1、2.2動物細胞工程動物細胞培養和核移植技術導學案【學習目標】簡述動物細胞培養的過程、條件及應用。簡述通過動物體細胞核移植技術克隆動物的過程和應用前景。【重點難點】重點動物細胞培養的過程及條件。用動物體細胞核移植技術克隆動物的過程。難點用動物體細胞核移植技術克隆動物的過程。【學習過程】動物細胞工程常用的技術手段有 、_、等，其中是其他動物細胞工程技術的基礎。1. 動物細胞培養然后放在適宜的（1）概念：動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的 ，將它分散成中,讓這些細胞。（2）原理:轉入培養液中 進冇原代培養取動物組縱塊剪碎細駅用胰價白廡社理形 分散成單個胡胞用搭養湫稀樸制成 細胞懸般代之前的稱為,

2、遺傳物質轉入培養液中 進行傳代培養貼滿版壁的細胞用胺蛋白酶處理 分敬誡單牛細胞.制他細胞懸般（3）過程:取動物組織塊t剪碎t用 酶處理分散成（保證營養供應和有害代謝產物的及時排出）T制成 T轉入培養瓶中在適宜環境中進行培養，懸液中分散的細胞很快就，稱為。當貼壁細胞分裂生長到 時，細胞就會，這種現象稱為初次培養稱為 °t貼滿瓶 壁的細胞重新用 酶處理分散成單個細胞繼續培養（使細胞從瓶壁上脫 離下來便于分瓶后繼續培養），稱為。初次培養稱為 ，分瓶后的培養都稱為。傳代培養的細胞一般傳至_以后就不易傳下去了， 能傳代培養到50 ,能傳代培養到50代之后的稱為 ,遺傳物質 ，已經成為 ，能。目

3、前使用的或冷凍 保存的正常細胞通常為 10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型。（正常細胞有接觸抑制，通常是層貼壁，癌細胞能無限增殖，沒有接觸抑制，可多層貼壁。）注：取材時一般選取動物胚胎或幼齡動物的組織、器官，因為這些細胞分化程度低、增殖能力強，更容易培養。（4）動物細胞培養的條件 :培養液和所有培養用具應進行 處理。通常還要在培養液添加一定量的 ，以防培養過程中的污染。此外，還應定期更換培養液，防止。 :合成培養基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入等天然成分。 :適宜溫度：哺乳動物多是 ;適宜pH: 。 ：O2是所必需的，CO的主要作用是 。細胞培養時，通常將其的混

4、合氣體培養箱中進行培養。（5）動物細胞培養技術的應用： 許多有重要價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等，都可以借助動物 細胞的大規模培養來生產。 動物細胞是基因工程技術中常用的受體細胞。用于檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性。科學家培養正常或者病變的細胞，用于生理、病理、藥理等 方面的研究，如用于篩選抗癌藥物等。問題如何保證無菌、無毒環境？（1） 對和所有進行無菌處理；（2） 通常還需要在細胞培養液中添加一定量的 ；（3） 應定期更換 ，以便清除 ，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養材料？為什么培養前要將組織細胞分散成單個細

5、胞？用胃蛋白酶行嗎？動物細胞培養能否像綠色植物組織培養那樣最終培養成新個體？動物細胞培養瓶內表面為什么要光滑？動物細胞培養瓶內表面無毒、無菌的操作方法是什么？動物細胞培養中氧氣和二氧化碳作用分別是什么？2. 動物體細胞核移植技術和克隆動物（1）概念：將動物的一個細胞的 ，移入一個已經 中，使其重組并發育成一個新的 ，這個新的胚胎最終發育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為。哺乳動物核移植可以分為和。選用去核卵母細胞的原因:（2）原理:（3）種類（4）過程纟田胞核移植一一易細胞核移植一一難供體體細胞一細胞培養一-體細胞注入-胚胎卵巢卵母細胞需去核無核峽細胞廻逖代孕母牛一生出與洪休遺傳物質相同

6、的個體CD卵母細胞的采集：從屠宰場收集牛卵巢，在體外培養到 期。 供體細胞的采集：從供體取體細胞進行培養。 供體的移入去核卵母細胞中，其實質是將 與供體細胞進行細胞融合，一般采用電激法使細胞融合，所以子代的細胞質基因來自于親本。 供體核進入受體卵母細胞后，還需要物質或化學方法激活受體細胞，使其完成分裂，因為所選用的受體細胞是處于 期的卵母細胞，減數分裂還 沒有進行完。重組細胞在體外發育成，將早期胚胎移植到受體母牛體內。代孕母牛最后生出與牛遺傳物質及性狀的幼體。因為細胞質中遺傳物質來自 ，同時，生物的性狀不僅與遺傳物質有關，還受影響。（4）體細胞核移植技術的應用前景：加速家畜遺傳改良進程，促進良

7、畜群繁育；保護瀕危物種，增大存活數量；生 產珍貴的醫用蛋白；作為異種移植的供體；用于組織器官的移植等。（5）體細胞核移植技術存在的問題：成功率，克隆動物存在著 問題，對克隆動物 也存有爭議。問題受體細胞為什么選用卵母細胞？因為卵母細胞 ，易操作，而且含有促使細胞 的某種物質和營養物質。【鞏固練習】1、 動物細胞工程技術的基礎是（）A、動物細胞融合B、胚胎移植C、動物細胞培養D、核移植2、一只羊的卵細胞核被另一只羊的體細胞核置換后，這個卵細胞經過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內發育，結果產下一只羊羔。這種克隆技術具有多種用途，但是不能（）A、有選擇地繁殖某一性別的家畜B、繁殖家畜中的優秀個體C、

8、用于保存物種D、改變物種的基因型3、 下列關于動物細胞培養的敘述中，錯誤的是（）A、用于培養的細胞大多取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B、將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C、在培養瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D、動物細胞培養只能傳 50代左右，所培養的細胞會衰老死亡4、從母羊甲的體細胞中取出細胞核，注入到母羊乙去掉核的卵細胞中，融合后的細胞經卵 裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宮內，出生小羊的大多數性狀A、難以預測B、像甲C、像乙D、像丙5、動物細胞融合和植物原生質體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是A、融合的原理B、融合的優點C、融合的誘導

9、手段D、融合的過程 1、表現型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛，產生這一結果最可能的原因是A、試管動物培養B、胚胎移植子C、胚胎分割移植D、受精卵移植 2、世界上第一只克隆綿羊“多利”的培育程序如圖所 示，請據圖回答：（1 ）寫出圖中a、b所指的細胞工程名稱：a； b（2）實施細胞工程a時，所需的受體細胞大多采用動物卵母細胞的原因是（3） “多利”面部的毛色是 。請根據遺傳學原理說明判斷依據：（4）繼植物組織培養之后，克隆綿羊的培育成功，證明動物細胞核也具有。 3、右圖為細胞融合的簡略過程，請據圖回答：（1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用_ 理，除去了 _ ;由A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法