1、 臨床分子生物學檢驗課程教學大綱一、課程基本信息【課程名稱】臨床分子生物學檢驗 【英文名稱】(Clinical molecular biology technology ) 【課程編碼】YXZX3430【課程類別】專業選修課【總 學 時】22學時【總 學 分】1學分【適用專業】醫學檢驗專業【開課院系】醫學院二、課程的性質和任務【課程性質】分子生物學是研究生命化學的科學，它在分子水平探討生命的本質，即研究生物體的分子結構與功能、物質代謝與調節、及其在生命活動中的作用。由于分子生物學越來越多地成為生命科學的共同語言，當今分子生物學已成為生命科學領域的前沿學科。臨床分子生物學檢驗的教學任務主要是介紹

2、核酸與分子標志物、核酸雜交、擴增及序列分析、芯片技術、生物信息分析技術以及應用分子生物學技術較多的有關病毒、細菌、真菌感染的分子生物學檢驗。課程涵蓋最新的有關單基因病檢測、腫瘤、線粒體病、染色體病分子檢測技術，同時目前臨床上技術要求很高的藥物相關基因、胚胎植入前以及移植配型和法醫物證學的相關分子生物學檢驗的內容也有詳細講解，對于解決精準醫療的相關問題提供了實驗室檢測依據。【教學目標】 通過臨床分子生物學檢驗課程的學習，學生將能夠：（1）描述生物體(主要是人體)內的主要物質的組成、分子生物學功能。（2）基本掌握核酸雜交技術和核酸擴增技術及核酸序列分析。（3）學會初步通過生物芯片技術和蛋白質組學技

3、術的學習，運用生物信息學技術可以進行簡單的數據結果分析。（4）結合分子生物學的基本理論掌握病毒學、細菌感染、真菌等的分子生物學檢測。（5）了解有關單基因遺傳病、腫瘤、線粒體疾病、染色體病、藥物相關性基因、胚胎植入前及移植配型相關技術。【教學任務】（1）要求學生掌握臨床分子生物學檢驗的基礎理論、知識和方法。（2）通過實驗課，使學生能夠了解分子生物學檢驗基本技術的臨床應用。三、課程教學基本要求（一）理論教學內容和基本要求緒論教學內容： 1、臨床分子生物學檢驗的定義及其發展歷史。 2、臨床分子生物學檢驗的分子靶標及在病原生物基因組、基因變異、基因多態性、循壞游離核酸檢測中的應用。 3、臨床分子生物學

4、檢驗在感染性疾病、遺傳性疾病、腫瘤及個體化醫學上的發展與應用。 知識點：分子生物學理論和技術的發展趨勢及其在醫學上的應用。臨床分子生物學檢驗的定義及其發展歷史。臨床分子生物學檢驗的分子靶標及在病原生物基因組、基因變異、基因多態性、循壞游離核酸檢測中的應用。臨床分子生物學檢驗在感染性疾病、遺傳性疾病、腫瘤及個體化醫學上的發展與應用。 重點：臨床分子生物學檢驗的定義和基本概念； 難點：臨床分子生物學檢驗的分子靶標及應用；第一章 核酸與分子標志物一、學習目的要求教學內容：1、核酸的結構和功能（DNA的結構和功能、RNA的結構和功能）。2、表觀遺傳與基因功能，基因突變。3、基因組結構與特征，原核生物、

5、病毒、人類基因組結構特點。4、核酸分子標志物的分類及未來發展。 知識點：核酸分子標志物的分類及發展。DNA的結構和功能、RNA的結構和功能。表觀遺傳與基因功能，基因突變。基因組結構與特征，原核生物、病毒、人類基因組結構特點。 重點：DNA的結構和功能、RNA的結構和功能。DNA甲基化，蛋白質結構，基因突變的概念及類型。； 難點：原核生物、病毒、人類基因組結構特點；第二章 核酸雜交技術一、學習目的要求教學內容：1、核酸探針的種類、長度、標記方法及檢測。2、核酸分子雜交技術中的原位雜交技術、Southern及Northern印記雜交技術。3、長探針和短小寡核苷酸探針雜交的影響因素。 知識點：核酸探

6、針的標記和檢測、Southern及Northern印記雜交技術。核酸探針的種類、長度、標記方法及檢測。原位雜交技術、Southern及Northern印記雜交技術。長探針和短小寡核苷酸探針雜交的影響因素。 重點：掌握核酸探針的種類及影響雜交的因素。 難點：原位雜交技術。第3章 核酸擴增技術教學內容：1、聚合酶鏈反應的基本原理、反應過程、擴增體系和擴增條件。2、以PCR為基礎的逆轉錄PCR、巢式PCR、多重PCR、定量PCR、單細胞PCR、原位PCR等技術。3、實時PCR技術的原理及參照系統。4、PCR產物常見的分析技術、臨床基因擴增檢驗的質量管理、實驗室設置和人員資質的要求； 知識點：PCR-

7、RELP、等位基因、特異性寡核苷酸、單鏈構象多態性、聚合酶鏈反應的基本原理、反應過程、擴增體系和擴增條件。逆轉錄PCR、巢式PCR、多重PCR、定量PCR、單細胞PCR、原位PCR技術。實時PCR技術的原理及參照系統。PCR產物常見的分析技術、臨床基因擴增檢驗的質量管理、實驗室設置和人員資質的要求； 重點:聚合酶鏈反應的基本原理、實時PCR的原理、臨床基因擴增檢驗的質量管理； 難點：PCR為基礎的相關PCR技術。第四章 核酸序列分析教學內容：1、第一代測序技術的原理、染料、反應體系、自動測序儀的使用及測序策略。2、二代測序技術的基本原理和工作流程、特點及應用。3、三代測序技術的發展趨勢。 知識

8、點：一代測序技術的原理、染料、反應體系、自動測序儀的使用及測序策略。二代測序技術的基本原理和工作流程、特點及應用。三代測序技術的發展趨勢。 重點:二代測序技術的原理、特點及應用 難點:一代測序的原理。第五章 生物芯片技術教學內容：1、DNA芯片的檢測原理、DNA芯片技術的特點、DNA芯片檢測技術在醫學中的應用2、表達譜芯片的技術原理、表達譜芯片技術在醫學中的應用。蛋白質芯片的技術原理和在醫學中的應用。3、芯片序列捕獲技術的原理、芯片序列捕獲技術的技術優點及應用。 知識點：DNA芯片的檢測原理、特點、醫學中的應用。表達譜芯片的技術原理、表達譜芯片技術在醫學中的應用。蛋白質芯片的技術原理和在醫學中

9、的應用。芯片序列捕獲技術的原理、芯片序列捕獲技術的技術優點及應用。 重點:DNA芯片的原理和在醫學中的應用。 難點:表達譜芯片、蛋白質芯片的技術原理和在醫學中的應用。第六章 蛋白質組學技術教學內容：1、蛋白質印記技術的原理、蛋白質印記技術的方法學特點。2、雙向凝膠電泳的原理、凝膠上蛋白質的檢測、雙向凝膠電泳圖像分析、雙向凝膠電泳方法的特點。3、生物質譜的基本原理、生物質譜技術的特點、生物質譜的應用。 知識點：蛋白質印記技術的原理、方法學特點。雙向凝膠電泳的原理、凝膠上蛋白質的檢測、雙向凝膠電泳圖像分析、雙向凝膠電泳方法的特點。生物質譜的基本原理、生物質譜技術的特點、生物質譜的應用。 重點:蛋白

10、質印記技術的原理和方法特點。 難點:熟悉生物質譜技術的原理及應用。第七章 生物信息學技術教學內容：1、生物信息數據庫查詢、文獻檢索的方法。2、核酸序列的基本分析、核酸序列的比對分析、開放閱讀框的分析、啟動子預測。3、蛋白質的基本性質分析、蛋白質的結構預測、蛋白質的功能預測。 知識點：生物信息數據庫查詢、文獻檢索的方法。核酸序列的基本分析、核酸序列的比對分析、開放閱讀框的分析、啟動子預測。蛋白質的基本性質分析、蛋白質的結構預測、蛋白質的功能預測。 重點:生物信息數據庫查詢、文獻檢索的操作。 難點:核酸數據分析。第八章 病毒感染的分子生物學檢驗一、學習目的要求教學內容：1、乙肝病毒的基因組結構、分

11、子生物學檢驗、檢測的臨床意義。2、人乳頭瘤病毒的基因組結構特征、分子生物學檢驗、檢測的臨床意義。3、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒、流行性感冒病毒的分子生物學檢驗及臨床意義。 知識點：乙肝病毒的基因組結構、分子生物學檢驗、檢測的臨床意義。人乳頭瘤病毒的基因組結構特征、分子生物學檢驗、檢測的臨床意義。丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒、流行性感冒病毒的分子生物學檢驗及臨床意義。 重點:乙型肝炎病毒的檢測和臨床意義、人乳頭瘤病毒的檢驗及臨床意義。 難點:人類免疫缺陷病毒檢驗及其臨床意義。第九章 細菌感染的分子生物學檢驗教學內容 1、細菌感染的一般檢出策略和完整檢出策略。 2、結核分枝桿菌的基因組結構特

12、點、分子生物學檢驗內容和臨床意義。 3、淋病奈瑟菌檢測、O157型大腸埃希菌分子生物學檢驗的內容和臨床意義。 4、醫院細菌感染的特征及分子生物學檢測內容。 知識點：細菌感染的一般檢出策略和完整檢出策略。結核分枝桿菌的基因組結構特點、分子生物學檢驗內容和臨床意義。淋病奈瑟菌檢測、O157型大腸埃希菌分子生物學檢驗的內容和臨床意義。醫院細菌感染的特征及分子生物學檢測內容。 重點:結核分枝桿菌的分子生物學檢驗及臨床意義。 難點:淋病奈瑟菌檢測及其臨床意義。第10章 真菌與其他病原體的分子生物學檢驗教學內容：1、白假絲酵母菌和新型隱球菌的分子生物學檢驗。 2、沙眼衣原體、肺炎衣原體的分子生物學檢驗及臨

13、床意義。 3、肺炎支原體、解脲支原體的分子生物學檢驗及臨床意義。 4、梅毒螺旋體和原蟲檢測的臨床意義。 知識點：白假絲酵母菌和新型隱球菌的分子生物學檢驗。沙眼衣原體、肺炎衣原體的分子生物學檢驗及臨床意義。肺炎支原體、解脲支原體的分子生物學檢驗及臨床意義。梅毒螺旋體和原蟲檢測的臨床意義。 重點：衣原體和支原體的分子生物學檢驗和臨床意義； 難點：常見真菌、梅毒螺旋體、原蟲的分子生物學檢驗。第11章 單基因遺傳病的分子生物學檢驗教學內容： 1、單基因遺傳病的直接和間接診斷策略。 2、血紅蛋白病的檢驗和臨床意義；3、 血友病凝血因子、血友病A和B的分子生物學檢驗及臨床意義；4、了解迪謝內營養不良的相關

14、檢驗和臨床意義。5、了解脆性X綜合癥的分子生物學檢驗的臨床意義。 知識點：單基因遺傳病的直接和間接診斷策略。血紅蛋白病的檢驗和臨床意義；血友病凝血因子、血友病A和B的分子生物學檢驗及臨床意義； 重點：血紅蛋白病的分子生物學檢驗和臨床意義。 難點：單基因遺傳病的診斷策略、血友病的分子生物學檢驗和臨床意義。第12章 腫瘤的分子生物學檢驗教學內容：1、腫瘤相關的染色體異常、基因異常、單核苷酸多態性、表觀遺傳異常。 2、腫瘤的分子生物學檢驗在乳腺癌、結直腸癌、白血病中的應用。 知識點：腫瘤相關的染色體異常、基因異常、單核苷酸多態性、表觀遺傳異常。腫瘤的分子生物學檢驗在乳腺癌、結直腸癌、白血病中的應用。

15、 重點：腫瘤相關的染色體異常。 難點：腫瘤相關的基因異常、表觀遺傳異常。 第13章 線粒體疾病的分子生物學檢驗教學內容：1、線粒體基因組及其表達系統、基因組變異與疾病的相關性。 2、與耳聾相關的mtDNA突變和檢測。3、線粒體與leber遺傳性視神經病變的檢測。 知識點：線粒體與leber遺傳性視神經病變及糖尿病的相關性。線粒體基因組及其表達系統、基因組變異與疾病的相關性。與耳聾相關的mtDNA突變和檢測。 重點：耳聾相關的mtDNA突變和檢測 難點：線粒體基因組及其表達系統、線粒體基因組變異與疾病的關系。 第十四章 染色體疾病的分子生物學檢驗教學內容： 1、染色體異常、人類染色體數目、結構和

16、形態。 2、染色體病的分類及其特點、常染色體病、性染色體病、染色體微缺失疾病的檢測。3、染色體病的分子生物學檢驗技術。 知識點：染色體異常、人類染色體數目、結構和形態。 染色體病的分類及其特點、常染色體病、性染色體病、染色體微缺失疾病的檢測。染色體病的分子生物學檢驗技術。 重點：染色體病的分類及其特點、常染色體病、性染色體病和染色體微缺失； 難點：染色體與染色體異常。第十五章 藥物相關基因檢測教學內容： 1、藥物基因組學概念、研究范疇、藥物相關基因分類。 2、藥物作用靶點相關基因、代謝酶基因、藥物副反應相關基因。 知識點：藥物基因組學概念、研究范疇、藥物相關基因分類。藥物作用靶點相關基因、代謝

17、酶基因、藥物副反應相關基因。 重點：藥物作用靶點相關基因、藥物代謝酶基因及藥物副反應相關基因。 難點：藥物基因組學的概念及研究范疇、藥物相關基因分類；第16章 胚胎植入前的分子生物學檢驗教學內容： 1、試管嬰兒、胚胎植入前的相關檢驗； 2、胚胎取材途徑及常用的分子生物學技術。 3、胚胎植入前診斷的應用評價。 知識點：試管嬰兒、胚胎植入前的相關檢驗；胚胎取材途徑及常用的分子生物學技術。胚胎植入前診斷的應用評價。 重點：試管嬰兒植入前遺傳學診斷的檢驗。 難點：胚胎植入前診斷的技術和方法。第17章 移植配型及法醫物證學的分子生物學檢驗教學內容： 1、免疫學及分子生物學基礎、分子生物學技術在HLA分型

18、中的應用。 2、個體識別和親子鑒定、遺傳學及分子生物學基礎。 知識點：免疫學及分子生物學基礎、分子生物學技術在HLA分型中的應用。個體識別和親子鑒定、遺傳學及分子生物學基礎。 重點：個體識別和親子鑒定的概念。 難點：移植配型的檢驗、法醫物證學的檢驗。（2） 實驗教學內容和基本要求 實驗教學內容及要求見臨床分子生物學檢驗4、 課程教學要求及考核方式1. 教學方法：多媒體+板書。2. 作業及實踐環節：乙肝病毒感染的PCR檢測。3. 考試形式：期末考核采用閉卷、筆試的方式評定。總評成績的核算辦法是：期末考試占總成績的80%，平時考核占總成績的20%。五、學時分配章節主要內容各教學學時分配備注講授習題見習討論合計 緒論分子生物學的定義及發展應用0.5學時第 一 章核酸與分子標志物0.5學時第 二 章核酸雜交技術 1學時第 三 章核酸擴增技術 2學時第 四 章核酸序列分析技術 1學時第 五 章生物芯片技術1學時第 六 章蛋白質組學技術1學時第 七 章生物信息學技術1學時第 八 章病毒感染的分子生物學檢驗2學時第 九 章細菌感染的分子生物學檢驗1學時第 十 章真菌與其他病原體的分子生物學檢驗1學時第十一章單基因遺傳病的分子生物學檢驗1學時第十二章腫瘤的分子生物學檢