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文檔簡介

1、法了解細菌的三種基本形態二、顯微鏡的基本結構及油鏡的工作原理1、普通光學顯微鏡的基本結構 普通光學顯微鏡的構造可分為兩部分:1機械裝置:鏡座、鏡筒、鏡臂、物鏡轉換器、載物臺、標本移動螺旋、粗調螺旋和細調螺旋等部件組成。2光學系統:目鏡、物鏡、聚光器、虹彩光圈、光源等組成 普通光學顯微鏡基本構造 在顯微鏡的光學系統中,物鏡的性能最為關鍵,它直接影響著顯微鏡的分辨率。而在普通光學顯微鏡配置的幾種物鏡中,油鏡的放大倍數最大,對微生物學研究最為重要。與其他物鏡相比,油鏡的使用比較特殊,需在載玻片和鏡頭之間加滴鏡油,這主要又有如下兩方面的原因:二、顯微鏡的基本結構及油鏡的工作原理2、油鏡的工作原理1增加

2、照明亮度2) 增加數值孔徑(NA),提高顯微鏡的分辨率 側向注視物鏡,防止物鏡和載玻片相碰。找到目的物后,將它移至視野正中處。2高倍鏡觀察40):旋動轉換器換高倍鏡觀察。3油鏡觀察100):下降載物臺,在載玻片上滴一滴香柏油,將油鏡移至正中,緩慢調節粗調螺旋使油鏡頭浸在油中,剛好貼近載玻片。然后再用細準焦螺旋微微向上調即可。干凈擦鏡紙擦去殘留的二甲苯將顯微鏡的各部位還原,物鏡轉成“八字形,擦干凈鏡體,罩上防塵罩。3、什么是物鏡的同焦現象?它在顯微鏡觀察中有什么意義?下次實驗項目名稱:細菌的簡單染色和革蘭氏染色增加照明亮度增加照明亮度 油鏡的放大倍數可達油鏡的放大倍數可達100100 ,放大倍數

3、這,放大倍數這樣大的鏡頭,焦距很短,直徑很小,但所樣大的鏡頭,焦距很短,直徑很小,但所需要的光照強度卻最大。需要的光照強度卻最大。 從承載標本的玻片透過來的光線,因介質密度不同從玻片進入空氣,再進入鏡頭),有些光線會因折射或全反射,不能進入鏡頭,致使在使用油鏡時會因射入的光線較少,物像顯現不清。所以為了不使通過的光線有所損失,在使用油鏡時需在油鏡和玻片之間加入與玻璃的折射率n =1.55相仿的鏡油通常使用香柏油,其折射率n =1.52)。增加顯微鏡的分辨率增加顯微鏡的分辨率 顯微鏡的分辨率或分辨力顯微鏡的分辨率或分辨力resolution or resolution or resolving

4、powerresolving power是指顯微鏡能辨別兩點之是指顯微鏡能辨別兩點之間的最小距離的能力。從物理學角度看,光間的最小距離的能力。從物理學角度看,光學顯微鏡的分辨率受光的干涉現象及所用物學顯微鏡的分辨率受光的干涉現象及所用物鏡性能的限制,可表示為:鏡性能的限制,可表示為:NAD2分辨率式中:式中:=光波波長,光波波長,NA=NA=物鏡的數值孔徑值。物鏡的數值孔徑值。 光學顯微鏡的光源不可能超出可見光的波長范圍0.40.7 m),而數值孔徑則取決于物鏡的鏡口角和玻片與鏡頭間介質的折射率,可表示為:NA=nsin 。 式中為光線最大入射角的半數。它取決于物鏡的直徑和焦距,一般來說在實際應用中最大只能達到120,而n為介質折射率。由于香柏油的折射率1.52比空氣及水的折射率分別為1.0和1.33要高,因此以香柏油作為鏡頭與玻片之間介質的油鏡所能達到的數值孔徑NA一般在1.21.4要高于低倍鏡、高倍鏡等物鏡NA都低于1.0)。若以可

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