1、課時規范訓練、選擇題1 某實驗小組欲從豆油污染的土壤中篩選出高效降解脂肪的菌株。請回答:（1）_ 在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以 _ 為唯一碳源的固體培養基上，從功能上講，該培養基屬于 _ 培 養基。（2）_ 為避免培養基污染，需將培養皿呈狀態放置。為避免培養液中菌體濃度過高，需將培養液進行 _處理。為了排除 _ ，需設置接種等量無菌水的培養基作為空白對照。（3）_ 為了篩選出菌株，可將適量的試劑滴加在平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現象是 _，則說明此種菌能夠分泌脂肪酶。（4）_純化菌種時，為了得到菌落，可采用法接種于新的培養基平板上。（5）_ 實驗操作應在酒精燈火焰附

2、近進行的原因： _。解析：（1）欲篩選出能降解豆油的菌株，培養基中應只含有豆油而無其他碳源，不能降解豆 油的細菌在此培養基上不能生存，從功能上講，這類培養基屬于選擇培養基。（2）為避免培養皿污染，需將培養皿呈倒置狀態放置。為避免培養液中菌體濃度過高，需將培養液進行梯度稀釋處理。為了排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，需設置接種等量無菌水的培養基作為空白對照。（3）由于脂肪遇蘇丹”試劑會出現紅色，所以為了篩選出菌株，可將適 量的蘇丹W試劑滴加在平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現象是出現透明圈、不出現紅色圈，則說明此種菌能夠分泌脂肪酶。（4）分離純化菌種時，需采用平板劃線法接種于新

3、的培養基以得到單菌落。（5）實驗操作應在酒精燈火焰附近進行，從而避免周圍環境中微生物的污染。答案:（1）豆油 選擇（2）倒置 系列稀釋（或梯度稀釋）實驗組中非測試因素對實驗結果 的影響（培養基被污染）（3）蘇丹W（或蘇丹川）出現透明圈（不出現紅色圈或橘黃色圈）平板劃線（5）避免周圍環境中微生物的污染2利用微生物轉化膽固醇在醫藥生產上有重要作用。實驗人員從土壤中篩選膽固醇轉化菌株的過程如圖所示。請分析回答下列問題:（1）實驗人員將土壤樣品接種到富集培養液中培養時，需要將其置于搖床上不斷振蕩，其主要的作用有_。（2）培養一段時間后，從中取適量培養液轉移接種到選擇培養液中培養36 h 后，再轉移到相

4、同的選擇培養液中培養。與培養液不同，培養液成分的主要特點是_C在相同的培養液中轉移培養主要是為了避免原培養液中 _ 的干擾，同時，又可以（3）_ 從中取適量的培養液涂布到之前， 需要 ，涂布前需將涂布器 _。（4）_ 根據中菌落的形態特征，選取所需的菌種接種到 _ 培養基中臨時保藏。解析：（1）分解膽固醇的微生物屬于需氧型微生物，所以將土壤樣品接種到富集培養液中 培養時，需要將其置于搖床上不斷振蕩以增加溶解氧。（2）據圖分析，培養液的作用是選擇培養，篩選膽固醇轉化菌株需要使用以膽固醇為唯一碳源的選擇培養基。在相同的培養液中轉移培養主要是為了避免原培養液中碳源的干擾，又可以篩選純化獲得可轉化膽固

5、醇的菌種。（3）選擇培養后的培養液需要進行梯度稀釋才能進行涂布培養，涂布前需將涂布 器在酒精燈火焰上進行灼燒滅菌并冷卻。（4）篩選出目的菌株后，將菌種接種到培養基中臨時斜面保藏。答案：（1）增加溶解氧（2）以膽固醇為唯一碳源 碳源 篩選純化獲得可轉化膽固醇的菌種（3）梯度稀釋 灼燒并冷卻（4）斜面3莠去津是一種含氮農藥，在土壤中不易降解，為修復被其污染的土壤，可按下面程序選育能降解莠去津的細菌（目的菌）。請據圖回答：（已知莠去津在水中溶解度低，含過量莠去津的固體培養基不透明）上里稅出淒適亢條件下.廉瑚培養適芳時間（1）_ 由圖推斷，從 A 瓶到 C 瓶液體培養的過程稱為 _ ，目的是 _。（2

6、）_在將 C 瓶菌種接種到固體培養基之前通常要進行 _，將菌種接種到固體培養基的方法有平板劃線法和 _ 法，從圖中看本實驗采用的是 _ （填“前者”或“后者”）。（3）一段時間后，培養基出現無透明圈和有透明圈兩種菌落，我們篩選的目的菌是_菌落中的細菌，該菌落生長所需的氮元素主要來源于 _。（4）為弄清固體培養基中的非目的菌來自C 瓶菌種還是培養基，應如何設置對照組？解析：（1）圖中從 A 瓶到 C 瓶液體培養過程為選擇培養，目的是初步選擇能降解莠去津的細菌（目的菌）并增加其數量。（2）將菌種接種到固體培養基的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種，由圖中固體培養基上的菌落分布比較均勻可知，該接種

7、方法是稀釋涂布平板法，包括梯度稀釋操作和涂布平板操作。（3）根據題目信息“莠去津在水中溶解度低，含過量莠去津的固體培養基不透明”可知，能夠降解莠去津的目的菌分解莠去津，使菌落周圍出現透明圈，因此可以選擇菌落周圍存在透明圈的細菌。由于培養基中只有莠去津一種氮源，因此分解莠去津的微生物所需的氮源主要由莠去津提供。（4）為弄清固體培養基中的非目的菌來自 C 瓶菌種還是培養基，應設置火菌后不接種菌種的空白培養基，與實驗組放在相冋條件下培養，若培養基上無菌落出現，則非目的菌一定來自 C 瓶菌種，若培養基上出現菌落，則說明非目的菌可能來自培養基。答案：（1）選擇培養 初步選擇能降解莠去津的細菌（目的菌）并

8、增加其數量（2）梯度稀釋稀釋涂布平板 后者（3）有透明圈莠去津（4）配制的培養基滅菌后不接種菌種，與實驗組放在相同條件下培養4高溫淀粉酶在大規模工業生產中是極為重要的酶制劑。研究者從熱泉中篩選出了能高效 產生高溫淀粉酶的嗜熱菌。其篩選過程如圖所示。嚴挑出菌落、go4眇4【號培1號培養基 養基（1）進行過程的目的是 _ 嗜熱菌培養液；過程所使用的接種方法是 _。i、n號培養基配制和滅菌時，滅菌與調節pH 的先后順序是 _ ；對培養基常用_ 方法進行滅菌。對于空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變 性，還能_ ,如果要檢測滅菌是否徹底，可以采用的方法是：將滅菌過的培養基在適宜的溫度

9、下放置一段時間， _。（3）部分嗜熱菌在I號培養基上生長時可釋放 _分解培養基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈；應挑出透明圈 _ （填“大”或“小”）的菌落，接種到n號培養基。解析：（1）分析題圖可知，過程是梯度稀釋，目的是對樣品進行稀釋；過程是用稀釋涂 布平板法進行接種。（2）培養基配制和滅菌時應先調節pH,然后再進行滅菌，如果先滅菌再調節 pH 時，又會污染培養基；紫外線對DNA 分子有損傷作用，且能使蛋白質變性，所以常用來作為對空氣滅菌的方法；檢測滅菌效果的方法就是將滅菌過的培養基在適宜的溫度下放 置一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生。（3）能分解淀粉的嗜熱菌在I號培養基上生長時可釋放淀

10、粉酶，分解培養基中的淀粉， 在菌落周圍形成透明圈， 透明圈越大淀粉酶的活性 越強，所以要從中挑出透明圈大的菌落，接種到n號培養基上。答案：（1）稀釋 稀釋涂布平板法（2）先調節 pH,后滅菌 高壓蒸汽滅菌損傷 DNA 的結構觀察培養基上是否有菌落產生（3）淀粉酶大5下表是某公司研發的一種培養大腸桿菌菌群的培養基配方，請根據表格和所學知識回答下列相關問題。成分蛋白胨乳糖蔗糖&HPO指示劑瓊脂含量（g）10.05.05.02.00.212.0傷唏熱菌的樣品將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL（1）從生態系統的成分上看，大腸桿菌屬于(2) 若根據用途劃分，該培養基屬于 _ (填“

11、選擇”或“鑒別”)培養基。若要用上述培養基來篩選出土壤中的尿素分解菌，培養基的營養成分必需怎樣更改？_ ，并用_作為指示劑。(3) 在微生物培養的過程中，為防止雜菌污染，需要對培養基和培養皿進行_ ;操作者的雙手需要進行清洗和 _ 。(4) 圖 1 和圖 2 是培養某細菌的結果圖，其對應的接種方法分別是：_ 和_ ，這兩種方法接種后培養基上都可以得到由單個細胞繁殖所形成的。 圖 1 所用的接種方法可用來對活菌進行計數。此外，測定微生物數目的另一種方法是。(5)以下過程中所利用的主要微生物的細胞結構與大腸桿菌較相似的有_ 。A.制作果酒B.由果酒制作果醋C.制作泡菜D.制作腐乳解析：(1)大腸桿菌只能從環境中攝取有機物，不能自己合成有機物，屬于分解者。(2)該培養基中含有指示劑， 屬于鑒別培養基。尿素分解菌可以分解尿素，而其他微生物不能，因此可將培養基中的蛋白胨改為尿素用于篩選土壤中的尿素分解菌，并用酚紅作為指示劑，尿素分解菌分解尿素產生了NH，可使酚紅變紅。(3)培養微生物時，培養基和培養皿需要滅菌，操作者雙手