1、整理ppt第五章第五章 常用生物化學檢常用生物化學檢驗技術驗技術第一節第一節 光譜分析技術光譜分析技術第二節第二節 電化學分析電化學分析第三節第三節 電泳技術電泳技術第四節第四節 層析技術層析技術第五節第五節 自動生化分析自動生化分析 技術技術整理ppt 光譜分析技術是根據物質吸收或發光譜分析技術是根據物質吸收或發射輻射能而建立起來的一類分析方法，射輻射能而建立起來的一類分析方法，因不同分子的原子和原子團，其發射光因不同分子的原子和原子團，其發射光譜和吸收光譜不同，而相同的物質在一譜和吸收光譜不同，而相同的物質在一定條件下，其發射光譜和吸收光譜的強定條件下，其發射光譜和吸收光譜的強度與該物質的

2、含量成正比關系。因此可度與該物質的含量成正比關系。因此可對物質進行定性和定量分析，此類技術對物質進行定性和定量分析，此類技術稱為光譜分析技術。稱為光譜分析技術。整理ppt 光譜分析技術是一種最常用的生化檢光譜分析技術是一種最常用的生化檢驗技術，它主要包括：驗技術，它主要包括： 吸收光譜分析：吸收光譜分析：可見、紫外、紅外分可見、紫外、紅外分光光度法和原子吸收分光光度法光光度法和原子吸收分光光度法 散射光譜分析：散射光譜分析：散射比濁法和透射比散射比濁法和透射比濁法濁法 發射光譜分析：發射光譜分析：火焰光度法、原子發火焰光度法、原子發射光譜法和熒光光譜法射光譜法和熒光光譜法 整理ppt 光是一種

3、高速傳播的電磁波，光的波長光是一種高速傳播的電磁波，光的波長（）的常用單位是納米（）的常用單位是納米（nm），可見光波長），可見光波長400760nm，400nm稱為紫外光，稱為紫外光，760nm稱為紅外光，波長愈短，能量愈大。稱為紅外光，波長愈短，能量愈大。 可見、紫外吸收光譜是由于多原子分子的可見、紫外吸收光譜是由于多原子分子的價電子在電磁輻射的作用下，由基態躍遷到激價電子在電磁輻射的作用下，由基態躍遷到激發態，這種因物質分子對輻射能的選擇性吸收發態，這種因物質分子對輻射能的選擇性吸收而得到的光譜稱為而得到的光譜稱為吸收光譜吸收光譜。第一節第一節 吸收光譜分析吸收光譜分析整理ppt 吸收光

4、譜分析法包括可見、紫外、紅吸收光譜分析法包括可見、紫外、紅外和原子吸收分析法。其中最常用的是可外和原子吸收分析法。其中最常用的是可見光分析法，也被不嚴格地稱為比色分析見光分析法，也被不嚴格地稱為比色分析法，準確的名稱應是可見光分光光度法。法，準確的名稱應是可見光分光光度法。 用于比色分析的光源與被測溶液的顏用于比色分析的光源與被測溶液的顏色應為互補色。色應為互補色。整理ppt 可見、紫外吸收光譜用于定量分析的依可見、紫外吸收光譜用于定量分析的依據是據是光吸收定律光吸收定律，即，即Lambert-Beer定律定律，它，它是吸收光譜法的基本定律。是吸收光譜法的基本定律。整理ppt 一、一、Lamb

5、ert-Beer定律定律 1. Lambert定律定律 當一束強度為當一束強度為Io的單色光的單色光透過某種吸光溶液后，由于溶液吸收了一部分光，透過某種吸光溶液后，由于溶液吸收了一部分光，則透過的光線為則透過的光線為It。當。當溶液濃度不變溶液濃度不變時，透過的時，透過的液層愈厚，則光線強度的減弱愈顯著。液層愈厚，則光線強度的減弱愈顯著。ItI0整理ppt 用數學式表示為：用數學式表示為： 透光度隨溶液厚度增加而減少，其關系透光度隨溶液厚度增加而減少，其關系是是透光度的負對數（透光度的負對數（lgT，吸光度，吸光度A）與溶）與溶液厚度成正比液厚度成正比，即，即0tIIT透光度透光度LKIIII

6、TAt00t lglglg整理ppt 2. Beer定律定律 當一束強度為當一束強度為Io的單色的單色光透過某種吸光溶液后，若光透過某種吸光溶液后，若液層厚度不變液層厚度不變，而濃度不同時，溶液的濃度愈大，則透過而濃度不同時，溶液的濃度愈大，則透過光的強度愈弱，其定量關系光的強度愈弱，其定量關系A=KC。 當液層厚度不變時，吸光度與溶液濃當液層厚度不變時，吸光度與溶液濃度成正比，這就是度成正比，這就是Beer定律。定律。整理ppt 3. Lambert-Beer定律定律 合并合并Lambert定律與定律與Beer定律可得定律可得 A=KLC 說明吸光物質對單色光吸收的強度與物質的說明吸光物質對

7、單色光吸收的強度與物質的濃度和液層厚度成正比。濃度和液層厚度成正比。 吸光系數吸光系數K的物理意義是的物理意義是吸光物質在單位濃吸光物質在單位濃度及單位厚度時的吸光度度及單位厚度時的吸光度，在給定條件下（波長、，在給定條件下（波長、溶液性質、濃度）吸光系數是物質的特征常數，溶液性質、濃度）吸光系數是物質的特征常數，K值愈大，能測定的濃度值愈大，能測定的濃度C愈小，則靈敏度愈高。愈小，則靈敏度愈高。整理ppt 二、比色分析儀器二、比色分析儀器 即可見光分光光度計，各類分光光度計即可見光分光光度計，各類分光光度計的結構和原理基本相同，一般包括光源、單色的結構和原理基本相同，一般包括光源、單色器、吸

8、收池、檢測器和顯色器五大部分。器、吸收池、檢測器和顯色器五大部分。 1. 光源光源 可見光常用鎢燈，現用鹵鎢燈；可見光常用鎢燈，現用鹵鎢燈；紫外光常用氫燈。紫外光常用氫燈。 2. 單色器單色器 可用濾光片、棱鏡、光柵。可用濾光片、棱鏡、光柵。 3. 吸收池吸收池 (比色杯比色杯) 4. 檢測器檢測器 光電管或光電倍增管光電管或光電倍增管 5. 顯示器顯示器 指針式或數字式指針式或數字式整理ppt 三、比色分析的特點三、比色分析的特點 1. 靈敏度高靈敏度高 被測定物質的最低濃度被測定物質的最低濃度一般為一般為105106mol/L。 2. 測定快速、簡便。測定快速、簡便。 3. 應用范圍廣應用

9、范圍廣 一些無色物質在一定一些無色物質在一定條件下與顯色劑反應，可生成有色物質。條件下與顯色劑反應，可生成有色物質。整理ppt四、比色分析的定量方法四、比色分析的定量方法 （一）對比法（一）對比法 又稱標準對比法，通常在測定未知濃又稱標準對比法，通常在測定未知濃度樣品的同時，測定一已知濃度的標準液度樣品的同時，測定一已知濃度的標準液作比較，然后分別測定兩者的吸光度。作比較，然后分別測定兩者的吸光度。 AS=KLSCS AR=KLRCR整理ppt 因測定成分相同，故因測定成分相同，故K值相同，比色時用值相同，比色時用同樣規格的比色皿故同樣規格的比色皿故LS=LR，所以比色分析中，所以比色分析中測

10、定標準液與未知液吸光度的比值也就等于其測定標準液與未知液吸光度的比值也就等于其濃度的比值，即濃度的比值，即若標準液與樣品用量不等時，則再乘若標準液與樣品用量不等時，則再乘 。 用對比法進行定量時，為了減少誤差，選用對比法進行定量時，為了減少誤差，選用標準液濃度應盡可能接近待測樣品濃度。用標準液濃度應盡可能接近待測樣品濃度。RSRSCCAA SSRRCAAC RSVV整理ppt （二）標準曲線法（二）標準曲線法 配制一系列濃度不同的標準液，按一配制一系列濃度不同的標準液，按一定操作方法顯色后，用選定的波長分別測定操作方法顯色后，用選定的波長分別測定它們的吸光度，然后以吸光度為縱坐標，定它們的吸光

11、度，然后以吸光度為縱坐標，標準液濃度為橫坐標，在坐標紙上標出各標準液濃度為橫坐標，在坐標紙上標出各坐標點，通過連接各點，使其成一直線，坐標點，通過連接各點，使其成一直線，即即A-C曲線。曲線。整理pptA0.60.50.40.30.20.1 2 4 6 8 10 12 C整理ppt 注意事項注意事項 1. 測定條件發生變化時（如更換標準品測定條件發生變化時（如更換標準品和試劑等），應重新繪制。和試劑等），應重新繪制。 2. 標準品應有高的純度，標準液的配制標準品應有高的純度，標準液的配制應準確。應準確。 3. 當待測液吸光度超過線性范圍時，應當待測液吸光度超過線性范圍時，應將標本稀釋后再測定。

12、將標本稀釋后再測定。 4. 標本測定的條件應和標準曲線制作時標本測定的條件應和標準曲線制作時的條件完全一致。的條件完全一致。整理ppt 用波長用波長200400nm的紫外光譜測定無的紫外光譜測定無色物質的方法稱為紫外分光光度法色物質的方法稱為紫外分光光度法。芳香族。芳香族類及含有共軛雙鍵的烯烴、炔烴等不飽和烴類及含有共軛雙鍵的烯烴、炔烴等不飽和烴類，在類，在200400nm波長范圍具備光吸收特性，波長范圍具備光吸收特性，故不需經顯色反應就能直接利用紫外分光光故不需經顯色反應就能直接利用紫外分光光度法測定，其選擇性和靈敏度均高于比色分度法測定，其選擇性和靈敏度均高于比色分析法。析法。整理ppt

13、（一）單組分測定原理（一）單組分測定原理 其基本原理與可見分光光度法相同，除可其基本原理與可見分光光度法相同，除可采用前述的標準曲線法和對比法外，還可采用：采用前述的標準曲線法和對比法外，還可采用： 1. 吸光系數法吸光系數法 對于對于單一組分的純物質單一組分的純物質，只要已知其摩爾吸光系數，測得吸光度（只要已知其摩爾吸光系數，測得吸光度（A）后，可直接按下列公式計算物質的濃度。后，可直接按下列公式計算物質的濃度。被測物體積被測物體積反應體系總體積反應體系總體積 LAC 整理ppt 例：例：已知維生素已知維生素B12的水溶液在的水溶液在361nm波波長處的長處的為為28056，2ml維生素維生

14、素B12的水溶液用蒸的水溶液用蒸餾水稀釋到餾水稀釋到4ml，用，用1cm比色杯測得溶液的吸比色杯測得溶液的吸光度為光度為0.414，求該維生素，求該維生素B12水溶液的濃度。水溶液的濃度。Lmol10952241280564140LAC5/. 被測物體積被測物體積反應體系總體積反應體系總體積 整理ppt （二）多組分混合物的測定原理（二）多組分混合物的測定原理 多組分指同一試樣中含兩種或兩種以多組分指同一試樣中含兩種或兩種以上待測組分，測定時可根據各組分吸收光上待測組分，測定時可根據各組分吸收光譜的重疊程度來確定定量方法。譜的重疊程度來確定定量方法。 1. 各組分吸收峰不相互重疊各組分吸收峰不

15、相互重疊 按單組分測定方法按單組分測定方法 2. 各組分吸收峰相互重疊各組分吸收峰相互重疊 可采用解聯立方程法，等收吸雙波長可采用解聯立方程法，等收吸雙波長法、系數光譜法。法、系數光譜法。整理ppt （一）火焰光度法（一）火焰光度法 是利用火焰使金屬元素激發，能發射出是利用火焰使金屬元素激發，能發射出特征譜線的特點進行測定的一種方法。特征譜線的特點進行測定的一種方法。 1.基本原理基本原理 某些金屬元素的基態原子某些金屬元素的基態原子受到火焰激發后，其外層電子獲得能量而從受到火焰激發后，其外層電子獲得能量而從基點躍遷到激發態，接著它們又以發射光譜基點躍遷到激發態，接著它們又以發射光譜的形式釋放

16、出所獲得的能量，而返回基態，的形式釋放出所獲得的能量，而返回基態，在相同條件下，同一元素所釋放的單位能量在相同條件下，同一元素所釋放的單位能量相同，故能形成固定光譜。相同，故能形成固定光譜。整理ppt 如如鈉鈉發射光譜波長發射光譜波長589nm，鉀鉀發射光譜波發射光譜波長長767nm。 由于火焰供給的能量不強，由于火焰供給的能量不強，只能激發只能激發堿堿金屬金屬和和堿土金屬堿土金屬元素元素，生化檢驗中常用于鉀、，生化檢驗中常用于鉀、鈉的測定。鈉的測定。 元素的發射譜線強度與該元素濃度的關元素的發射譜線強度與該元素濃度的關系可表示為系可表示為I=acb a是與試樣組成，激發溫度，激發電位有是與試

17、樣組成，激發溫度，激發電位有關的關的常數常數，b為為自吸收系數自吸收系數，當濃度很低時，當濃度很低時，b1，所以上式可寫成，所以上式可寫成I=ac，即發射譜線強度，即發射譜線強度與測定元素濃度成正比。與測定元素濃度成正比。整理ppt 2.干擾因素干擾因素 （1）共存元素的干擾）共存元素的干擾 共存元素產生的輻射干擾共存元素產生的輻射干擾 由于火焰由于火焰使標本中其他元素激發，當發射時光譜接近，使標本中其他元素激發，當發射時光譜接近，甚至重疊時，可產生干擾，引起誤差，如鈣甚至重疊時，可產生干擾，引起誤差，如鈣對鋰、鈉的測定干擾明顯。對鋰、鈉的測定干擾明顯。 陽離子的干擾陽離子的干擾 主要是通過對

18、待測陽主要是通過對待測陽離子的電離度產生影響，造成發射時強度的離子的電離度產生影響，造成發射時強度的改變。改變。整理ppt 陰離子的干擾陰離子的干擾 因陰離子可與某些因陰離子可與某些被測陽離子在火焰溫度下形成僅能緩慢蒸被測陽離子在火焰溫度下形成僅能緩慢蒸發的化合物而抑制了原子激發，一般用釋發的化合物而抑制了原子激發，一般用釋放劑來消除干擾，與干擾陰離子牢固結合。放劑來消除干擾，與干擾陰離子牢固結合。 （2）火焰對測定的影響）火焰對測定的影響 火焰是激發光源，火焰的純度和燃燒火焰是激發光源，火焰的純度和燃燒狀態，穩定性，可直接影響分析結果的準狀態，穩定性，可直接影響分析結果的準確度，因此，要求所

19、用燃料燃燒時火焰背確度，因此，要求所用燃料燃燒時火焰背景色淺，溫度高，無雜色。景色淺，溫度高，無雜色。整理ppt （3 3）標準品的影響標準品的影響 由于生物樣品中成分復雜，定量測由于生物樣品中成分復雜，定量測定中會互相干擾影響測定的準確性，所定中會互相干擾影響測定的準確性，所以，如果以單純的被測物質預制標準液以，如果以單純的被測物質預制標準液則與血清樣品的結果相差甚遠，故應使則與血清樣品的結果相差甚遠，故應使用血清作為標準以消除影響。用血清作為標準以消除影響。整理ppt （二）原子吸收分光光度法（二）原子吸收分光光度法 1. 基本原理基本原理 待測元素經原子蒸氣發生待測元素經原子蒸氣發生器轉

20、化成氣態原子（處于基態），由空心陰極器轉化成氣態原子（處于基態），由空心陰極燈提供的待測元素的共振線經過待測元素的蒸燈提供的待測元素的共振線經過待測元素的蒸氣，共振輻射強度被蒸氣中待測元素的基態原氣，共振輻射強度被蒸氣中待測元素的基態原子吸收而減弱，其吸收規律遵循子吸收而減弱，其吸收規律遵循Beer定律。定律。 共振線：共振線：電子從基態躍遷至第一電子激發電子從基態躍遷至第一電子激發態的最低振動能級所吸收的譜線為共振吸收線態的最低振動能級所吸收的譜線為共振吸收線。簡稱為共振線。簡稱為共振線。整理ppt 2. 應用應用 在醫學檢驗中主要用于體液、在醫學檢驗中主要用于體液、毛發、指甲等組織鈣、鎂、

21、鐵、鈉、鋅、鋁、毛發、指甲等組織鈣、鎂、鐵、鈉、鋅、鋁、汞、鉛、砷等多種元素的測定。汞、鉛、砷等多種元素的測定。 優點：優點： 選擇性好選擇性好 受干擾少，原子吸收是光的受干擾少，原子吸收是光的窄帶吸收，僅窄帶吸收，僅0.0010.01nm，而分子對光的吸，而分子對光的吸收是寬帶吸收，達幾個收是寬帶吸收，達幾個nm。 靈敏度高靈敏度高 能測定能測定109106g的元素。的元素。 測定快速、簡便測定快速、簡便 應用范圍廣應用范圍廣 只需更換不同空心陰極燈，只需更換不同空心陰極燈，儀器昂貴。儀器昂貴。整理ppt （三）熒光分析法（三）熒光分析法 利用某些物質光致發光的特性，籍此對物利用某些物質光致

22、發光的特性，籍此對物質進行定性，定量分析的方法。質進行定性，定量分析的方法。 1.基本原理基本原理 某些物質的分子吸收了光某些物質的分子吸收了光能，從基態躍遷至某一電子激發態中的某一振能，從基態躍遷至某一電子激發態中的某一振動能級，處于激發態的振動能級中的分子通過動能級，處于激發態的振動能級中的分子通過運動或與其他分子的碰撞而將吸收過多的能量運動或與其他分子的碰撞而將吸收過多的能量輸給其他分子，并返回到第一激發態的最低振輸給其他分子，并返回到第一激發態的最低振動能級，同時發射熒光，躍遷到基態發射熒光，動能級，同時發射熒光，躍遷到基態發射熒光，在一定濃度范圍內，其熒光強度與溶液濃度呈在一定濃度范

23、圍內，其熒光強度與溶液濃度呈線性關系。線性關系。整理ppt 2.影響熒光強度的因素影響熒光強度的因素 （1）溶劑）溶劑 增大溶劑的極性，可時電子增大溶劑的極性，可時電子躍遷的能量降低，熒光增強。躍遷的能量降低，熒光增強。 （2）溫度、）溫度、pH T分子碰撞頻率分子碰撞頻率，因此熒光強度隨溫度升高而減弱。因此熒光強度隨溫度升高而減弱。pH可影可影響化合物電離或使熒光物質水解，如苯胺響化合物電離或使熒光物質水解，如苯胺在在pH712溶液中主要以分子形式存在，產溶液中主要以分子形式存在，產生藍色熒光，而在生藍色熒光，而在pH13的溶液中以的溶液中以離子形式存在，不能產生熒光。離子形式存在，不能產生

24、熒光。整理ppt （3）激發光和發射光）激發光和發射光 在定量測定時，在定量測定時，一般應選擇熒光物質的一般應選擇熒光物質的最大激發波長最大激發波長（ex）和和最大熒光波長最大熒光波長（em），但有些熒光物質，但有些熒光物質化學性質不穩定，受激發光照射后易分解，化學性質不穩定，受激發光照射后易分解，縮短樣品照射時間，改變激發光波長。縮短樣品照射時間，改變激發光波長。 （4）物質濃度的影響）物質濃度的影響 熒光分析品適合熒光分析品適合稀溶液，因稀溶液，因熒光物質濃度高，分子間碰撞增熒光物質濃度高，分子間碰撞增加，使熒光強度減弱，這種現象稱為自熄滅加，使熒光強度減弱，這種現象稱為自熄滅，自熄滅現象

25、隨濃度增加而增強。自熄滅現象隨濃度增加而增強。整理ppt 3. 儀器與測定方法儀器與測定方法 作為熒光分析的作為熒光分析的儀器有光電熒光計和熒光分光光度計儀器有光電熒光計和熒光分光光度計 光電熒光計的結構與光電比色計很相光電熒光計的結構與光電比色計很相似，不同之處是檢測器與光線成直角，并似，不同之處是檢測器與光線成直角，并多一塊濾光片。多一塊濾光片。 如濾光片改為棱鏡或光珊作單色器，如濾光片改為棱鏡或光珊作單色器，就和可見紫外發光光度計相似而成熒光分就和可見紫外發光光度計相似而成熒光分光光度計。光光度計。整理ppt儀器的組成部件的比儀器的組成部件的比 光源光源 單色器單色器 測定池測定池 光敏

26、元件光敏元件 檢測器檢測器光電比色計光電比色計 鎢燈鎢燈 濾光片濾光片 玻璃玻璃 光電池光電池 檢流計檢流計 (二面透光二面透光) 光電管光電管光電熒光計光電熒光計 鹵鎢燈鹵鎢燈 濾光片濾光片 玻璃玻璃 光電管光電管 檢流計檢流計 (300700nm)兩塊兩塊 (四面透光四面透光) 檢流計檢流計可見紫外可見紫外 鎢燈鎢燈 光柵或棱鏡光柵或棱鏡分光光度計分光光度計 (400760nm) 玻璃玻璃 光電管光電管 檢流計檢流計 氫燈氫燈 石英石英 光電倍增管光電倍增管 自動記錄自動記錄 (200400nm)熒光分光熒光分光 氙弧燈氙弧燈 光柵或棱鏡光柵或棱鏡 玻璃玻璃 光電倍增管光電倍增管 自動記錄

27、自動記錄光度計光度計 (200700nm) 石英石英氙弧燈發射的強烈紫外線對人眼有害。氙弧燈發射的強烈紫外線對人眼有害。整理ppt 熒光分析優點：熒光分析優點： 靈敏度高靈敏度高 比可見紫外吸收光譜高比可見紫外吸收光譜高103104倍。倍。 特異性強特異性強 通過選擇合適的激發光通過選擇合適的激發光波長和熒光波長可避開其它物質干擾。波長和熒光波長可避開其它物質干擾。 操作簡便、快速、重現性好操作簡便、快速、重現性好 樣品用量少樣品用量少整理ppt 不足之處：不足之處： 應用范圍有一定局限性應用范圍有一定局限性，因許多物，因許多物質不能產生熒光。質不能產生熒光。 對測定條件要求嚴格對測定條件要求

28、嚴格，如試劑、溶，如試劑、溶劑不應含有熒光物質。劑不應含有熒光物質。 儀器價格較貴儀器價格較貴 熒光分析法在醫學檢驗中可用于測定熒光分析法在醫學檢驗中可用于測定類固醇激素（腎上腺皮質激素）及代謝產類固醇激素（腎上腺皮質激素）及代謝產物，單胺類神經遞質（兒茶酚胺，物，單胺類神經遞質（兒茶酚胺，5-HT）某些維生素（某些維生素（VitA，B族）。族）。整理ppt 電化學分析是一種以溶液電化學性質為電化學分析是一種以溶液電化學性質為基礎測定物質含量的分析方法。基礎測定物質含量的分析方法。按測定量的按測定量的電化學參數的不同，可分為電化學參數的不同，可分為電位法電位法、電導法電導法、庫侖法、極譜法和庫

29、侖法、極譜法和伏安法伏安法等，下面主要介紹等，下面主要介紹電位法中的離子選擇電極法。電位法中的離子選擇電極法。 整理ppt 是一種電化學敏感器，它的是一種電化學敏感器，它的電勢與溶液電勢與溶液中給定離子的濃度的對數成線性關系中給定離子的濃度的對數成線性關系，故可，故可以通過簡單的電位測量，直接測以通過簡單的電位測量，直接測 定溶液中離定溶液中離子活度。子活度。 離子濃度與離子活度的關系離子濃度與離子活度的關系 a=f.c 在稀在稀溶液中（溶液中（104mol/L以下）活度系數接近以下）活度系數接近1。（ion selective electode ISE）整理ppt ISE分析法的優點：分析法

30、的優點： 1. 是一種直接的非破壞性分析方法是一種直接的非破壞性分析方法，可，可反復進行，不受樣品溶液顏色、渾濁等因素的反復進行，不受樣品溶液顏色、渾濁等因素的干擾。干擾。 2. 分析速度快分析速度快，單次分析通常只，單次分析通常只12min 3. 測量范圍寬測量范圍寬，45個數量級個數量級 4. 操作簡便操作簡便 5. 測量特定離子活度測量特定離子活度，對臨床醫學和基，對臨床醫學和基礎醫學更有實用意義礎醫學更有實用意義整理ppt ISE大都大都屬于膜電極屬于膜電極，膜中含有與待測，膜中含有與待測離子相同的離子。膜的內表面與具有相同離離子相同的離子。膜的內表面與具有相同離子的固定濃度溶液接觸，

31、其中插入一內參比子的固定濃度溶液接觸，其中插入一內參比電極，當膜的外表面與待測離子溶液接觸時，電極，當膜的外表面與待測離子溶液接觸時，引起膜電位的改變。由于電極膜材料、制備引起膜電位的改變。由于電極膜材料、制備方法不同，使電板的穩定性、選擇性和靈敏方法不同，使電板的穩定性、選擇性和靈敏度也不同。度也不同。整理ppt 膜電位的產生：膜電位的產生：將電極插入待測離子溶將電極插入待測離子溶液中時，由于離子的交換和擴散作用，改變液中時，由于離子的交換和擴散作用，改變了兩相中原有的電荷分布，因而存在一定的了兩相中原有的電荷分布，因而存在一定的電位差，因為內充溶液中有關離子的濃度恒電位差，因為內充溶液中有

32、關離子的濃度恒定，內參比電極的電位固定，所以定，內參比電極的電位固定，所以ISE的電的電位（位（E）只隨離子活度不同而改變，其電位）只隨離子活度不同而改變，其電位可用可用Nernst方程式表示。方程式表示。 algnFRT303. 2EE0 整理ppt ISE的的E值不能直接測定，必須將值不能直接測定，必須將ISE與參比電極浸入被測溶液中組成原電池，然與參比電極浸入被測溶液中組成原電池，然后通過電動勢來測定后通過電動勢來測定E值。值。 參比電極：參比電極：是指在溫度、壓力恒定的條是指在溫度、壓力恒定的條件下，當被測溶液離子濃度有所改變時，電件下，當被測溶液離子濃度有所改變時，電極電位保持不變的

33、電極。極電位保持不變的電極。整理ppt離子選擇電極離子選擇電極晶體膜電極晶體膜電極均相膜電極均相膜電極非均相膜電極非均相膜電極剛性基質電極剛性基質電極流動載體電極流動載體電極非晶體膜電極非晶體膜電極基本電極基本電極氣敏電極氣敏電極敏化電極敏化電極酶電極酶電極整理ppt （一）晶體膜電極（一）晶體膜電極 其敏感膜為金屬微溶鹽，經加壓成片，其敏感膜為金屬微溶鹽，經加壓成片，制成單晶、多晶或混晶體電極敏感膜，如氟制成單晶、多晶或混晶體電極敏感膜，如氟電極，其敏感膜為電極，其敏感膜為LaF3單晶片。單晶片。 （二）非晶體膜電極（二）非晶體膜電極 1. 剛性基質電極剛性基質電極 其其敏感膜為玻璃敏感膜為

34、玻璃，故，故稱為玻璃電極。成分一般為稱為玻璃電極。成分一般為Na2O-AI2O3-SiO2改變這三種成分的配合比例，分別制出改變這三種成分的配合比例，分別制出對對Li+、Na+、K+、Ag+的離子選擇電極。的離子選擇電極。整理ppt 2. 流動載體電極流動載體電極 其敏感膜是由溶解在與其敏感膜是由溶解在與水不相混溶的有機溶劑中的離子締合劑或混合水不相混溶的有機溶劑中的離子締合劑或混合劑作為離子交換體，再將此溶液滲透在具有惰劑作為離子交換體，再將此溶液滲透在具有惰性，微孔性和疏水性的塑料薄膜內。性，微孔性和疏水性的塑料薄膜內。 （三）氣敏電極（三）氣敏電極 是基于界面化學反應對氣體敏感的電極，是

35、基于界面化學反應對氣體敏感的電極，它是在一般的離子選擇電極的基礎上，再覆蓋它是在一般的離子選擇電極的基礎上，再覆蓋一層疏水的透氣膜（如聚四氟乙烯），如一層疏水的透氣膜（如聚四氟乙烯），如CO2、NH3電極。電極。整理ppt （四）酶電極（四）酶電極 它由離子敏感膜和覆蓋在表面含有酶的它由離子敏感膜和覆蓋在表面含有酶的酶涂層膠組成，敏感膜對待測物的酶促反應酶涂層膠組成，敏感膜對待測物的酶促反應有選擇性響應，如尿素酶電極。有選擇性響應，如尿素酶電極。整理ppt 1. 響應范圍及檢測下限：響應范圍及檢測下限：響應范圍是響應范圍是指電極對待測離子的響應符合指電極對待測離子的響應符合Nernst式的線式

36、的線性區，此范圍越寬越好，一般在性區，此范圍越寬越好，一般在47個數個數量級之間，檢測量級之間，檢測F限是指能夠檢測被檢離子限是指能夠檢測被檢離子的最低濃度一般在的最低濃度一般在10-510-7mol/L。 2. 選擇性選擇性 是指電極對待測離子和共是指電極對待測離子和共存干擾離子的響應程度的差異。存干擾離子的響應程度的差異。常用選擇常用選擇性系數或選擇比系描述，選擇性系數越小，性系數或選擇比系描述，選擇性系數越小，表示電極選擇性越強。表示電極選擇性越強。整理ppt 3. 響應斜率和轉換系數響應斜率和轉換系數 ISE在在Nevnet響響應范圍內被測離子活度變化應范圍內被測離子活度變化10倍所引

37、起的電報倍所引起的電報電位變化的數值，即響應斜率（電位變化的數值，即響應斜率（S）。）。 從理論上說，從理論上說，但對某一但對某一ISE來說，實際來說，實際S值與理論值與理論S值并不完值并不完全相符，其偏差用轉換系數表示，一般轉換系全相符，其偏差用轉換系數表示，一般轉換系數達到理論值數達到理論值90以上的電極性能較好。以上的電極性能較好。 4. 電極壽命電極壽命 取決于電極制作材料，結構取決于電極制作材料，結構和使用保管情況。和使用保管情況。nFRT303. 2S 整理ppt 1. 標準曲線法標準曲線法 配制一系列不同濃度配制一系列不同濃度標準溶液，測定其電位值標準溶液，測定其電位值Es，繪制

38、，繪制Es-lgc標準曲線，在相同條件下測定樣品溶液電標準曲線，在相同條件下測定樣品溶液電位值位值Ex。 2. 電極校正法電極校正法 用標準溶液校正用標準溶液校正ISE，制成直讀式電儀表。制成直讀式電儀表。整理ppt 1. 電動勢測量電動勢測量，對于，對于一價離子一價離子的響應，的響應，電勢測量每差電勢測量每差1mV引起濃度的相對誤差為引起濃度的相對誤差為4，對于，對于二價離子二價離子則為則為8，因此對于測量，因此對于測量電勢的儀器精度要求達到電勢的儀器精度要求達到0.1mV。 2. 溫度溫度 Nernst公試中的斜率，內參比公試中的斜率，內參比電極的電信號，以及離子活度等都與溫度有電極的電信

39、號，以及離子活度等都與溫度有關，因此在整個測量過程中應保持溫度恒定。關，因此在整個測量過程中應保持溫度恒定。整理ppt 3. pH 溶液溶液pH值可影響被測離子在溶值可影響被測離子在溶液中的存在形式，從而影響相應離子的活度，液中的存在形式，從而影響相應離子的活度，如如LaF3電極測定電極測定F 時，如時，如pH5 ， F則會則會生成生成HF，使結果偏低。，使結果偏低。 4. 滯后效應滯后效應 使用使用ISE若先測濃溶液后，若先測濃溶液后，再測稀溶液時電位平衡緩慢并出現誤差，這再測稀溶液時電位平衡緩慢并出現誤差，這一現象稱為一現象稱為“滯后效應滯后效應”。整理ppt 一、電泳的基本原理一、電泳的

40、基本原理 （一）（一） 電泳的概念電泳的概念 溶液中帶電顆粒在直流電場中向電荷相反溶液中帶電顆粒在直流電場中向電荷相反方向移動的現象稱為電泳。利用電泳現象對物方向移動的現象稱為電泳。利用電泳現象對物質進行分離的技術叫電泳技術。質進行分離的技術叫電泳技術。第三節第三節 電泳技術電泳技術整理ppt 電泳技術的應用始于電泳技術的應用始于1937年，瑞典年，瑞典Tiselius利用界面電泳將血清蛋白質分離成五種成分。利用界面電泳將血清蛋白質分離成五種成分。 1948年年Wieland發明紙電泳，使電泳技術大發明紙電泳，使電泳技術大為簡化。此后，電泳技術發展迅速，特別是電為簡化。此后，電泳技術發展迅速，

41、特別是電泳技術與層析法，免疫學方法的結合，使其分泳技術與層析法，免疫學方法的結合，使其分辨率達到辨率達到 mg/ml水平，成為醫學檢驗的一種重水平，成為醫學檢驗的一種重要分析技術。要分析技術。整理ppt （二）（二） 溶液中粒子的帶電狀態溶液中粒子的帶電狀態 蛋白質分子電離時蛋白質分子電離時有帶正電荷的氨基有帶正電荷的氨基，也，也有電離有電離帶負電荷的羧基帶負電荷的羧基，故蛋白質是一種兩性，故蛋白質是一種兩性電解質。電解質。 在酸性條件下，羧基電離受抑制，在酸性條件下，羧基電離受抑制，NH2 -NH3 + 帶帶正電正電 在堿性條件下，羧基電離增強，在堿性條件下，羧基電離增強，COOH COO

42、帶帶負電負電。整理ppt （三）（三） 電泳遷移率電泳遷移率 指帶電粒子在單位電場強度作用下的指帶電粒子在單位電場強度作用下的電泳速度電泳速度，通常用，通常用表示表示 =V/E V為粒子移動速度（為粒子移動速度（cm/s）E為電場強為電場強度（度（V/cm） 遷移率取決于帶電粒子的性質（粒子遷移率取決于帶電粒子的性質（粒子所帶電量所帶電量Q，粒子大小，粒子大小r形狀）介質粘度形狀）介質粘度，對于球狀分子，根據對于球狀分子，根據Stoke定律定律 V= QE/6r U=Q/6r整理ppt 在實際測定中，電泳速度在實際測定中，電泳速度V以單位時間以單位時間t（秒）（秒）內移動的距離內移動的距離d（

43、厘米）表示（厘米）表示 V=d/t（cm/s） 電場強度電場強度E以單位長度以單位長度I（厘米）上所施加（厘米）上所施加的電勢差的電勢差V（伏特）表示（伏特）表示 E=V/I（V/cm） 故故u=V/E=（d/t）/（V/I） =dI/Vt（cm2 /v.s） 通過測量通過測量d,l,v,t便可計算出顆粒的遷移率。便可計算出顆粒的遷移率。整理ppt 由于不同的帶電粒子其遷移率的不同，因由于不同的帶電粒子其遷移率的不同，因此在同一電場中的移動距離不同，故能將其分此在同一電場中的移動距離不同，故能將其分離，根據公式離，根據公式 d A=V.t/l A d B=V.t/l B A、B移動距離差為移動

44、距離差為 d=( d A d B)=（ d A d B）V.t/l 分離距離與電壓和電泳時間成正比，與支分離距離與電壓和電泳時間成正比，與支持物長度成正比。持物長度成正比。整理ppt 二、二、 電泳的分類和電泳儀電泳的分類和電泳儀 （一）（一） 電泳的分類電泳的分類 1. 根據被分離樣品的多少根據被分離樣品的多少 分析電泳，制分析電泳，制備電泳。備電泳。 2. 根據電泳電壓的高低根據電泳電壓的高低 常壓電泳，高壓常壓電泳，高壓電泳。電泳。 3. 根據是否使用支持介質根據是否使用支持介質 自由電泳，區自由電泳，區帶電泳。帶電泳。 4. 根據電泳系統的組成是否均一根據電泳系統的組成是否均一 連續電

45、連續電泳，不連續電泳。泳，不連續電泳。 整理ppt （二）電泳儀（二）電泳儀 由直流電源和電泳槽兩部分組成。由直流電源和電泳槽兩部分組成。 1、直流電源、直流電源 將交流電源經整流，濾波將交流電源經整流，濾波后獲得。分為后獲得。分為 （1）恒壓電源）恒壓電源 電泳過程中的電壓恒定不電泳過程中的電壓恒定不變。但電泳過程中的熱效應，降低外周電路的變。但電泳過程中的熱效應，降低外周電路的電阻，使電流慢慢增大。電阻，使電流慢慢增大。 （2）恒流電泳）恒流電泳 電泳過程中的電流恒定不電泳過程中的電流恒定不變。用這種電流的輸出電壓可隨外周阻力減少變。用這種電流的輸出電壓可隨外周阻力減少而減少，從而保持電流

46、恒定。而減少，從而保持電流恒定。 （3）恒功率電源）恒功率電源 電泳中輸出功率恒定不電泳中輸出功率恒定不變。主要用于等電聚焦電泳。變。主要用于等電聚焦電泳。 整理ppt 2.電泳槽電泳槽 盛裝緩沖液和進行電泳分析的盛裝緩沖液和進行電泳分析的場所，一般用塑料和有機玻璃制成，它包括電場所，一般用塑料和有機玻璃制成，它包括電極，緩沖液槽，電泳支架，透明蓋組成。電泳極，緩沖液槽，電泳支架，透明蓋組成。電泳槽的外形有水平式，垂直式，圓盤式等多種。槽的外形有水平式，垂直式，圓盤式等多種。 電極應具有良好的導電性，抗腐蝕性和抗電極應具有良好的導電性，抗腐蝕性和抗電解作用。以鉑金材料最為理想，最好貫穿整電解作

47、用。以鉑金材料最為理想，最好貫穿整個緩沖液槽。個緩沖液槽。整理ppt 三、影響電泳的因素三、影響電泳的因素 （一）緩沖液（一）緩沖液 維持電泳介質維持電泳介質pH恒定，并恒定，并起導電作用。起導電作用。 1.組成組成 由弱酸和弱酸鹽組成，常用的有由弱酸和弱酸鹽組成，常用的有磷酸鹽，硼酸鹽，巴比妥鹽和三羥甲基氨基甲磷酸鹽，硼酸鹽，巴比妥鹽和三羥甲基氨基甲烷（烷（Tris）等，其中巴比妥緩沖液用的最多，）等，其中巴比妥緩沖液用的最多，由巴比妥鈉和巴比妥組成。由巴比妥鈉和巴比妥組成。整理ppt 選擇緩沖液時應考慮的因素：選擇緩沖液時應考慮的因素： （1）化學性能穩定，不易水解。）化學性能穩定，不易水

48、解。 （2）緩沖液的）緩沖液的pH應與弱酸的應與弱酸的pK 值接近，有值接近，有較強緩沖能力。較強緩沖能力。 （3）緩沖液中正負離子應有相近的遷移率，）緩沖液中正負離子應有相近的遷移率，避免電暈出現正負離子分布不均。避免電暈出現正負離子分布不均。 （4）緩沖液的離子應該是一價的，多價離子）緩沖液的離子應該是一價的，多價離子有較厚的雙電層，移動性差。有較厚的雙電層，移動性差。 （5）緩沖液的電導率要低，）緩沖液的電導率要低， 避免通電時產生避免通電時產生較多的熱。較多的熱。整理ppt 2.pH 緩沖液緩沖液pH決定了蛋白質的帶電狀態，決定了蛋白質的帶電狀態，電泳時應選擇一個合適電泳時應選擇一個合

49、適pH，使各種蛋白質在這一，使各種蛋白質在這一pH時凈電荷差別最大以利于分離。血清蛋白醋酸時凈電荷差別最大以利于分離。血清蛋白醋酸纖維薄膜電暈常用纖維薄膜電暈常用pH8.6的巴比妥緩沖液。各種蛋的巴比妥緩沖液。各種蛋白質均帶負電荷，電泳時向正極移動。白質均帶負電荷，電泳時向正極移動。 緩沖液緩沖液pH的計算的計算 pH=pKa +lg(鹽鹽/酸酸) 電泳過程水會發生電離。電泳過程水會發生電離。 正極：正極：2OH H2O 1/2O22e pH 負極：負極：2H2eH2 pH 故電泳故電泳24次后應將緩沖液正極交換，減少次后應將緩沖液正極交換，減少這種影響。這種影響。整理ppt 3.離子強度離子

50、強度 是指溶液中各種離子的摩爾濃是指溶液中各種離子的摩爾濃度（度（Ci）與其電荷數平方（）與其電荷數平方（Zi 2）乘積總和的）乘積總和的1/2。即即 I=1/2CiZi 2 I的單位是的單位是mol/L。 如如0.1mol/L NaCL I=0.1mol/L 0.2mol/LMgCL2 I=0.6mol/L 對于緩沖液對于緩沖液I計算，由于弱酸的電離度很低，計算，由于弱酸的電離度很低，一般只計算鹽的。一般只計算鹽的。整理ppt I愈大，緩沖能力越大，愈大，緩沖能力越大，pH越穩定越穩定，但緩，但緩沖液所載分電流增加，樣品所栽的電流減少，沖液所載分電流增加，樣品所栽的電流減少，電泳速度減慢，導

51、電能力增加，產熱增加。電泳速度減慢，導電能力增加，產熱增加。 I過小，緩沖能力小，過小，緩沖能力小，pH不穩定不穩定，緩沖液，緩沖液所載分電流減少，樣品所載分電流增加，緩沖所載分電流減少，樣品所載分電流增加，緩沖液粘度系數降低，電泳速度加快。但樣品在支液粘度系數降低，電泳速度加快。但樣品在支持物上擴散嚴重，分辨率降低。持物上擴散嚴重，分辨率降低。 兼顧兩方面的影響，兼顧兩方面的影響，一般在一般在0.050.1 mol/L。整理ppt （二）支持介質（二）支持介質 對支持介質的基本要求是對支持介質的基本要求是具有化學惰性，不與被分離的樣品或緩沖液起具有化學惰性，不與被分離的樣品或緩沖液起化學反應

52、，并具有一定的堅韌度。化學反應，并具有一定的堅韌度。 1.吸附吸附 使被分離樣品滯留，而降低電泳使被分離樣品滯留，而降低電泳速度，造成拖尾而使分辨率降低。速度，造成拖尾而使分辨率降低。 2.電滲電滲 電泳過程中液體對固體支持物的電泳過程中液體對固體支持物的相對移動稱為電滲。相對移動稱為電滲。 實際上是電泳材料表面的實際上是電泳材料表面的電荷引起水的定向移動。電荷引起水的定向移動。 當電滲作用方向與電泳方向一致，電泳速當電滲作用方向與電泳方向一致，電泳速度加快，順水行舟。度加快，順水行舟。 當電滲作用方向與電泳方向相反，電泳速當電滲作用方向與電泳方向相反，電泳速度減慢，逆水行舟。度減慢，逆水行舟

53、。 整理ppt 四、常用電泳技術四、常用電泳技術 區帶電泳是目前應用最廣泛的一種電泳區帶電泳是目前應用最廣泛的一種電泳技術，區帶電泳的支持介質常用的有濾紙，技術，區帶電泳的支持介質常用的有濾紙，醋酸纖維薄膜，凝膠等。醋酸纖維薄膜，凝膠等。 （一）（一） 濾紙電泳（濾紙電泳（PE） 是應用最早的支持介質。是應用最早的支持介質。優點：優點：材料價材料價廉易得，有一定機械強度。廉易得，有一定機械強度。缺點：缺點：電泳時間電泳時間長，長，810h，吸附作用大，造成拖尾而降低，吸附作用大，造成拖尾而降低了分辨率，目前已淘汰。了分辨率，目前已淘汰。 整理ppt （二）（二） 醋酸纖維薄膜電泳（醋酸纖維薄膜

54、電泳（CAE） 1957年年Kohn首先采用，醋酸纖維素是將首先采用，醋酸纖維素是將纖維素分子中葡萄糖單體上的羥基乙酰化而形纖維素分子中葡萄糖單體上的羥基乙酰化而形成纖維素醋酸酯，然后用丙酮和水的混合溶劑成纖維素醋酸酯，然后用丙酮和水的混合溶劑溶解，涂成均勻薄膜。溶解，涂成均勻薄膜。 優點：優點：對蛋白質吸附作用很小，分辨率高，對蛋白質吸附作用很小，分辨率高，區帶清晰，不吸附燃料，區帶周圍燃料可完全區帶清晰，不吸附燃料，區帶周圍燃料可完全清掉，檢測靈敏度較高，樣品用量少清掉，檢測靈敏度較高，樣品用量少0.32l，電泳時間短電泳時間短20min1小時，可透明，便于用光小時，可透明，便于用光密度掃

55、描儀定量。密度掃描儀定量。 缺點：缺點：有輕度電滲作用，吸水性較差，較有輕度電滲作用，吸水性較差，較脆。脆。整理ppt （三）瓊脂糖凝膠電泳（三）瓊脂糖凝膠電泳（AGE） 瓊脂糖是從瓊脂中分離得到的一種多糖。瓊脂糖是從瓊脂中分離得到的一種多糖。主要由半乳糖和主要由半乳糖和L-3，6-脫水半乳糖構成。常用脫水半乳糖構成。常用濃度濃度0.51.0% 。 優點：優點：吸附作用，電滲作用很小，故分辨吸附作用，電滲作用很小，故分辨率重現性好，應用廣，同工酶，脂蛋白，免疫率重現性好，應用廣，同工酶，脂蛋白，免疫電泳，樣品用量少電泳，樣品用量少0.63.0l，電泳時間短，電泳時間短30min1h。透明度好，

56、電泳后可直接掃描定量，。透明度好，電泳后可直接掃描定量，也可烘干制成薄膜。也可烘干制成薄膜。 缺點：缺點：電泳完畢后區帶易擴散，可及時固電泳完畢后區帶易擴散，可及時固定。點樣方法，挖孔法，濾紙插入法。定。點樣方法，挖孔法，濾紙插入法。整理ppt （四）（四） 聚丙烯酰胺凝膠電泳（聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE） 是一種人工合成的高分子材料，是一種人工合成的高分子材料，60年代新年代新用于電泳分析，能將血清蛋白分為用于電泳分析，能將血清蛋白分為20多種組成。多種組成。 優點：優點： 1.具有分子篩作用，分離效果好。具有分子篩作用，分離效果好。 2.化學穩定性高，是一種穩定的親水膠體。化學穩定性高，

57、是一種穩定的親水膠體。 3.幾乎沒有吸附和電滲作用。幾乎沒有吸附和電滲作用。 4.機械強度好，無色透明，可直接光密度掃機械強度好，無色透明，可直接光密度掃描。描。 5.可調節凝膠孔徑以適合不同分子量的分離。可調節凝膠孔徑以適合不同分子量的分離。 整理ppt 1. 聚合聚合 丙烯酰胺甲叉丙烯酰胺丙烯酰胺甲叉丙烯酰胺 聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺 （Acr）單體）單體 （Bis）交聯劑）交聯劑 化學摧化化學摧化 過硫酸銨過硫酸銨-TEMED（四甲基乙二胺）（四甲基乙二胺）系統系統 加速劑加速劑TEMED促使引發劑過硫酸銨形成自由促使引發劑過硫酸銨形成自由基，自由基與基，自由基與Acr接能，使接能，使Acr

58、單體形成自由基而活單體形成自由基而活化，從而引發聚合，聚合速度與化，從而引發聚合，聚合速度與pH，單體濃度，溫，單體濃度，溫度有關。度有關。催化系統催化系統引發劑引發劑 加速劑加速劑整理ppt 光催化光催化 核黃素核黃素-TEMED系統，核黃系統，核黃素經光照被還原成無色核黃素，在和痕量素經光照被還原成無色核黃素，在和痕量氧的條件下，無色核黃素又被氧化成核黃氧的條件下，無色核黃素又被氧化成核黃素自由基，使素自由基，使Acr活化，從而引發聚合。活化，從而引發聚合。 優點：優點：核黃素用量少（核黃素用量少（10mg/L），對），對樣品分析無影響，聚合時間可通過調節光樣品分析無影響，聚合時間可通過調

59、節光照時間，強度來控制。照時間，強度來控制。整理ppt 2.孔徑與機械強度孔徑與機械強度 凝膠孔徑由凝膠總濃度和交聯度決定。凝膠孔徑由凝膠總濃度和交聯度決定。凝膠總濃度凝膠總濃度T（g/dl）表示）表示100ml凝膠中凝膠中Acr和和Bis的總克數，的總克數，T值越大，孔徑越小。值越大，孔徑越小。 交聯度交聯度C（%）表示交聯劑）表示交聯劑Bis占凝膠占凝膠總濃度總濃度T的百分比的百分比，C值越大，孔徑越小。值越大，孔徑越小。 T值固定不變時，值固定不變時，C值在值在5%時，凝膠孔時，凝膠孔徑最小，大于或小于徑最小，大于或小于5%，孔徑都會增大。，孔徑都會增大。整理ppt 常用標準膠常用標準膠

60、T=7.5g/dl，孔徑約，孔徑約5nm。 凝膠的機械強度、彈性、透明度全要取凝膠的機械強度、彈性、透明度全要取決于決于T及及Acr與與Bis的比值。的比值。 通常要求通常要求 ： T為為2%5% Acr/ Bis=20 5%10% Acr/ Bis=40 15%20 % Acr/ Bis=125200整理ppt 3.分類分類 圓柱型圓柱型根據凝膠的形狀根據凝膠的形狀 水平式水平式 平板型平板型 垂直式垂直式根據凝膠系統和緩沖液組成根據凝膠系統和緩沖液組成 ： 連續（均相），操作方便。連續（均相），操作方便。 不連續（多相），分離效果好。不連續（多相），分離效果好。 整理ppt 4.分離原理分