1、免疫學檢驗教學大綱課程編碼：10272042課程名稱：免疫學檢驗英文名稱：Immunological detection technique開課學期：7 學時學分：40/2.5課程類型：專業課開課專業：預防醫學專業選用教材：免疫學檢驗 人民衛生出版社 2006年8月第一版主要參考書：1. 免疫學檢驗 呂世靜主編 人民衛生出版社 2003年2月第2版 2. 臨床免疫學和免疫檢驗 王蘭蘭主編 2004年1月第3版 3. 簡明免疫學技術 朱正美主編 科學出版社 2002年7月第1版 4. 免疫學常用實驗技術柳忠輝主編 科學出版社執筆人：黎明蘭一、 課程性質、目的與任務免疫學檢驗是研究免疫學技術在醫學

2、領域中應用的一門學科，是預防醫學專業（衛生檢驗方向）一門重要的專業課。免疫學檢測技術因其特異性強、敏感性高、穩定、簡便和快速的優勢，現已廣泛應用于生物學、臨床醫學、預防醫學及其他有關領域。通過對該課程的學習，掌握各類免疫學檢驗技術的原理、類型、技術要點、實際應用及方法學評價，更好的為防病治病服務。二、 教學基本要求1. 掌握免疫學檢驗常用技術的原理、技術要點、應用及方法學評價。2. 掌握免疫學檢驗常用技術的測定方法。3. 掌握免疫學技術在免疫預防計劃免疫、動植物檢疫、健康相關產品免疫功能評價中的應用。4. 了解免疫學技術的最新進展及與其他學科的關系。三、 各章節內容及學時分配第一章 抗原抗體的

3、純化（2學時）教學目的與要求掌握抗原和抗體純化方法的基本原理、方法評價和應用。了解抗原抗體各種純化方法的程序及分離物的選擇。教學內容第一節 鹽析法一、 原理二、 常用中性鹽三、 操作步驟四、 影響因素五、 方法評價與應用第二節 凝膠層析法一、 原理二、 常用凝膠的種類和性質三、 操作步驟四、 方法評價與應用第三節 離子交換層析一、 原理二、 常用離子交換劑的種類和性質三、 離子交換層析的程序四、 方法評價與應用第四節 親和層析法一、 原理二、 親和層析載體與配基的選擇三、 層析條件的選擇四、 方法評價與應用考核要求：了解 蛋白質提純方法的程序及條件掌握 蛋白質提純方法的原理 第二章 免疫原與特

4、異性抗體的制備（2學時）教學目的及要求： 掌握人工免疫原的制備方法，免疫血清的制備方法，雜交瘤技術的原理及技術要點。了解可溶性抗原的制備方法及單克隆抗體制備流程及應用。教學內容：第一節 免疫原的制備一、 顆粒性抗原的制備二、 可溶性抗原的制備三、 人工免疫原的制備及佐劑第二節 免疫血清的制備一、 免疫動物的選擇二、 確定免疫方案三、 動物采血法四、 免疫血清的分離與保存第三節 單克隆抗體的制備一、 雜交瘤技術的基本原理二、 單克隆抗體的制備要求三、 單克隆抗體的應用考核要求：了解：1.顆粒性抗原、可溶性抗原的制備方法 2.單克隆抗體的制備流程掌握：1.人工免疫原的制備 2.免疫血清的制備方法

5、第三章 沉淀反應與凝集反應（2學時）教學目的及要求：掌握常用沉淀反應和凝集反應的原理及應用。了解其他凝集技術類型、原理和應用。教學內容：第一節 沉淀反應一、 免疫濃度測定二、 雙向瓊脂擴散試驗三、 免疫電泳技術第二節 凝集反應一、 直接凝集反應二、 間接凝集反應三、 其他凝集技術考核要求：了解：免疫濃度測定，其他凝集技術的原理及應用。掌握：雙向瓊脂擴散試驗、雙 免疫電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、間接血凝試驗的原理及應用。 第四章 溶血反應和補體結合試驗教學目的與要求：掌握溶血反應體系及檢測方法。了解補體結合試驗的原理、類型、方法和評價。教學內容：第一節 溶血反應一、 溶血反應的檢測試驗二、 血清總

6、補體溶血（CH50）測定。第二節 補體結合試驗一、 類型與原理二、 試驗方法及影響因素三、 方法的評價和應用考核要求：了解： 補體結合試驗的類型、原理、方法評價及應用。掌握：血清總補體溶血（CH50）測定。第五章 酶免疫技術（2學時）教學目的及要求：掌握固相酶免疫測定的方法類型及原理，ELISA技術要點，了解其他酶免疫技術及應用。教學內容：第一節 酶免疫技術的分類第二節 固相酶免疫測定一、 基本原理二、 方法類型和操作步驟第三節 ELISA技術要點一、 試劑準備二、 酶標記方法三、 酶標記物的純化與鑒定四、 最適工作濃度的選擇第四節 其他酶免疫技術一、 斑點-酶聯免疫吸附試驗二、 斑點酶免疫滲

7、濾試驗三、 免疫印記法考核要求：了解：其他酶免疫技術的原理及應用掌握：1.雙抗體夾心法和間接法的原理 2.ELISA法的技術要點第六章 熒光免疫技術（1學時）教學目的及要求：掌握熒光抗體技術的原理、技術方法及應用。了解熒光抗體的制備方法及熒光免疫顯微技術。教學內容：第一節 熒光現象第二節 熒光抗體技術一、 基本原理二、 熒光抗體技術方法三、 熒光抗體的制備四、 熒光免疫顯微技術五、 應用考核要求：了解：熒光抗體的制備及熒光免疫顯微技術掌握：熒光抗體技術的基本原理及技術方法。第七章 放射免疫技術（1學時）教學目的與要求： 掌握放射免疫測定的原理、方法、評價及應用。了解免疫放射測定試驗。教學內容：

8、第一節 放射免疫測定一、 原理二、 測定方法三、 方法評價四、 應用第二節 免疫放射測定一、 原理二、 技術類型三、 技術要點考核要點：了解：免疫放射測定的原理、技術類型及技術要點。掌握：放射免疫測定的原理、測定方法及應用。第八章 金免疫技術（2學時）教學目的及要求：掌握金免疫測定技術的原理、技術類型及應用。了解膠體金和免疫金的特性與制備。了解金免疫組化技術的方法。教學內容：第一節 膠體金與免疫金的制備一、 膠體金的特性及其制備二、 免疫金的特性及其制備第二節 金免疫測定技術一、 斑點金免疫滲濾試驗二、 斑點金免疫層析試驗第三節 金免疫組織化學技術一、 免疫金光鏡染色技術二、 免疫金電鏡染色技

9、術考核要求：了解：1.膠體金、免疫金的特性及制備方法。 2.免疫金（銀）光鏡染色技術的原理及方法。掌握：斑點金免疫滲濾試驗與斑點金免疫層析試驗的原理、技術類型及方法。 第九章 免疫細胞檢測技術（3學時）教學目的與要求：掌握免疫細胞分離純化技術及評價免疫功能的相關試驗原理、方法、結果判定。教學內容：第一節 免疫細胞的分離與純化一、 血液標本的采集二、 外周血液中白細胞的分離三、 外周血液中單個核細胞的分離四、 淋巴細胞及其亞群的分離純化五、 吞噬細胞的分離六、 淋巴細胞的保存及活力測定。第二節 T淋巴細胞的檢測一、 T淋巴細胞表面標志的檢測二、 T淋巴細胞受體的檢測三、 T淋巴細胞功能的檢測第三

10、節 B淋巴細胞的檢測一、 B淋巴細胞表面抗原的檢測二、 B淋巴細胞表面受體的檢測三、 B淋巴細胞功能的體外檢測第四節 自然殺傷細胞的檢測一、 概述二、 NK細胞活性檢測三、 測定NK細胞活性的衛生學意義第五節 吞噬細胞功能的檢測一、 巨噬細胞吞噬功能的檢測二、 巨噬細胞吞噬功能檢測的衛生學意義考核要求：了解：1.了解T淋巴細胞表面標志的檢測方法及衛生學意義的評價。2.了解T淋巴細胞E受體和IL-2受體的檢測方法。3.了解B淋巴細胞Sm2g受體及Fc受體的檢測方法。掌握：1.外周血液中單個核細胞、淋巴細胞及亞群分離純化方法，淋巴細胞保存及活力測定方法。 2.T淋巴細胞功能檢測方法。 3.B淋巴細

11、胞功能檢測的體外實驗 。4. NK細胞活性檢測方法及衛生學意義。5. 噬細胞功能的檢測方法及衛生學意義。第十章 免疫球蛋白測定（1學時）教學目的及要求：掌握免疫球蛋白定量測定的方法參考值及應用評價。了解免疫球蛋白定量的醫學意義。教學內容：第一節 免疫球蛋白定量的檢測方法一、 常用檢測方法。二、 參考值第二節 免疫球蛋白定量檢測方法學評價及應用第三節 免疫球蛋白定量臨床意義一、 血清Ig定量臨床意義。二、 尿微量Ig定量臨床意義。三、 腦脊液Ig定量臨床意義?？己艘螅毫私猓貉錓g、尿微量Ig、腦脊液Ig定量檢測的臨床意義。掌握：免疫球蛋白定量檢測方法及參考值，方法評價及應用。 第十一章 動植

12、物病原體的免疫學檢驗（2學時）教學目的與要求：掌握常見動植物疫病的免疫學檢測方法。了解進出口商品檢疫的新進展。教學內容：第一節 動物病原體的免疫學檢驗一、 炭疽的免疫學檢驗二、 鼻疽的免疫學檢驗三、 口蹄疫的免疫學檢驗四、 布魯氏病的免疫學檢驗五、 狂犬病的免疫學檢驗六、 瘋牛病的免疫學檢驗七、 禽流感的免疫學檢驗第三節 植物病原體的免疫學檢驗一、 植物細菌的免疫學檢驗二、 植物真菌的免疫學檢驗三、 植物病毒的免疫學檢驗考核要求：了解：植物病原體的免疫學檢驗方法。掌握：動物病原體的免疫學檢驗方法。 第十二章 健康相關產品的免疫學檢驗（2學時）教學目的與要求：掌握保健食品免疫學檢驗方法和評價標準

13、及化妝品的免疫學檢驗方法。了解健康相關產品中有毒有害物質免疫學檢驗方法及新進展。教學內容：第一節 有毒有害物質的免疫學檢驗一、 有毒有害物質免疫學檢驗的技術要點。二、 有毒有害物質免疫學檢測方法。三、 有毒有害物質免疫學檢測方法的應用。第二節 化妝品的免疫學檢驗第三節 保健食品免疫學檢驗和評價一、 免疫學檢驗項目二、 免疫學檢驗方法三、 增強免疫功能結果判定與評價?？己艘螅毫私猓河卸居泻ξ镔|的免疫學檢驗的技術要點、方法和應用。掌握：保健食品免疫學檢驗項目、檢驗方法、結果判定及標價標準。 免疫學檢驗實驗課教學大綱一、 實驗目的與任務免疫學檢驗實驗課的教學目的是使學生掌握諸項試驗的原理、基本要求

14、、操作步驟，正確分析實驗結果、了解各種影響因素以及在衛生檢驗工作中的應用。通過實驗課教學，培養學生認真、嚴謹的工作態度和實際動手操作能力，以適應檢驗工作的需要。二、 實驗教學基本要求1. 掌握免疫學檢驗諸項試驗的原理2. 掌握諸試驗各種液體的配制方法3. 掌握必做實驗的操作步驟、結果判定及影響因素。4. 了解諸項試驗所需的儀器設備。三、 實驗教材或指導書 免疫學檢驗實習指導 人民衛生出版社 2006年8月第一版五、 實驗項目一覽表序號實驗項目內容提要實驗類型學時分配主要儀器設 備實驗地點備注1免疫球蛋白的分離純化鹽析法血清中的免疫球蛋白粗提綜合性10一組（每學期選取3個實驗項目）2免疫球蛋白的分離純化凝膠過濾層析法（分離不同分子量大小的抗原）層析柱3雙向瓊脂擴散鑒定抗原和抗體純度的定性分析4聚丙烯酰胺凝膠電泳分離、鑒定血清中各類蛋白質電泳儀、圓盤電泳槽5酶聯免疫吸附實驗雙抗體夾心法檢驗未知抗原酶標儀、微量加樣器、酶標測定板6免疫金（銀）染色實驗免疫金標記抗體及檢測抗原超速離心機、顯微鏡、溫箱、分光光度