1、專(zhuān)題二專(zhuān)題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用v清除腸道內(nèi)毒素物質(zhì)，將各種毒素清除腸道內(nèi)毒素物質(zhì)，將各種毒素吸附、稀釋、包裹，并促進(jìn)其迅速吸附、稀釋、包裹，并促進(jìn)其迅速排除體外排除體外，有腸道清道夫的美稱(chēng)有腸道清道夫的美稱(chēng)。v平衡膳食結(jié)構(gòu)平衡膳食結(jié)構(gòu)v促進(jìn)胃腸吸收水份，延緩葡萄糖的促進(jìn)胃腸吸收水份，延緩葡萄糖的吸收，改善耐糖量吸收，改善耐糖量，是糖尿病人的是糖尿病人的理想食品。理想食品。誰(shuí)需要纖維素v日常飲食中全谷類(lèi)食物、新鮮蔬日常飲食中全谷類(lèi)食物、新鮮蔬菜、水果不足者；菜、水果不足者；v希望增加膳食纖維攝取者希望增加膳食纖維攝取者特 別 適 合 人 群v中老年：中老年： 易患高血壓、易患

2、高血壓、便秘便秘v愛(ài)美人士：愛(ài)美人士： 幫助控制幫助控制體重，保持最佳身材體重，保持最佳身材v糖尿病、冠心病、高糖尿病、冠心病、高血脂癥的預(yù)防血脂癥的預(yù)防閱讀課本閱讀課本2727頁(yè)基礎(chǔ)知識(shí)部分第一、二頁(yè)基礎(chǔ)知識(shí)部分第一、二段，回答下列問(wèn)題：段，回答下列問(wèn)題：1. 1. 纖維素在生物圈的分布狀況？纖維素在生物圈的分布狀況？纖維素是地球上含量最豐富的多糖纖維素是地球上含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含類(lèi)物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中有大量的纖維素。其中棉花棉花是自然界中是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。一、纖維素和纖維素酶一、纖維素

3、和纖維素酶思考：纖維素是地球上含量最豐富的多糖思考：纖維素是地球上含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)，植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)類(lèi)物質(zhì)，植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)7070億億噸，但卻不會(huì)在地球上大量的積累，為什噸，但卻不會(huì)在地球上大量的積累，為什么？么？纖維二糖纖維二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纖維素纖維素2.2.纖維素酶的組成及作用？纖維素酶的組成及作用？3 3、纖維素的分解、纖維素的分解 能分解能分解纖維素纖維素的微生物有各種細(xì)菌、真的微生物有各種細(xì)菌、真菌和少數(shù)放線菌。菌和少數(shù)放線菌。方法：濾紙崩潰法方法：濾紙崩潰法4 4、纖維素酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)：、纖維素酶活性的測(cè)

4、定實(shí)驗(yàn)：取二支取二支20mL20mL的試管的試管纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn)纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn)各加入一張濾紙條各加入一張濾紙條各加入各加入pH4.8pH4.8，物質(zhì)量為，物質(zhì)量為0.1mol/L0.1mol/L的醋酸醋酸鈉緩沖液的醋酸醋酸鈉緩沖液11ml11ml和和10ml10ml甲甲 乙乙在乙試管中加入在乙試管中加入1mL1mL纖維素酶纖維素酶兩支試管固定在錐形瓶中，放在兩支試管固定在錐形瓶中，放在140r/min140r/min的搖床上振蕩的搖床上振蕩1h1h結(jié)果：乙試管的濾紙條消失結(jié)果：乙試管的濾紙條消失 討論討論：乙試管的濾紙條為什么會(huì)消失？甲試管的作用是：乙試管的濾紙條為什么會(huì)消失

5、？甲試管的作用是什么？什么？ 本實(shí)驗(yàn)的自變量是纖維素酶的有無(wú)，自本實(shí)驗(yàn)的自變量是纖維素酶的有無(wú)，自變量的操縱方法是：在一支試管中添加適變量的操縱方法是：在一支試管中添加適量（量（1mL1mL）的纖維素酶溶液，在另一支試）的纖維素酶溶液，在另一支試管不添加纖維素酶，但需加入等量的緩沖管不添加纖維素酶，但需加入等量的緩沖液，不能加入蒸餾水，否則會(huì)影響溶液的液，不能加入蒸餾水，否則會(huì)影響溶液的pHpH。實(shí)驗(yàn)分析：實(shí)驗(yàn)分析：P P2727的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對(duì)照的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對(duì)照的？的？下列生物能分解纖維素的是下列生物能分解纖維素的是（ ） 人人 兔兔 牛牛 蘑菇蘑菇 纖維桿菌纖維桿菌A A、 B

6、B、 C C、 D D、C C 剛果紅剛果紅能與纖維素形成能與纖維素形成紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物，而不與水，而不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。 （二）纖維素分解菌的篩選（二）纖維素分解菌的篩選 當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅- -纖纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈以纖維素分解菌

7、為中心的透明圈，這樣我們就這樣我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。練一練：練一練：1 1. .下列關(guān)于纖維素酶的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是下列關(guān)于纖維素酶的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是( )( )A. 纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖D D2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是菌，下

8、列說(shuō)法錯(cuò)誤的是( )A. 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物 B. 剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物 C. 剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D. 若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說(shuō)明已篩若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說(shuō)明已篩選出了纖維素分解菌選出了纖維素分解菌B B土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋將樣品涂布到鑒別將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培纖維素分解菌的培養(yǎng)基上養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透挑選產(chǎn)生透明圈的菌落明圈的菌落思考：本實(shí)驗(yàn)的流程與課題思考：本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2 2中的實(shí)驗(yàn)流程中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？

9、有哪些異同？ 本實(shí)驗(yàn)流程與課題本實(shí)驗(yàn)流程與課題2 2的流程的區(qū)別如下的流程的區(qū)別如下: :課題課題2 2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)，接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。 土壤取樣土壤取樣取樣環(huán)境取樣環(huán)境富含纖維素的環(huán)境中富含纖維素的環(huán)境中 由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的

10、環(huán)境中，纖維素分解菌的富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲得含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。原因原因土壤取樣土壤取樣 實(shí)例：樹(shù)林中多年落葉形成的腐殖土，實(shí)例：樹(shù)林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等。多年積累的枯枝敗葉等。 討論討論: :如果找不到合適的環(huán)境，可將濾如果找不到合適的環(huán)境，可將濾紙埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有什么紙埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進(jìn)土壤中多深？作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進(jìn)土壤中多深？ 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌將濾紙埋在土壤中能使纖維素分

11、解菌相對(duì)集中，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解相對(duì)集中，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約約10cm10cm左右的土壤中。左右的土壤中。 培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)纖維素粉纖維素粉 5g碳源（能源）碳源（能源）NaNO3 1g氮源、無(wú)機(jī)鹽氮源、無(wú)機(jī)鹽KCl 0.5g Na2HPO47H2O 1.2gKH2PO4 0.9g MgSO4 7H2O 0.5g無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽酵母膏酵母膏 0.5g生長(zhǎng)因子、碳源、氮源生長(zhǎng)因子、碳源、氮源水解酵素水解酵素 0.5g氮素、生長(zhǎng)因子氮素、生長(zhǎng)因子

12、溶解后，蒸餾水定容至溶解后，蒸餾水定容至1000mL水水參照課本參照課本2929頁(yè)旁欄中的比例配置，回答頁(yè)旁欄中的比例配置，回答下列問(wèn)題下列問(wèn)題: :a.a.旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？培養(yǎng)基？為什么？b.b.這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進(jìn)行選擇的？如果具有，是如何進(jìn)行選擇的？是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無(wú)凝固劑是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無(wú)凝固劑有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖所以能分解纖維素的微生物可以大量繁

13、殖2.2.制備選擇培養(yǎng)基制備選擇培養(yǎng)基提示：自變量為培養(yǎng)基的種類(lèi)，即提示：自變量為培養(yǎng)基的種類(lèi)，即普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基,可可用牛肉用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照c.c.你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用？選擇培養(yǎng)基的作用？思考：為什么選擇培養(yǎng)能夠思考：為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮濃縮”所需的微生物？所需的微生物？ 在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁

14、殖被抑制，因此可以起到微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮濃縮”的作用的作用梯度稀釋梯度稀釋按照課題按照課題1 1的稀釋操作方法，將的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋?zhuān)x擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋?zhuān)♂屪畲蟊稊?shù)到稀釋最大倍數(shù)到10106 6將樣品涂布到鑒別纖維素將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上分解菌的培養(yǎng)基上1. 制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基:參照旁欄中的比例參照旁欄中的比例2. 涂布平板：涂布平板：將稀釋度為將稀釋度為104106的菌懸液各取的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上，涂布在培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)挑選產(chǎn)生透明圈的菌落挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 挑取產(chǎn)生明顯的透明圈

15、的菌落，挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。一般即為分解纖維素的菌落。 接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在基上，在30300 0C C 37370 0C C培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)。培養(yǎng)。思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？與不足？P29旁欄思考題旁欄思考題方法一中方法一中NaCl溶液的作用？溶液的作用？思考：思考： 漂洗作用，洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛漂洗作用，洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅，以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰果紅，以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。用這方。用這方法可以判斷酶活力的大小，實(shí)際上剛果紅是法可以判斷酶活

16、力的大小，實(shí)際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大大小小的透明圈，大的透明圈這樣就留下大大小小的透明圈，大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！ 1.1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落基是否篩選出菌落 對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落

17、對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說(shuō)明可能獲得了分產(chǎn)生透明圈的菌落，則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。解纖維素的微生物。 四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 2.2.分離的結(jié)果是否一致分離的結(jié)果是否一致 由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量，因此最容易分離得到的和放線菌的數(shù)量，因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同，不是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同，不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不同的同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。分離結(jié)果

18、。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 為了確定分離得到的是纖維素分解為了確定分離得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行菌，還需要進(jìn)行_實(shí)驗(yàn)，纖實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有維素酶的發(fā)酵方法有_ _ 發(fā)酵和發(fā)酵和_ _ 發(fā)酵。纖維素酶測(cè)定方法是對(duì)纖發(fā)酵。纖維素酶測(cè)定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的_ _ 含量進(jìn)行定量測(cè)定。含量進(jìn)行定量測(cè)定。發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 液體液體 固體固體 五、課題延伸五、課題延伸分解分解纖維纖維素的素的微生微生物的物的分離分離纖維素酶纖維素酶種類(lèi)、作用、催化活力種類(lèi)、作用、催化活力剛果紅染色剛果紅染色篩選原理篩選原理實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)設(shè)設(shè)計(jì)計(jì)

19、土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)涂布培養(yǎng)純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)前置染色法前置染色法后置染色法后置染色法富含纖維素土壤富含纖維素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鑒別染色鑒別分離出分解菌分離出分解菌1.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)菌，符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)( )A.生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)B.生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C.生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)D.生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)練一練：練一練：C C2.從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是從土壤中分離獲

20、得某種微生物的步驟是( )土壤取樣梯度稀釋土壤取樣梯度稀釋選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng) 菌懸液涂布平板菌懸液涂布平板挑選出單個(gè)菌落挑選出單個(gè)菌落A. B.C. D.B B3. 有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是( )A. 可以增加纖維素分解菌的濃度可以增加纖維素分解菌的濃度B. 可以減少纖維素分解菌的濃度可以減少纖維素分解菌的濃度C. 所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D. 所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基A A4.4.下列關(guān)于纖維素酶的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是下列關(guān)于纖維素酶的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是 （ ）A. A. 纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種

21、B. B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. C. 纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D. D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖D D5.5.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）A. A. 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物 B. B. 剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物 C. C. 剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D. D. 若培養(yǎng)基上產(chǎn)生

22、了透明圈，則說(shuō)明已篩若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說(shuō)明已篩選出了纖維素分解菌選出了纖維素分解菌B BD 6. 6.纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基有選擇纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基有選擇作用，原因在于其含有作用，原因在于其含有 ( )( ) A ANaNO3 NaNO3 B BKCl KCl C C酵母膏酵母膏 D D纖維素粉纖維素粉 7. 7.剛果紅染色時(shí)，加入剛果紅可在剛果紅染色時(shí)，加入剛果紅可在( )( ) 制備培養(yǎng)基時(shí)制備培養(yǎng)基時(shí) 梯度稀釋時(shí)梯度稀釋時(shí) 倒平板時(shí)倒平板時(shí) 涂布時(shí)涂布時(shí) 培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落時(shí)培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落時(shí) A A B B C C D DC C8分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操分離纖維素分

23、解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是作有誤的是()A經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上維素分解菌的培養(yǎng)基上B富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖維素分解菌少維素分解菌少C經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色D對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上不含纖維素的培養(yǎng)基上A A解析解析：經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)航?jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)拍軐悠吠坎嫉借b別纖維素分解才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略；菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略；經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色；

24、設(shè)經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色；設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物了欲分離的微生物. .v9下圖為分離并統(tǒng)計(jì)分解纖維素的微生物的下圖為分離并統(tǒng)計(jì)分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程，據(jù)此回答有關(guān)問(wèn)題：實(shí)驗(yàn)流程，據(jù)此回答有關(guān)問(wèn)題：(1)(1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫?zé)崛袑ふ夷蜔峋@說(shuō)明菌，從高溫?zé)崛袑ふ夷蜔峋@說(shuō)明_。v根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。的環(huán)境中去尋找。v(2)(2)某同學(xué)根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培某同學(xué)根據(jù)需要，配制了纖

25、維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。養(yǎng)基如下，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。v如果將其中的纖維素粉換成如果將其中的纖維素粉換成_，菌落數(shù)，菌落數(shù)_，即可說(shuō)明選擇，即可說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用。培養(yǎng)基的作用。纖維素粉纖維素粉NaNO3Na2HPO47H2O KH2PO45 g1 g1.2 g0.9 gMgSO47H2OKCl酵母膏、水解酪素0.5 g0.5 g適量葡萄糖葡萄糖明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)v(3)(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實(shí)驗(yàn)宜采用涂布平板法，本實(shí)驗(yàn)宜采用_ _ 法，法，v原

26、因是原因是_。稀釋涂布平板稀釋涂布平板v平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計(jì)算每克樣平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計(jì)算每克樣品中的細(xì)菌數(shù)品中的細(xì)菌數(shù)v【解析解析】(1)(1)因?yàn)槔w維素分解菌與耐熱菌有不因?yàn)槔w維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習(xí)性，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)同的生活習(xí)性，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。尋找。(2)(2)因?yàn)槠咸烟鞘抢w維素水解的、能被微因?yàn)槠咸烟鞘抢w維素水解的、能被微生物直接利用的有機(jī)小分子，所以如果將其中的生物直接利用的有機(jī)小分子，所以如果將其中的纖維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細(xì)菌

27、纖維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細(xì)菌會(huì)生長(zhǎng)繁殖得更快，故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)會(huì)生長(zhǎng)繁殖得更快，故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基。基。(3)(3)因?yàn)橄♂屚坎计桨宸ㄒ獙⒕哼M(jìn)行一系因?yàn)橄♂屚坎计桨宸ㄒ獙⒕哼M(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)试摲筛鶕?jù)稀釋體積計(jì)算每克列的梯度稀釋?zhuān)试摲筛鶕?jù)稀釋體積計(jì)算每克樣品中的細(xì)菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所樣品中的細(xì)菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所以本實(shí)驗(yàn)宜采用稀釋涂布平板法。以本實(shí)驗(yàn)宜采用稀釋涂布平板法。v11.11.有些微生物能合成纖維素酶，通過(guò)對(duì)這些微生物的有些微生物能合成纖維素酶，通過(guò)對(duì)這些微生物的研究和應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，研究和應(yīng)

28、用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。研究人員用化合物用纖維素酶處理服裝面料等。研究人員用化合物A A、硝、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。分析回答問(wèn)題：到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。分析回答問(wèn)題：v(1)(1)培養(yǎng)基中加入的化合物培養(yǎng)基中加入的化合物A A是是_，為微生物的生，為微生物的生長(zhǎng)提供長(zhǎng)提供_，這種培養(yǎng)基從用途上進(jìn)行分類(lèi)，應(yīng)屬，這種培養(yǎng)基從用途上進(jìn)行分類(lèi)，應(yīng)屬于于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。v(2)(2)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，還應(yīng)向培養(yǎng)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生

29、物，還應(yīng)向培養(yǎng)基中加入基中加入_。v(3)(3)若用平板劃線法獲得純凈的菌株，請(qǐng)回答：若用平板劃線法獲得純凈的菌株，請(qǐng)回答：v在接種時(shí)，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前在接種時(shí)，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？都要灼燒接種環(huán)？v在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？v除此之外，還可用除此之外，還可用_方法來(lái)獲得純凈的菌株。方法來(lái)獲得純凈的菌株。v【解析解析】若篩選到能利用纖維素若篩選到能利用纖維素( (可產(chǎn)生纖可產(chǎn)生纖維素酶維素酶) )的微生物，培養(yǎng)基中加入的化合物的微生物，培養(yǎng)基中加入的化合物A A，應(yīng)為纖維素

30、。制備只以纖維素作碳源的選擇應(yīng)為纖維素。制備只以纖維素作碳源的選擇培養(yǎng)基，能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的微生物應(yīng)為培養(yǎng)基，能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的微生物應(yīng)為可產(chǎn)生纖維素酶的微生物，此即目標(biāo)微生物。可產(chǎn)生纖維素酶的微生物，此即目標(biāo)微生物。v【答案答案】v(1)(1)纖維素碳源選擇纖維素碳源選擇v(2)(2)剛果紅剛果紅v(3)(3)第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基；每次劃線前灼燒接他微生物而污染培養(yǎng)基；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落個(gè)的菌落v劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對(duì)劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染環(huán)境造成污染v稀釋涂布平板稀釋涂布平板v8.（2004天津理綜）天津理綜）淀粉酶可以通過(guò)微生物發(fā)酵生淀粉酶可以通過(guò)微生物發(fā)酵生產(chǎn)，為了提高酶的產(chǎn)最，請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，利用產(chǎn)，為了提高酶的產(chǎn)