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文檔簡介
1、 根據目的菌株及其產物特點分 選擇性分別方法 隨機分別方法 (定向挑選選擇壓力) (用挑選方案- 檢測系統進展間接分別 富集液體培育 固體培育基條件培育 (初篩) 菌種純化 復篩 菌種純化 初步工藝條件探求 再復篩 消費性能測試 較優菌株1-3株保藏及進一步做消費實驗 某些必要實驗和 或作為育種的出發菌株 毒性實驗等 n菌種的純種分別菌種的純種分別n1劃線法:簡單、快捷。劃線法:簡單、快捷。 n2稀釋法:菌落單一均勻。稀釋法:菌落單一均勻。消費性能的測定消費性能的測定n普通采用兩步法:普通采用兩步法:n 初篩:以量為主初篩:以量為主n 復篩:以質為主復篩:以質為主誘變劑物理:紫外線,快中子化學
2、:氮芥,亞硝基胍原生質體交融原生質體交融n 1.標志菌株的挑選n 2.原生質體的制備n 3.原生質體的交融與再生n 聚乙二醇PEG脫水劑n 助融劑n Ca2+提高交融頻率n 4.交融子的選擇DNA重組技術重組技術n1. 目的目的DNA片段的獲得片段的獲得n2. 與載體與載體DNA分子的銜接分子的銜接n3. 重組重組DNA分子引入宿主細胞分子引入宿主細胞n4. 從中選出所需重組從中選出所需重組DNA分子的宿主細分子的宿主細胞胞n菌種的衰退菌種的衰退n 衰退的緣由:衰退的緣由:n1. 菌種保藏不當菌種保藏不當n2. 菌種生長條件沒有得到滿足菌種生長條件沒有得到滿足n3. 菌種天生具有的變異性菌種天生具有的變異性n菌種的復壯:菌種的復壯:n 1. 純種分別純種分別n 2. 經過寄主體進展復壯經過寄主體進展復壯n 3. 淘汰已衰退的個體淘汰已衰退的個體n菌種保藏菌種保藏n 1.原理原理 n 保證微生物的存活,生理活性降至最低。保證微生物的存活,生理活性降至最低。低溫、枯燥、缺氧、缺營養物質低溫、枯燥、缺氧、缺營養物質n 2. 方法方法n 1斜面保藏法斜面保藏法n 2沙土管保藏法沙土管保藏法n 3菌絲速凍保藏法菌絲速凍保藏法n 4石
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