1、消毒與滅菌效果的評價方法與標準第一篇壓力蒸汽滅菌效果評價方法與標準1主題內容與適用范圍本方法規定了壓力蒸汽滅菌技術標準及其評價滅菌效果的檢測方法。本方法適用于對壓力蒸汽滅菌設備滅菌效果的評價。2試齊I本標準所用試劑，凡未說明規格者，均為分析純（AR,水為蒸儲水。2.1蛋白月東。2.2葡萄糖。2.3澳甲酚紫酒精溶液：取澳甲酚紫2.0g,溶于100mL9%乙醇中。2.4澳甲酚紫蛋白月東水培養基配制：蛋白月東10.0g,葡萄糖5.0g,溶于1000mL蒸儲水中，調pH值至7.07.2,然后再加2%澳甲酚紫酒精溶液0.6mL搖勻后，按5mL/W,分裝包口，置壓力蒸汽滅菌器中，于115c滅菌40min后

2、備用。3指本菌嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953或SSIK31）菌片，含菌量為5X1055X106cfu/片，121c下，殺滅90%微生物所需時間D121值為1.31.9min,殺滅時間（KT值）為w19min,存活時間（ST值）為n3.9min。4化學指示劑需用衛生部批準的化學指示劑5技術要求壓力蒸汽滅菌器壓力，MPa/cm2溫度C火菌時間,min下排氣式0.070115400.10512130預真空式0.2101344-6國家技術監督局1995-12-15批準1996-07-01實施6檢測方法6.1生物學指標（用作壓力蒸汽滅菌設備滅菌效果的依據）。6.1.1將嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片兩個分別放

3、入滅菌小紙袋內，置于標準試驗包中心部位。6.1.2滅菌柜室內，上、中層中央和排氣口處各放置一個標準試驗包（由3件平紋長袖手術衣，4塊小手術巾，2塊中手術巾，1塊大手術巾，30塊10c$10cm8層紗布敷料包裹成25cm<30cm<30cm大小）。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒（22cmx13cmx6cm）代替標準試驗包，盒內盛滿中試管，指示菌片放于中心部位兩只滅菌試管內（試管口用滅菌牛皮紙包封），將盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。6.1.3經一個滅菌周期后，在無菌條件下，取出標準試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入澳甲酚紫葡萄糖蛋白月東水培養基中，56c培養48h,觀察培養基顏色變

4、化。6.2化學指標在物品包外用化學指示膠帶，可作為物品是否經過滅菌的處理標志。在物品包內中心部位用化學指示劑，可作為物品是否滅菌的參考標志。7結果判定及評價7.1同次檢測中，標準試驗包或通氣貯物盒內，每個指示菌片接種的澳甲酚紫蛋白月東水培養基全部不變色，判定為滅菌合格。指示菌片之一接種的澳甲酚紫蛋白月東水培養基由紫色變為黃色時，判定為滅菌不合格。7.2化學指示劑的顏色變為與滅菌合格標準色相同時，或熔化時作為滅菌合格的參考標準。第二篇紫外線表面消毒效果評價方法與標準8主題內容與適用范圍本方法規定了物體表面消毒用紫外線的波長、強度及評價其消毒效果的物理學指標和生物學檢測方法。本方法適用于紫外線直接

5、照射到的物體表面消毒效果評價。9指不菌9.1大腸桿菌（8099或ATCC25922。9.2枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372。10物理學指標10.1在電壓220V時，普通30W直管型紫外線夕T,在室溫為2025c的使用情況下，253.7nm紫外線輻射弓雖度（垂直1m處）應470區W/cm210.2在電壓220V時，高強度紫外線燈，在室溫為2025C的使用情況下，253.7nm紫外線輻射強度（垂直1m處）應n200區W/cm210.3照射劑量按式（1）計算：劑量（wW/s/cm2）=強度（wW/cm2x時間（s）（1）11檢測方法11.1物理學檢測方法11.1.1燈管的紫外線強度（wW/cm

6、2用中心波長為253.7nm的紫外線強度測定儀（標定有效期內），在燈管垂直位置1m處測定。11.1.2在實際應用中消毒表面的照射強度應以燈管與消毒對象的實際距離測定。11.1.3表面消毒接受的照射劑量，應達殺滅目標微生物所需。對大腸桿菌，照射劑量應達到20000wWs/cm2,對枯草桿菌黑色變種芽胞應達到100000區W/s/cm2。11.2生物學檢測方法11.2.2開啟紫外線燈5min后，將8個染菌玻片平放于滅菌器皿中，水平放于適當距離照射，于4個不同間隔時間各取出2個染菌玻片，分別投入2個盛有5mL洗脫液（1%吐溫80,1%蛋白月東生理鹽水）試管中，振打80次。11.2.3經適當稀釋后，取

7、0.5mL洗脫液，作平板傾注，每個染菌玻片接種兩個，放37c培養48h作活菌計數。11.2.4陽性對照，除不作照射處理外，取2個染菌玻片分別投入2個盛有5mL洗脫液中振打80次，余按4.2.3進行。11.2.5計算殺滅率12判定標準12.1對指示菌殺滅率A99.9%判為消毒合格。12.2達物理學檢測標準時，作為消毒合格的參考標準。第三篇液體消毒劑消毒效果評價方法與標準13主題內容與適用范圍本方法具體規定了消毒劑消毒效果生物學檢測方法及其評價標準。本方法適用于消毒劑對各種物體的消毒效果評價。14理化指標將消毒劑置20±2C水浴中，測定在使用濃度下殺滅指示微生物達到消毒或滅菌所需的最短時間（min）。15指示微生物15.1細菌15.1.1細菌繁殖體：金黃色葡萄球菌（ATCC6538）、大腸桿菌（8099或ATCC25922）。15. 2真菌：白色念珠菌（ATCC1023）。15. 3乙型肝炎表面抗原：純化抗原（1.0mg/ml）o16檢測方法16. 1中和試驗（見附錄A）。16. 2消毒劑定性消毒試驗（見附錄B）。16. 3消毒劑定量消毒試驗（見附錄C）。16. 4消毒劑殺菌能量試驗（見附錄D）。16. 5乙型肝炎表面抗原（HBsAg抗原性破壞試驗（見附錄E）。17消毒效果評價標準17. 1對細菌和真菌的殺滅率A99.9%,對HBsAg將檢