醇)以及親脂性溶劑(油)的濃度對酸性溶質的保存模子可形貌為：k=aah+ka1+kadad(

14、1+khad)a(1+khad)3式中，kas和khas表現純膠束體系中溶質a-和ha在水相與結實相間的分派常數；ka和kha為純膠束體系中溶質a-和ha在水相與膠束相之間的分派常數。kasd，khasd，kad，khad，kad，khad和kasd別離為助外貌活性劑對分派系數影響的修正系數，kad和khad別離是微乳液滴中的親脂性有機溶劑對分派系數影響的修正系數。3.3外貌活性劑濃度對溶質保存舉動的影響由式3可知，當微乳色譜體系中助外貌活性劑濃度、親脂性有機溶劑的濃度和活動相ph值一按時，酸性溶質的容量因子(k)與外貌活性劑濃度()間的干系可形貌為：/k=ab(4)也就是說，在必然的助外貌活

15、性劑濃度、親脂性有機溶劑的濃度和ph值條件下，酸性溶質的容量因子的倒數(1/k)與外貌活性劑濃度()呈正比。實行效果表白，酸性溶質的容量因子的倒數(1/k)與外貌活性劑濃度()之間具有精良的線性干系，見表2。這表白了所創立的保存模子式3或式4能較好地反響活動相中外貌活性劑濃度對酸性藥物在微乳色譜體系中保存舉動的影響。3.4濃度對溶質保存舉動的影響當微乳色譜體系中sds、助外貌活性劑和親脂性有機溶劑濃度一按時，酸性藥物的保存模子(式3)可簡化為：k(b+h)/(1+ah)(5)式中，a，b和別離是與溶質在三相分派系數相干的常數。實行效果表白，酸性藥物的容量因子(k)與活動相中h之間能較好地切合的

16、酸性藥物在微乳色譜體系中保存模子式3或式5)，如表3所示。這表白了創立的酸性藥物在微乳液相色譜體系中的保存模子式3或式5)能較好地反響了活動相中或ph值對酸性藥物在微乳色譜體系中保存舉動的影響。表2容量因子與sds濃度間的相干性略table2relatinshipsbeteenapaityfatrandnentratinfsds*zy110418lun；活動相(bilephases)：0.08840.2063l/lsds，1.01l/l異丁醇(isbutanl)，65.7l/l異辛烷(istane)，25l/l磷酸鹽(phsphates)，ph=3.0；流速(lrate)：1.0l/in；柱溫

17、(lunteperature)：30。表3容量因子與氫離子濃度之間的相干性略table3relatinshipsbeteenapaityfatrandnentratinfhydrgenin活動相(bilephases)：0.1474l/lsds，1.01l/l異丁醇(isbutanl)，65.7l/l異辛烷(istane)，25l/l磷酸鹽(phsphates)；別的條件同表2thethernditinsarethesaeasintable2。實行表白，當活動相ph值小于酸性藥物的水相中的pka值時，其容量因子根本穩定；當ph值大于酸性藥物的pka值時，隨著活動相ph值的增長，其容量因子隨之減

18、校這是由于活動相ph值小于pka值，酸性藥物重要以游離酸情勢存在；當活動相ph值大于pka值，部門酸電離形成負離子，使其疏水性削弱，同時，sds修飾的結實相外貌帶負電荷，帶負電荷的溶質與sds修飾的結實相之間的靜電斥力使酸性藥物的容量因子減校當ph值增大到必然值后，酸性藥物完全電離，容量因子又漸漸趨于安穩。artin等17指出，在hpl體系中化合物的容量因子對數(lgk)與其相應的lgp間具有線性相干性。實行效果表白，酸性藥物的容量因子對數(lgk)與其相應的lgp間無相干性。這是由于酸性藥物的保存不但取決于疏水作用還與其離子化程度嚴密相干。經多元線性闡發創造，在微乳色譜體系中酸性藥物的lgk

19、與lgp、ka和氫離子濃度h間具有較好的線性干系，其線性回歸方程為：lgk=0.0831lgp+0.906ka-0.517h+1.001(r=0.908，sd=0.60)6回歸方程中系數絕對值越大，相應的參數對容量因子的影響越大。通過式(6)中3個參數的系數絕對值巨細比力可知，影響酸性藥物容量因子巨細的序次為：kahlgp。3.5助外貌活性劑濃度對溶質保存舉動的影響當ph值一按時，將酸性藥物的游離態和離子態視為團體溶質，那么保存模子式(3)可改寫為：k=kad+kad1+kad(7)式中，和別離為溶質在水相與結實相間的表不雅分派常數；和為助外貌活性劑對表不雅分派系數影響的修正系數，為親脂性溶劑

20、對表不雅分派系數影響的修正系數。從式(7)可知，當親脂性溶劑異辛烷、sds濃度一按時，溶質的容量因子倒數(1/k)與助外貌活性劑濃度()成正比，即隨著微乳活動相中助外貌活性劑濃度的增大，溶質的容量因子隨之減校實行效果證明了酸性藥物在微乳色譜體系中的容量因子倒數(1/k)與活動相中助外貌活性劑異丁醇的濃度呈正比，且兩者間具有精良的線性干系，如表4所示。這說明白酸性藥物在微乳色譜體系中的保存模子式3和式6)能較好地反響活動相中助外貌活性劑濃度對酸性藥物在微乳色譜體系中的保存舉動的影響。表4容量因子與助外貌活性劑異丁醇濃度之間的相干性略table4relatinshipsbeteenapaityfa

21、trandnentratinfisbutanlassurfatant活動相(bilephases)：0.1474l/lsds，0.6751.52l/l異丁醇(isbutanl)，65.7l/l異辛烷(istane)，25l/l磷酸鹽(phsphates)；別的條件同表2thethernditinsarethesaeasintable2。3.6親脂性有機溶劑濃度對溶質保存舉動的影響實行效果表白，當微乳體系中sds濃度、異丁醇濃度和ph值一按時，酸性藥物容量因子隨微乳液中親脂性溶劑異辛烷的量增長而減小，并且酸性藥物容量因子倒數(1/k)與親脂性溶劑異辛烷的濃度間出現精良線性干系，如表5所示。這是由

22、于微乳體系中親脂性溶劑異辛烷濃度增長，即微乳液滴中親脂性溶劑異辛烷濃度增長，使疏水性物質在活動相中的溶解度增大，導致其在結實相上的保存本領落落，容量因子減校該效果與其保存模子式(3)和式(6)完全同等，這意味著保存模子式(3)和式(6)完全可以或許反響親脂性溶劑異辛烷濃度對酸性藥物在微乳色譜體系中的保存舉動的影響。表5容量因子與異辛烷濃度之間的相干性略table5relatinshipsbeteenapaityfatrandnentratinfistane活動相(bilephases)：0.1474l/lsds，1.35l/l異丁醇(isbutanl)，21.9131.3l/l異辛烷(ista

23、ne)，25l/l磷酸鹽(phsphates)；別的條件同表2thethernditinsarethesaeasintable2。3.7柱溫對溶質保存舉動的影響在色譜法疏散歷程中，溶質的容量因子(k)與柱溫的相干性可用vanthff方程表現：lnk-ln(8)式中k為溶質的容量因子，h和s別離為保存歷程中溶質的焓變和熵變，r為氣體常數，t為柱溫(k)，為比擬(結實相體積與活動相體積之比)。以lnk為縱坐標，1/t為橫坐標作圖，得到vantthff曲線，其回歸方程如表6所示。從表6可知，酸性藥物的lnk與1/t之間具有精良的線性干系。線性vantthff曲線表白，在所觀察的溫度范疇內，酸性藥物在微乳色譜體系中的保存機理不隨柱溫的變革而改變，即分派歷程中的h和s不受溫度的影響。從直線歪率可以求得酸性藥物在微乳色譜體系中溶質從活動相分派到結實相歷程中的焓變值，在所觀察的溫度范疇內焓變值(h)均為負值，這說明溶質從活動相(微乳液)分派到結實相是一個放熱歷程。表6酸性藥物在微乳液相色譜體系中lnk與t的相干性略table6relatinshipbeteenlnkfaididruginireulsinliquidhratgraphyandt活動相(bilephases)