1、十六、抗體類藥物分析十六、抗體類藥物分析v截至截至2014年底，全球已批準(zhǔn)上市的單抗藥物年底，全球已批準(zhǔn)上市的單抗藥物一共有一共有50余種，進入臨床試驗階段的單抗藥余種，進入臨床試驗階段的單抗藥物則接近物則接近500多種，治療范圍涵蓋腫瘤、自多種，治療范圍涵蓋腫瘤、自體免疫疾病、治療器官移植排斥反應(yīng)、抗感染體免疫疾病、治療器官移植排斥反應(yīng)、抗感染、止血、呼吸道疾病等，其中又以腫瘤和自體、止血、呼吸道疾病等，其中又以腫瘤和自體免疫疾病藥物市場最大，種類最多。免疫疾病藥物市場最大，種類最多。v在全球已批準(zhǔn)上市的單抗藥物中，抗腫瘤藥物在全球已批準(zhǔn)上市的單抗藥物中，抗腫瘤藥物占占42.5%，免疫性疾病

2、藥物占，免疫性疾病藥物占32.5%，器官，器官移植藥物占移植藥物占7.5%，心血管疾病藥物占，心血管疾病藥物占7.5%，感染性疾病藥物占，感染性疾病藥物占2.5%，其他藥物占，其他藥物占7.5%。v（1）理化性質(zhì)研究v分子量：常用質(zhì)譜法和還原性SDS-PAGE方法檢測抗體整體分子量和重鏈、輕鏈分子量，并與理論值比較。v肽譜：一級序列確證，關(guān)注覆蓋率/檢出率的分析；C-端氨基酸檢測。v氨基酸含量測定：應(yīng)分析測量結(jié)果與理論值比對結(jié)果。v鑒別：通常采用免疫印跡法。vN-端氨基酸檢測：需要說明和理論序列是否一致。v糖基化修飾研究：糖類含量（還原性CE-SDS）、結(jié)構(gòu)、寡糖形態(tài)（CE-Glycan）和糖

3、基化位點（LC-MS肽譜法）等。檢測方法常是多種方法聯(lián)用。v等電點：常采用等電聚焦法。不能僅以等電點范圍為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，需明確主區(qū)帶位置。vC端Lys異質(zhì)性：結(jié)合等電點研究說明異質(zhì)性。v其他高級結(jié)構(gòu)方法：二硫鍵：采用肽譜分析（還原和非還原條件下）質(zhì)譜測定法。需說明二硫鍵形成位置和數(shù)量。圓二色譜分析：拉曼光譜法、熒光及差示掃描量熱法（DSC）、紅外光譜法等。v（2）生物學(xué)活性v功能性生物活性測定：細(xì)胞生長抑制實驗。v結(jié)合活性：ELISA法進行抗原抗體結(jié)合力測定。v親和力：用Biacore方法測定單抗的親和常數(shù)或相對親和力。v（3）純度和雜質(zhì)分析v純度：還原/非還原性SDS-PAGE，可用CE-SDS取代。v產(chǎn)品相關(guān)質(zhì)質(zhì)：常采用非還原性SDS-PAGE和SEC檢測產(chǎn)品中聚合物，相關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物的種類和含量。采用離子交換色譜或成像毛細(xì)管凝膠電泳檢測電荷異質(zhì)性。v工藝相關(guān)雜質(zhì)：殘留DNA、殘留CHOP、蛋白A殘留以及工藝中用到的對人體有害的有機溶劑和其他添加物。v（4）與原研藥的可比性研究。一致性分析一致性分析v鑒別v糖基化修飾分析v分析糖基化的類型和比例：分析糖基化的類型和比例：v一些糖型一些糖型比如比如NGNA（唾液酸的唾液酸的N-羥乙?；u乙酰基神經(jīng)氨酸的同分異構(gòu)體）具有免疫原性；神經(jīng)氨酸的同分異構(gòu)體）具有免疫原性；v高甘露糖型會影響藥代，降低血漿清