1、精選優質文檔-傾情為你奉上實驗儀器一：紫外-可見分光光度計的使用鄰二氮菲吸光光度法測定鐵一、實驗目的1. 初步熟悉分光光度計的使用方法。2. 熟悉測繪吸收光譜的一般方法。3. 學習標準曲線定量方法。二、實驗原理在建立一個新的吸收光譜法時，必須進行一系列條件試驗，包括顯色化合物的吸收光譜曲線（簡稱吸收光譜）的繪制、選擇合適的測定波長、顯色劑濃度和溶液pH值的選擇及顯色化合物影響等。此外，還要研究顯色化合物符合朗伯比爾定律的濃度范圍、干擾離子的影響及其排除的方法等。本實驗利用分光光度計能連續變換波長的性能，測定鄰二氮菲Fe2+的吸收光譜，并選擇合適的測定波長。在pH=39的溶液中，Fe2+與鄰二氮

2、菲（phen）生成穩定的橙紅色絡合物，max508nm,1.1×104L/（mol·cm），lg3=21.3(20) （橙紅色）Fe3+與鄰二氮菲生成1：3的淡藍色絡合物（lg3=14.1），故顯色前應先用鹽酸羥胺將Fe3+還原為Fe2+，其反應為在508nm處測定吸光度值，用標準曲線法可求得水樣中Fe2的含量。若用鹽酸羥胺等還原劑將水中Fe3還原為Fe2，則本法可測定水中總鐵、Fe2和Fe3各自的含量。三、儀器與試劑1儀器722型分光光度計、酸度計、容量瓶（50mL）、吸量管（5mL，10mL）等。2試劑（1）鐵標準溶液準確稱取0.2152克優級純鐵銨礬（NH4Fe（SO

3、4 )2 ·12H2O）于小燒杯中，加水溶解，加入6molL HCl溶液5mL，定量轉移至250mL容量瓶中稀釋至刻度，搖勻。所得溶液每毫升含鐵0.100 mg（即100ug/mL）。（2）0.15鄰二氮菲（又稱鄰菲咯琳）水溶液：稱取1.5g鄰二氮菲，先用510mL 95乙醇溶解，再用蒸餾水稀釋到1000mL。（3）10鹽酸羥胺水溶液（新鮮配制）；（4）HAcNaAc緩沖溶液（pH4.6）：稱取136g優級純醋酸鈉，加120 mL冰醋酸，加水溶解后，稀釋到500mL。（5）0.1molL NaOH溶液（6）0.1molL HCL溶液四、實驗步驟(一)實驗條件的選擇1吸收曲線的制作和測

4、量波長的選擇：用吸量管吸取0.0，1.0mL鐵標準溶液（100g/ml），分別注入兩個50mL比色管中，各加入1mL鹽酸羥胺溶液，2mL鄰二氮菲，5mL HAc-NaAc，用水稀釋至刻度，搖勻。放置10min后，用1cm比色皿，以試劑空白（即0.0mL鐵標準溶液）為參比溶液，在440560nm之間，每隔10nm測一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm測定一次吸光度。在坐標紙上，以波長為橫坐標，吸光度A為縱坐標，繪制A和關系的吸收曲線。從吸收曲線上選擇測定Fe的適宜波長，一般選用最大吸收波長max。 2酸度影響于8只50 mL容量瓶（或比色皿）中，用刻度移液管各加入1.0 mL 100g/ml

5、的鐵標準溶液，再加入1 mL鹽酸羥胺溶液和2mL鄰二氮菲溶液，搖勻。然后分別加入NaOH溶液0.0 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL。用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置10 min后分別測定各溶液的pH值和吸光度。吸光度測定條件為：1cm比色皿，蒸餾水作參比，測定波長為max。3顯色劑用量的影響取7個50 mL容量瓶（或比色皿），依次加入1.0 mL 100g/ml的鐵標準溶液，1mL鹽酸羥胺溶液搖勻。再分別加入鄰二氮菲溶液0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、0.8 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL，加入5.

6、0ml的HAcNaAc，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置10 min后測定各溶液的吸光度。吸光度測定條件為：1cm比色皿，以蒸餾水作參比，測定波長為max。（二）鐵含量的測定1標準曲線的制作：用移液管吸取100g·mL-1鐵標準溶液10mL于100mL容量瓶中，加入2mL 6mol·L-1的HCl，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含Fe3+ 10g。在6個50mL容量瓶（或比色管）中，用吸量管分別加入0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0mL 10g·mL-1鐵標準溶液，分別加入1mL鹽酸羥胺，2mL Phen，5mL HAcNaAc溶液，每加

7、一種試劑后搖勻。然后，用水稀釋至刻度，搖勻后放置10min。用1cm比色皿，以試劑為空白（即0.0mL鐵標準溶液），在所選擇的波長下，測量各溶液的吸光度。以含鐵量為橫坐標，吸光度A為縱坐標，繪制標準曲線。用繪制的標準曲線，重新查出相應鐵濃度的吸光度，計算Fe2+Phen絡合物的摩爾吸光系數。2試樣中鐵的測定準確吸取適量試液于50ml比色管中，按標準曲線的制作步驟，加入各種試劑，測量吸光度。從標準曲線上查出和計算試液中鐵的含量（g·mL-1）。五、數據記錄與處理1繪制A-，得出max2繪制A-pH，得出最佳pH范圍3繪制A-Vphen，得出phen最佳使用體積4繪制工作曲線，從工作曲線

8、上找出未知試樣的含量，并計算水樣中的鐵含量（g·mL-1）六、注意事項 1. 本實驗旨在學會分光光度法測定水中微量物質時的最基本操作條件、原理和方法以及722型分光光度計的使用。因此，要仔細閱讀儀器說明書，了解儀器的構造和各個旋鈕的功能；在使用時，一定要遵守操作規程和聽從老師的指導。 2. 在每次測定前，應首先作比色皿配對性試驗。方法是：將同樣厚度的4個比色皿分別編號，都裝空白溶液，在508nm處測定各比色皿的吸光度（或透光率），結果應相同。若有顯著差異，應將比色皿重新洗滌后再裝空白溶液測定，直到吸光度（或透光率）一致。若經過多次洗滌，仍有顯著差異，則用下法校正： （1）以吸光度最小

9、的比色皿為0，測定其余三個比色皿的吸光度值作為校正值。 （2）測定水樣或溶液時，以吸光度為零的比色皿作空白，用其它各皿裝溶液，測各吸光度值減去所用比色皿的校正值。溶液吸光度測量值的校正示例比色皿編號空白溶液校正值（A）顯色溶液測得值（A）校正后測得值（A）10.00.0空白20.00440.20410.20030.00880.40890.40040.02230.62340.6013. 拿取比色皿時，只能用手指捏住毛玻璃的兩面，手指不得接觸其透光面。盛好溶液（至比色皿高度的4/5處）后，先用濾紙輕輕吸去外部的水（或溶液），再用擦鏡紙輕輕擦拭透光面，直至潔凈透明。另外，還應注意比色皿內不得粘附小氣泡，否則影響透光率。4. 測量之前，比色皿需用被測溶液蕩洗23次。然后再盛溶液。比色皿用畢后，應立即取出，用自來水及蒸餾水洗凈、倒立晾干。5. 儀器不測定時，應打開暗箱蓋，以保護光電管。6. 繪制吸收光譜時應選擇恰當的坐標比例，曲線應光滑。七、思考題1. 根據實驗數據，計算在最大吸收波長下，鄰二氮菲-Fe（）的摩爾吸收系數。你的計算值與文獻值1.1×104是否一致？如不一致，請作解