1、大容量注射劑生產(chǎn)企業(yè)檢查要點(diǎn) 一、大容量注射劑特點(diǎn)和其他無菌制劑相比，大容量注射劑的特點(diǎn)在于體積大，易導(dǎo)致：(1)發(fā)生微生物污染、內(nèi)毒素污染和微粒污染后對使用者的后果更嚴(yán)重； (2)降低微生物、內(nèi)毒素和微粒污染的技術(shù)復(fù)雜性較高；(3)廠房面積大且高，維持廠房潔凈度的難度大、成本高； (4)生產(chǎn)設(shè)備體積大且固定，需要在線清潔和消毒滅菌(5)工藝管路和在線清潔消毒管路并存，連接復(fù)雜，發(fā)生污染和交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)大； (6)大規(guī)模地處理物料和包裝材料，生產(chǎn)周期較長，發(fā)生微生物污染并在生產(chǎn)過程中繁殖的概率增加。二、生產(chǎn)工藝流程大容量注射劑產(chǎn)品包裝：玻璃瓶、聚丙烯塑料輸液瓶、非PVC 多層共擠膜或復(fù)合膜軟袋

2、。本文以玻璃瓶大容量注射劑為例，談?wù)剬Υ笕萘孔⑸鋭┥a(chǎn)企業(yè)檢查要點(diǎn)的理解。玻璃瓶，具有耐高溫、良好的透明度、相容性及阻水阻氣性能。但是，玻璃瓶體積大、易破碎、口部密封性差、碰撞時(shí)會(huì)引起隱形裂傷，膠塞與藥液直接接觸易產(chǎn)生脫落而使藥液混濁出現(xiàn)微粒。 大容量注射劑（玻璃瓶）工藝流程圖輸 液 瓶膠 塞飲 用 水原 輔 料檢驗(yàn) 檢驗(yàn)檢驗(yàn)瓶 外 洗石英砂過濾稱 量清潔劑處理活性炭過濾濃 配鋁蓋貯存初 洗一級反滲透粗濾脫炭離子交換精 洗稀 配紫外線消毒漂 洗精 洗精 濾純 化 水灌 裝精 洗多效蒸餾水機(jī)蓋 塞檢驗(yàn)過 濾注射用水軋 蓋包 材標(biāo) 簽滅 菌 檢驗(yàn)包 裝入 庫貼 簽燈 檢D級區(qū)C級區(qū)A級區(qū)(一)原料

3、稱重 在 D 級區(qū)進(jìn)行。應(yīng)設(shè)計(jì)有足夠大的待稱重原料和己稱重原料的存放場地。稱量器具的量程應(yīng)適用。同一批產(chǎn)品使用的多種原料應(yīng)集中存放。 應(yīng)由中間控制人員對稱好的物料及重量進(jìn)行雙重復(fù)核。 技術(shù)先進(jìn)的企業(yè)已采用計(jì)算機(jī)化的自動(dòng)物料識別一重量控制系統(tǒng)代替人工復(fù)核。 (二)配制 1濃配和稀配：我國大部分企業(yè)采用濃配一稀配兩步。通過加入活性炭粉末于熱的濃溶液中，以吸附分子量較大的雜質(zhì)，如細(xì)菌內(nèi)毒素。但該工藝有明顯的缺點(diǎn)： 活性炭中的可溶性雜質(zhì)將進(jìn)入藥液而無法除去； 容易污染潔凈區(qū)和空調(diào)凈化系統(tǒng)。 從風(fēng)險(xiǎn)一利益角度，更合理的配制工藝是一步配制。 2一步配制法 目前工業(yè)發(fā)達(dá)國家已普遍取消了加活性炭濃配一過濾一稀

4、配的傳統(tǒng)工藝， 而采用不加活性炭的一步配制工藝。一步配制法避免了傳統(tǒng)工藝的風(fēng)險(xiǎn)。采用一步配制法的前提是原料生產(chǎn)企業(yè)采用可靠的去除細(xì)菌內(nèi)毒素污染的工藝，如粗品溶解后加活性炭處理后結(jié)晶，使活性炭帶入的可溶性雜質(zhì) 留在母液中。原料生產(chǎn)企業(yè)還應(yīng)采取防止微生物污染的措施，能穩(wěn)定可靠地供應(yīng)微生物和細(xì)菌內(nèi)毒 素污染受控的原料。 配制投料過程中應(yīng)通過收集核對物料標(biāo)簽等措施進(jìn)行投料復(fù)核，保證原輔料按要求加入。 (三)過濾 大容量注射劑通常采用孔徑為 O22 微米的彈筒式終端過濾器，并配合使用適當(dāng)?shù)念A(yù)過濾器，截留溶液中的微粒和微生物。應(yīng)在使用前后對終端過濾器進(jìn)行完整性試驗(yàn)，如發(fā)泡點(diǎn)試驗(yàn)，以確保過濾效果。也有采用兩

5、個(gè)串聯(lián)的 022 微米終端過濾器以進(jìn)一步降低使用過程中過濾器破損的風(fēng)險(xiǎn)。 (四)灌封 1洗瓶和洗塞：洗瓶通常采用粗洗一精洗工藝。粗洗常用毛刷刷洗或超聲波清洗，以去除瓶內(nèi)外壁的各種污染物。精洗多采用多道注射用水噴射淋洗，以徹底去除污染物。應(yīng)對精洗后的輸液瓶進(jìn)行可見異物檢查。 2丁基膠塞使用前應(yīng)由洗塞機(jī)進(jìn)行清洗，必要時(shí)加入一定量的甲基硅油進(jìn)行硅化。硅化的目的是 防止膠塞粘連，并有利于膠塞在自動(dòng)壓塞機(jī)軌道上的運(yùn)動(dòng)。但硅化后的膠塞可能向藥液釋放微量硅油，并吸附在玻璃瓶壁上造成掛壁現(xiàn)象，雖然對使用者無害，但容易引起輸液瓶未洗干凈的誤解。 經(jīng)清洗的膠塞如不立刻使用應(yīng)滅菌。應(yīng)采用純蒸汽，以過度殺滅程序進(jìn)行滅

6、菌。 對膠塞的滅菌有兩種形式：在洗塞機(jī)內(nèi)在線滅菌和裝袋后在滅菌釜內(nèi)滅菌。 在線滅菌 使用具備在線滅菌的洗塞機(jī)時(shí)，可采用在線滅菌。該類洗塞機(jī)與純蒸汽連接。膠塞清洗完成后，通入純蒸汽的同時(shí)，裝置膠塞的籃筐繼續(xù)轉(zhuǎn)動(dòng)，保證膠塞均勻受熱。經(jīng)過度殺滅程序后，用經(jīng) 0.22 微米除菌過濾的空氣將膠塞吹干、冷卻。完成后在 A 級層流下裝入無菌塑料袋中存放。由于最后包 裝染菌的風(fēng)險(xiǎn)較高，膠塞存放時(shí)間不宜過長。 裝袋后滅菌 經(jīng)清洗的膠塞，在防止微粒污染的措施下裝入可通透水蒸汽的塑料袋中并密封，再放入滅菌設(shè) 備中滅菌。經(jīng)驗(yàn)證的滅菌程序能可靠地殺滅微生物，因此膠塞可存放較長時(shí)間。 兩種滅菌工藝都應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。 3灌裝與

7、壓塞：灌裝和壓塞在 C 級背景下的 A 級層流下進(jìn)行。應(yīng)采用自動(dòng)灌裝和壓塞機(jī)完成灌裝和壓塞過程。 應(yīng)對灌封環(huán)境進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)控。 4軋蓋：軋蓋會(huì)產(chǎn)生大量金屬微粒，對潔凈區(qū)環(huán)境產(chǎn)生影響，故軋蓋間的設(shè)計(jì)應(yīng)保證壓蓋過程不污染對環(huán)境要求最高的灌裝間及灌裝過程。另外，未軋蓋的產(chǎn)品，膠塞可能松脫，存在產(chǎn)品污染的風(fēng)險(xiǎn)，因此經(jīng)灌封的產(chǎn)品應(yīng)盡快軋蓋。在廠房平面設(shè)計(jì)和工藝布局設(shè)計(jì)中必須權(quán)衡兩方面的風(fēng)險(xiǎn)和利益。目前實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)中軋蓋工序既有設(shè)計(jì)在與灌裝間一墻之隔的 D 級區(qū)的， 也有設(shè)計(jì)在緊鄰灌裝間的C級區(qū)內(nèi)的。從盡量降低產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)且簡化潔凈區(qū)域布局，減少輔助面積的角度，軋蓋工序設(shè)計(jì)在與配制和灌裝同一級別 C級，這樣可以

8、共用一個(gè)人員更衣通道，但應(yīng)做到以下兩點(diǎn)，以防止微粒對產(chǎn)品的污染： 軋蓋機(jī)和灌裝機(jī)應(yīng)分置于兩個(gè)房間。 軋蓋間對灌裝間為相對負(fù)壓；或者軋蓋機(jī)安裝在有足夠排風(fēng)的裝置內(nèi)，該裝置對其外圍環(huán)境為相對負(fù)壓。可采用其他防止微粒污染風(fēng)險(xiǎn)的措施，但應(yīng)通過驗(yàn)證證明其有效性。在完成軋蓋進(jìn)行滅菌前，應(yīng)根據(jù)需要取樣監(jiān)測產(chǎn)品滅菌前微生物污染及污染菌的耐熱性。 (五)滅菌 滅菌區(qū)應(yīng)限制無關(guān)人員進(jìn)入。產(chǎn)品應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行滅菌。 產(chǎn)品滅菌主要有蒸汽滅菌和過熱水噴淋或過熱水浴三種。 蒸汽滅菌：采用清潔蒸汽(工業(yè)蒸汽經(jīng)過濾除去鐵銹等異物)為加熱介質(zhì)。冷卻介質(zhì)為經(jīng)消毒處理的水。 過熱水噴淋：采用純化水為直接接觸產(chǎn)品的介質(zhì)。在滅菌腔室

9、中加入一定量的純化水，通過循環(huán)泵經(jīng)噴嘴均 勻噴灑在產(chǎn)品上。純化水通過由工業(yè)蒸汽加熱的熱交換器達(dá)到滅菌需要的溫度。在冷卻階段該純化 水又通過低溫水冷卻的熱交換器降溫，并使產(chǎn)品降溫。 過熱水浴：與過熱水噴淋相同的加熱一冷卻原理。區(qū)別在于產(chǎn)品完全浸沒在水中。 國際上普遍要求具有防止滅菌后產(chǎn)品二次污染微生物的措施，主要方法有： 蒸汽滅菌采用的冷卻介質(zhì)為經(jīng)消毒處理的水，消毒方法主要是化學(xué)消毒法，如加入次氯酸， 使游離氯濃度達(dá)到 lOppm 以上并至少保持 1 小時(shí)，可以殺滅生長態(tài)的微生物。但該方法無法保證殺 滅細(xì)菌芽孢，可靠性較差，已趨于淘汰。 過熱水滅菌采用的冷卻介質(zhì)即經(jīng)過腔室-加入熱交換器-冷卻熱交

10、換器-腔室循環(huán)的純化水。 在產(chǎn)品滅菌階段該純化水自身也被滅菌，在封閉狀態(tài)下冷卻后依然保持無菌，是最可靠的防止產(chǎn)品 二次污染的設(shè)計(jì)。 如果能對所有產(chǎn)品進(jìn)行檢漏，確保有密封缺陷的產(chǎn)品能被剔除，則可不控制產(chǎn)品冷卻水的微 生物污染。(六)燈檢 通過燈檢剔除個(gè)別有異物的產(chǎn)品。應(yīng)通過生產(chǎn)工藝及其控制保證產(chǎn)品中有異物的概率很低。燈 檢僅為防止有異物產(chǎn)品上市的最后措施。 (七)包裝 產(chǎn)品經(jīng)貼標(biāo)簽、裝箱后成為成品。包裝線最重要的是防止混淆。應(yīng)確保標(biāo)簽正確，批號、生產(chǎn) 日期和有效期等信息準(zhǔn)確。產(chǎn)品數(shù)、標(biāo)簽消耗數(shù)等應(yīng)合理平衡。 為防止混淆，包裝區(qū)應(yīng)防止無關(guān)人員進(jìn)入。 三、工藝布局 大容量注射劑因加工處理的物料量大，

11、在布局時(shí)應(yīng)注意生產(chǎn)現(xiàn)場有足夠的空間滿足人流和物流的合理流動(dòng)。傳統(tǒng)灌封工藝包括洗瓶，灌裝，加塞三個(gè)步驟。通常洗瓶結(jié)束到密封完成需要數(shù)秒乃至數(shù)十秒 的時(shí)間，來自環(huán)境的微粒和微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)較大，應(yīng)采用 C 級背景的局部 A 級保護(hù)暴露的容器和藥液。輸液瓶經(jīng)最終清洗后由 A 級層流保護(hù)的傳送帶送入灌裝機(jī)。 歐盟 GMP 對污染風(fēng)險(xiǎn)不高的產(chǎn)品灌裝環(huán)境要求為 C 級。所謂污染風(fēng)險(xiǎn)不高指產(chǎn)品不易長菌、灌裝速度很快、采用非敞口的容器、容器暴露于空氣數(shù)秒以內(nèi)即密封等情況。 近年國際國內(nèi)越來越多地采用吹-灌-封系統(tǒng)。該系統(tǒng)實(shí)際上使得容器從高溫塑料顆粒制備后即刻完成灌裝和密封，與外界幾乎沒有空氣交流。歐盟 GMP

12、 允許在 D 級區(qū)安裝該系統(tǒng)，用于最終滅菌的大容量注射液的生產(chǎn)。 四、質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)分析與質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 大容量注射劑質(zhì)量保證的重點(diǎn)在于無菌保證、細(xì)菌內(nèi)毒素和微粒污染的控制。此外，防止混淆 和交叉污染也需要特別關(guān)注。生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度是達(dá)到上述目標(biāo)的關(guān)鍵因素。生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照以風(fēng)險(xiǎn)分析和控制為基礎(chǔ)精心設(shè)計(jì)并經(jīng)驗(yàn)證的方法和規(guī)程進(jìn)行。產(chǎn)品無菌或其他質(zhì)量特性絕不能只依賴于任何形式的最終處理或成品檢驗(yàn)。風(fēng)險(xiǎn)管理的理念應(yīng)貫穿于生產(chǎn)與質(zhì)量管理的全過程。 無菌保證的風(fēng)險(xiǎn)主要來自以下四個(gè)重要方面，即： 產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平 滅菌工藝的可靠性 容器密封完整性 無菌保證管理體系 每個(gè)方面都包

13、含有多個(gè)常見的風(fēng)險(xiǎn)因素。具體的風(fēng)險(xiǎn)因素，不同的企業(yè)和生產(chǎn)線各不相同，需要具體問題具體分析。以下分別論述常見的風(fēng)險(xiǎn)因素及其控制方法。 (一)無菌保證風(fēng)險(xiǎn)與質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制點(diǎn) 1產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平：產(chǎn)品滅菌前通常都存在一定程度的微生物污染，污染的程度用一瓶產(chǎn)品或單位體積藥液中的微生物個(gè)數(shù)表示。微生物污染數(shù)大致受五類因素影響，分別為： (1)原材料和包裝材料中的微生物：存在于原材料和包裝材料中的微生物可能進(jìn)入產(chǎn)品。而固體原料中的微生物分布可能是不均勻的，導(dǎo)致樣品檢驗(yàn)結(jié)果不一定能代表該批原料的整體情況。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法： 制定原輔料采購標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定微生物限度。通常應(yīng)不超過 lOOcfug，并不得檢出

14、致病菌。 進(jìn)行供應(yīng)商的確認(rèn)時(shí)應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注供應(yīng)商的生產(chǎn)過程對微生物污染、細(xì)菌內(nèi)毒素污染、產(chǎn)品混 淆和交叉污染風(fēng)險(xiǎn)的控制措施。 對供應(yīng)商及其供應(yīng)的原料進(jìn)行年度質(zhì)量回顧分析，以評估其質(zhì)量狀況。對有質(zhì)量不良趨勢的 供應(yīng)商應(yīng)采取針對性的措施，如增加現(xiàn)場檢查的頻率，更嚴(yán)格的抽樣方案。 嚴(yán)格管理倉儲條件，確保原料儲存過程中質(zhì)量受控。如干燥、防蟲、防鼠等。 包裝材料如玻璃瓶應(yīng)定點(diǎn)采購，其包裝應(yīng)能防止昆蟲進(jìn)入，儲存過程防止受潮長霉。 (2)生產(chǎn)環(huán)境：大容量注射劑的生產(chǎn)從原料稱量開始直至完成密封，都分別在相應(yīng)的衛(wèi)生潔凈區(qū)中進(jìn)行。上述 生產(chǎn)步驟中都存在藥物直接暴露于環(huán)境的環(huán)節(jié)，存在來自于生產(chǎn)環(huán)境中的微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。

15、為控制上述風(fēng)險(xiǎn)，國際上較普遍地采用 A、B、C、D 四個(gè)等級的潔凈區(qū)標(biāo)準(zhǔn)，分別對應(yīng)注射劑的各生產(chǎn) 工序。其中與大容量注射劑相關(guān)的主要為 A、C、D 三級。 如果能證明在動(dòng)態(tài)下生產(chǎn)區(qū)的潔凈度能符合上述標(biāo)準(zhǔn)，則來自環(huán)境的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)是較低的。然而，目前國內(nèi)多數(shù)企業(yè)尚未有計(jì)劃、有標(biāo)準(zhǔn)地開展對潔凈區(qū)的動(dòng)態(tài)監(jiān)控，或者監(jiān)控計(jì)劃不夠完善。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法： 潔凈區(qū)應(yīng)配置設(shè)計(jì)良好并經(jīng)過驗(yàn)證、定期再驗(yàn)證且良好維護(hù)的空調(diào)凈化系統(tǒng)。潔凈區(qū)新風(fēng)和人員數(shù)量的關(guān)系，應(yīng)至少達(dá)到 GB 504572008醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范規(guī)定的室內(nèi)每人新 3 鮮空氣量應(yīng)不小于 40m h 的標(biāo)準(zhǔn)。 空調(diào)凈化系統(tǒng)應(yīng)保證持續(xù)穩(wěn)定地運(yùn)行

16、。 空調(diào)凈化系統(tǒng)停機(jī)超出規(guī)定時(shí)間后，應(yīng)重新進(jìn)行潔凈區(qū)的驗(yàn)證。 應(yīng)精心設(shè)計(jì)、實(shí)施動(dòng)態(tài)環(huán)境監(jiān)控方案，保證監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)能反映潔凈區(qū)的實(shí)際情況。 每年對環(huán)境監(jiān)控結(jié)果進(jìn)行環(huán)境質(zhì)量統(tǒng)計(jì)分析。 根據(jù)環(huán)境質(zhì)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果制定、修訂環(huán)境監(jiān)控警戒標(biāo)準(zhǔn)和糾偏標(biāo)準(zhǔn)，確保能及時(shí)發(fā)現(xiàn)、糾正環(huán)境惡化的趨勢。 養(yǎng)成良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣和意識，即環(huán)境監(jiān)控取樣時(shí)段與非取樣時(shí)段的行為一致 制定 SOP 明確規(guī)定發(fā)生諸如停電、空調(diào)凈化系統(tǒng)故障、環(huán)境超標(biāo)等偏差后相應(yīng)的措施 。(3)生產(chǎn)設(shè)備：大容量注射劑通常采用固定的設(shè)備，安裝了生產(chǎn)及在線清洗、消毒等多種工藝管道。因此設(shè)備存在殘留微生物的可能，對產(chǎn)品有潛在風(fēng)險(xiǎn)。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 設(shè)備在線清潔和

17、在線滅菌的方法應(yīng)足夠詳細(xì)，應(yīng)包含所有影響清潔效果的參數(shù)，如水溫、清 潔劑濃度、流速、時(shí)間、閥門的開閉次序和時(shí)間、蒸汽溫度、壓力等的書面規(guī)定，以確保清潔效果 的重現(xiàn)性。 設(shè)備清潔與滅菌方法，包括清潔、滅菌后最長存放時(shí)間應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。 認(rèn)真執(zhí)行、記錄清潔和滅菌過程，發(fā)生偏差應(yīng)及時(shí)調(diào)查、糾正。 應(yīng)制定、執(zhí)行可靠的設(shè)備狀態(tài)管理措施，保證設(shè)備的狀態(tài)受控。 最好采用經(jīng)驗(yàn)證的計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)，自動(dòng)執(zhí)行、記錄清潔和滅菌程序，設(shè)備狀態(tài)管理由計(jì)算機(jī) 完成。 (4)人員與生產(chǎn)操作：人員及其活動(dòng)被視為最大的污染源。一方面通過人員對環(huán)境的污染間接影響產(chǎn)品帶菌量，另一 方面，某些生產(chǎn)操作，人員與物料或藥液有可能相互接觸，從而直

18、接污染產(chǎn)品。生產(chǎn)設(shè)備的狀況、 尤其是對降低藥液帶菌量有顯著作用的過濾器、清洗輸液瓶和膠塞的設(shè)備、滅菌設(shè)備等的狀態(tài)和性 能，都對產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平產(chǎn)生影響。質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 生產(chǎn)操作人員應(yīng)掌握微生物的基本知識，養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣。 設(shè)備設(shè)計(jì)、工藝及生產(chǎn)操作設(shè)計(jì)應(yīng)能盡量降低人員和生產(chǎn)操作導(dǎo)致污染的風(fēng)險(xiǎn)。 應(yīng)配備質(zhì)地良好的個(gè)人防護(hù)服裝。 選用質(zhì)量可靠的藥液終端過濾器，配合使用適當(dāng)?shù)念A(yù)過濾器，以截留藥液中的微生物。終端 過濾器使用后必須經(jīng)完整性測試，使用周期經(jīng)過驗(yàn)證。 滅菌前各工序的最長時(shí)限應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。 生產(chǎn)設(shè)備或生產(chǎn)過程發(fā)生偏差后應(yīng)分批，并增補(bǔ)產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平樣品，為質(zhì)量評價(jià)提供依據(jù)。

19、 包裝材料的清洗設(shè)備，如洗瓶機(jī)應(yīng)經(jīng)清洗效果和微生物殘留驗(yàn)證。應(yīng)設(shè)置設(shè)備關(guān)鍵參數(shù)監(jiān)控 和報(bào)警裝置。 (5)微生物在產(chǎn)品中的增殖：活微生物在適宜的條件下能迅速繁殖而使產(chǎn)品帶菌量急劇增加。充足的水分是必要條件。不同的微生物適宜的繁殖溫度跨度很大。藥液的性質(zhì)，如有無抑菌性、pH 等也能顯著影響微生物的繁 殖速度。通常可將原料和水混合作為生產(chǎn)的起始時(shí)間。一般分為配制時(shí)間，從配制結(jié)束到灌裝結(jié)束 的時(shí)間，從灌裝開始到最后一瓶產(chǎn)品開始滅菌的時(shí)間等。在配制罐或灌裝前的儲罐中的藥液的微生 物和內(nèi)毒素污染可視為均勻的，但經(jīng)過灌裝后，就有可能存在污染不均勻的情況。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和驗(yàn)證制定各步驟的時(shí)限。對

20、每一種產(chǎn)品都應(yīng)進(jìn)行微生物繁殖驗(yàn)證。通過在產(chǎn)品中 接入有代表性的菌株并在生產(chǎn)工藝溫度下培養(yǎng)，可直觀地獲得微生物數(shù)量和時(shí)間的關(guān)系曲線。 在生產(chǎn)過程中嚴(yán)格執(zhí)行各步驟時(shí)限。發(fā)生偏差后應(yīng)分批、取樣。 對以上各風(fēng)險(xiǎn)因素和風(fēng)險(xiǎn)控制方法效果的評價(jià)， 可通過對一定周期內(nèi)產(chǎn)品滅菌前微生物污染水 平檢查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析而進(jìn)行。如果超過 95的樣品為低污染水平，即不超過 l0 CFUIOOml 藥液，則說明生產(chǎn)過程整體上微生物污染風(fēng)險(xiǎn)控制措施是有效的。 (6)微生物耐熱性檢查：從滅菌原理可知，產(chǎn)品無菌保證水平不僅與滅菌前產(chǎn)品中的污染菌數(shù)量有關(guān)，也與污染菌的耐 熱參數(shù)相關(guān)。耐熱參數(shù)(D 值)的測定是非常繁瑣且費(fèi)時(shí)的工作

21、，僅在滅菌工藝驗(yàn)證的微生物挑戰(zhàn)試 驗(yàn)中進(jìn)行，不可能用于日常質(zhì)量控制。由于在日常生產(chǎn)中產(chǎn)品污染的微生物絕大多是不耐熱的，因此可以通過簡便可行的耐熱性檢查作為日常監(jiān)控手段。耐熱性檢查的步驟如下(應(yīng)遵循無菌操作的 要求)： 將 l00ml 滅菌前的產(chǎn)品經(jīng) 045 微米濾膜過濾。 濾膜浸沒于預(yù)先裝有產(chǎn)品的試管中，將試管置于沸水浴中，保持 15 分鐘，迅速冷卻。 在試管中加入一定量的液體培養(yǎng)基，于 30 0C35。C 培養(yǎng) 7 天。 如無生長，則通過。如有生長，則說明可能存在耐熱菌，需作進(jìn)一步確認(rèn)，如測定 D 值或與 驗(yàn)證用生物指示劑作耐熱性比較，以確定產(chǎn)品是否達(dá)到無菌保證水平。 2滅菌工藝的可靠性：滅

22、菌工藝的目的是使具有一定微生物污染水平的產(chǎn)品，經(jīng)滅菌后達(dá)到殘存微生物概率不超過百 萬分之一的水平。滅菌工藝的可靠性通過以下四個(gè)環(huán)節(jié)保證，分別為： (1)滅菌設(shè)備的適用性 滅菌設(shè)備的適用性是指滅菌設(shè)備執(zhí)行滅菌工藝的能力， 即滅菌設(shè)備對滅菌工藝各參數(shù)的控制準(zhǔn) 確度和精確度能否使任意位置的產(chǎn)品的實(shí)際 F0 值符合滅菌工藝規(guī)定的 F0 值范圍。例如：某 500ml 規(guī)格的氯化鈉注射液的滅菌工藝為 121±1，F(xiàn)0 值為 1220 分鐘，通過執(zhí)行特定的滅菌程序，滅 菌設(shè)備如能保證一定的裝載方式下腔室內(nèi)任意位置的產(chǎn)品實(shí)際達(dá)到的 F0 值在 1220 分鐘內(nèi)， 就說 明該設(shè)備的適用性良好。顯然，滅

23、菌工藝允許的 F0 值范圍越窄，對滅菌設(shè)備的控制精確度、熱分 布均勻度的要求越高。 現(xiàn)代化的滅菌設(shè)備為計(jì)算機(jī)控制。計(jì)算機(jī)通過接收多個(gè)溫度、壓力傳感器的信號，按預(yù)定的程 序調(diào)節(jié)加熱、冷卻介質(zhì)的流量，以實(shí)現(xiàn)預(yù)定的滅菌工藝，計(jì)算機(jī)同時(shí)自動(dòng)記錄整個(gè)滅菌過程數(shù)據(jù)。 影響滅菌設(shè)備適用性的因素主要為滅菌設(shè)備的設(shè)計(jì)制造、安裝、傳感器的準(zhǔn)確性和精確度、計(jì)算機(jī) 程序、設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)等。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 通過滅菌設(shè)備的設(shè)計(jì)確認(rèn)，使滅菌設(shè)備以預(yù)定的滅菌工藝為設(shè)計(jì)目標(biāo)。 通過安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)、滅菌工藝驗(yàn)證，證明設(shè)備性能達(dá)到設(shè)計(jì)要求，適用于 預(yù)期滅菌工藝。 至少每半年校驗(yàn)一次關(guān)鍵參數(shù)傳感器，如溫度傳感器，至

24、少每年進(jìn)行一次滅菌設(shè)備再確認(rèn)。 (2)滅菌工藝的驗(yàn)證 見無菌保證原理與最終滅菌工藝的相關(guān)部分。 (3)滅菌工藝的執(zhí)行 應(yīng)確保滅菌設(shè)備執(zhí)行了滅菌程序，完成了滅菌工藝。主要風(fēng)險(xiǎn)在于： 滅菌設(shè)備中的溫度傳感器準(zhǔn)確度發(fā)生漂移，使記錄的滅菌數(shù)據(jù)與真實(shí)值不符合導(dǎo)致的偏差。 意外事件如停電等導(dǎo)致的滅菌中斷和數(shù)據(jù)丟失。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 至少每 6 個(gè)月進(jìn)行一次溫度傳感器的校驗(yàn)，每年對滅菌設(shè)備進(jìn)行一次再驗(yàn)證，再驗(yàn)證試驗(yàn)應(yīng) 至少重復(fù)運(yùn)行兩次滅菌程序，以證明其重現(xiàn)性。 啟動(dòng)滅菌程序之前，操作人員必須確認(rèn)滅菌設(shè)備、滅菌工藝、測溫探頭等均在驗(yàn)證或校驗(yàn)的 有效期內(nèi)。 滅菌全過程應(yīng)通過兩套相互獨(dú)立的監(jiān)控系統(tǒng)控制和記錄，并

25、應(yīng)在操作人員的監(jiān)督之下。 (4)防止二次微生物污染 產(chǎn)品經(jīng)滅菌后再次污染微生物稱為二次微生物污染。 二次污染的主要原因是高溫滅菌完成后用 于冷卻產(chǎn)品的介質(zhì)中存在的微生物穿過密封屏障進(jìn)入產(chǎn)品。 高溫狀態(tài)時(shí)產(chǎn)品的密封可能和平時(shí)存在 差異。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 滅菌設(shè)備設(shè)計(jì)應(yīng)充分考慮二次微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。 盡量采用過熱水噴淋或過熱水浴的滅菌方 式。 定期監(jiān)控冷卻水的微生物質(zhì)量。定期維護(hù)滅菌設(shè)備，確保不發(fā)生冷卻水發(fā)生微生物污染。 3藥品容器密封完整性 大容量注射劑容器應(yīng)能在整個(gè)藥品有效期內(nèi)有完好的密封性，防止微生物的侵入。最理想、直 接的方法是逐瓶測試容器的密封完整性。限于成本，目前對大容量注射劑的逐瓶

26、完整性測試設(shè)備應(yīng)用得尚不普遍， 國際上普遍接受基于容器密封系統(tǒng)設(shè)計(jì)一密封組件生產(chǎn)一密封完成一密封完整性驗(yàn) 證的質(zhì)量保證過程，以證明成品的密封特性。造成密封完整性失控的潛在風(fēng)險(xiǎn)因素主要有以下四個(gè)方面： (1)密封系統(tǒng)設(shè)計(jì)缺陷， (2)容器或密封組件存在質(zhì)量偏差， (3)密封工藝過程偏差， (4)密封完整性驗(yàn)證方法不嚴(yán)謹(jǐn)。 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制方法 密封系統(tǒng)應(yīng)設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)。應(yīng)盡量采用符合國際通行標(biāo)準(zhǔn)的密封構(gòu)件，防止為節(jié)約成本而減小瓶 口一膠塞的尺寸，從而增加泄漏風(fēng)險(xiǎn)的行為。 密封組件，如膠塞、玻璃瓶和鋁蓋供應(yīng)商經(jīng)過定期審計(jì)，保證其質(zhì)量穩(wěn)定可靠。 應(yīng)制定鋁蓋扭力矩標(biāo)準(zhǔn)，并制訂抽樣監(jiān)測計(jì)劃。 密封系統(tǒng)的密封完好性

27、應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。基本方法介紹如下： a受試樣品制備：按待驗(yàn)證產(chǎn)品規(guī)格灌裝適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，并在生產(chǎn)線上正常壓塞和軋蓋。每個(gè)規(guī)格的容器至少灌裝 300 瓶。產(chǎn)品采用過度殺滅法滅菌。 b經(jīng)滅菌后的樣品倒轉(zhuǎn)接觸密封系統(tǒng)，并在 30。C35。C 下倒豎培養(yǎng) 14 天。在培養(yǎng)期內(nèi)， 如發(fā)現(xiàn)任何瓶內(nèi)培養(yǎng)基有微生物生長，則丟棄所有的容器，重新制備受試樣品。 C 確認(rèn)培養(yǎng)基的促菌生長效果。 隨機(jī)取 20 個(gè)容器， 每個(gè)容器內(nèi)接種 0.1ml(0.1ml 含 10100CFU) 的挑戰(zhàn)試驗(yàn)微生物一銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosaATCC9027)。在 30-35下培養(yǎng) 7 天 或培養(yǎng)至所有容器

28、內(nèi)培養(yǎng)基出現(xiàn)微生物生長。 如有不生長的情況， 則丟棄所有樣品， 重新制各樣品， 重復(fù)試驗(yàn)。 d制備挑戰(zhàn)試驗(yàn)微生物菌懸液。通常采用銅綠假單胞菌為挑戰(zhàn)菌。挑戰(zhàn)用菌懸液的活細(xì)胞數(shù) 6 必須達(dá)到 lxl0 CFUml。 e微生物侵入試驗(yàn)。取 50 瓶試驗(yàn)樣品，使其倒置于菌懸液中。持續(xù)時(shí)間約 4 小時(shí)。也可采用 在密封設(shè)備中抽真空、加壓等更有利于微生物侵入的措施以增加挑戰(zhàn)性。 6 f試驗(yàn)結(jié)束后確認(rèn)挑戰(zhàn)用菌懸液的活細(xì)胞數(shù)必須達(dá)到 lxl0 CFUml。 g用化學(xué)消毒劑消毒樣品。在 30。C。35。C 下培養(yǎng) 7 天。 h若所有樣品都無生長，并再次通過培養(yǎng)基促菌生長效果確認(rèn)，則通過本驗(yàn)證。 i如發(fā)現(xiàn)有樣品生

29、長，應(yīng)小心去除鋁蓋，仔細(xì)檢查有無瓶口、瓶身破損現(xiàn)象。如無破損跡象， 則該密封系統(tǒng)未通過驗(yàn)證。 j應(yīng)將剩余未經(jīng)過挑戰(zhàn)試驗(yàn)的容器于室溫下避光保存。在合適的時(shí)間間隔(如 12 個(gè)月、24 個(gè) 月、36 個(gè)月等)取出相同數(shù)量的容器，重復(fù)挑戰(zhàn)試驗(yàn)。以涵蓋產(chǎn)品的有效期。 在密封系統(tǒng)的部件發(fā)生變更時(shí)，必須評估其對密封系統(tǒng)完好性的影響，必要時(shí)重新進(jìn)行密封 完好性驗(yàn)證。 4無菌保證管理體系：無菌保證管理體系涉及 GMP 關(guān)注的各個(gè)方面的管理， 對大容量注射劑而言需要特別強(qiáng)調(diào)的有以 下兩個(gè)方面。 (1)生產(chǎn)管理 應(yīng)采取必要的措施防止發(fā)生未滅菌產(chǎn)品和已滅菌產(chǎn)品的混淆。 主要的措施可包括但不限于以下 各項(xiàng)，應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)

30、評估的結(jié)果組合采用某些措施： 滅菌工序所在區(qū)域應(yīng)與其他工序隔離并上鎖，防止無關(guān)人員隨意進(jìn)入。 采用能防止未滅菌產(chǎn)品不受控離開滅菌車的裝置。 待滅菌區(qū)與已滅菌區(qū)之間最好有物理隔離。 在每輛滅菌車上放置滅菌指示膠帶。 滅菌結(jié)束后的產(chǎn)品在已滅菌區(qū)卸載，并計(jì)數(shù)。不立即包裝的產(chǎn)品應(yīng)上鎖并有封簽，封簽的解 封由雙人負(fù)責(zé)并記錄。 應(yīng)有嚴(yán)格的物料平衡，待滅菌產(chǎn)品和己滅菌產(chǎn)品、滅菌破損產(chǎn)品的數(shù)量應(yīng)能完全吻合。 (2)質(zhì)量管理 對生產(chǎn)過程及其產(chǎn)品應(yīng)實(shí)施嚴(yán)格的微生物學(xué)監(jiān)控。 而可能導(dǎo)致監(jiān)控失敗的主要風(fēng)險(xiǎn)因素是樣品 缺乏代表性和檢驗(yàn)方法有缺陷。 以采用殘存概率滅菌工藝的產(chǎn)品為例，需要特別強(qiáng)調(diào)的措施主要有： 在每批產(chǎn)品灌封的開始、中間、結(jié)束階段取樣進(jìn)行滅菌前微生物污染水平的檢查和污染菌的 耐熱試驗(yàn)。 所有原輔料的含菌量檢驗(yàn)方法、 產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平的檢測方法及污染菌的耐熱試驗(yàn) 方法均經(jīng)過科學(xué)的驗(yàn)證。 質(zhì)量評價(jià)應(yīng)能發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)和質(zhì)量控制試驗(yàn)中出現(xiàn)的偏差并正確地判斷和處理。 相應(yīng)的管理措施 包括： a嚴(yán)格的質(zhì)量評價(jià)程序：批生產(chǎn)記錄、中間控制記錄、質(zhì)量檢驗(yàn)記錄必須經(jīng)相應(yīng)的負(fù)責(zé)人審 核。在此基礎(chǔ)之上，QA 質(zhì)量評