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文檔簡介
1、玉米小斑病菌對碳氮源的利用材料與方法11病菌來源從河南省新鄉(xiāng)市洪門鎮(zhèn)的發(fā)病田中采集病葉,經分離培養(yǎng)、形態(tài)鑒定、致病性鑒定,確定病菌為玉米小斑病菌玉蜀黍平臍蠕抱。1.2 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基的制備1L馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基配方:200g馬鈴薯、20g葡萄糖、17g瓊脂,補足蒸儲水至1000mL。先將海爭去皮的馬鈴薯切碎,加1000mL水煮沸O.Sh;用紗布濾去馬鈴薯,加水補充至1000mL,然后加糖、瓊脂,加熱使瓊脂完全溶化后,趁熱用紗布過濾,分裝在三角瓶中,加棉塞后滅菌。1.3 不同碳源對病原菌菌絲生長的影響基礎培養(yǎng)基選用組合培養(yǎng)基,根據等量代換原則,1L要出培養(yǎng)基配方為:20g蔗
2、糖、5g硝酸鉀、2g磷酸鈉、1g硫酸鎂、12g瓊脂,補足蒸播水至1000mL。分別用等量的葡萄糖、麥芽糖、淀粉、孚牖、甘露醇5種碳源與其中的蔗糖置換,配置成不同的碳源培養(yǎng)基,對照(CK)選用不加糖的培養(yǎng)基。從形成的菌落邊緣挑取菌絲體移至到上述7種培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內,倒置于28qC恒溫培養(yǎng)箱中,于接種7d后測量菌落直徑,每個處理重復3次,求平均值。1.4 不同氮源對病原菌菌絲生長的影響。在"1.3”節(jié)中基礎培養(yǎng)基的基礎上,分別用等量的硫酸鐵、蛋白陳、氯化核、尿素4種氮源與其中的硝酸鉀置換以配置成不同的氮源培養(yǎng)基,對照(cK)選用不加氮源培養(yǎng)基。從形成菌落的邊緣擬黑菌絲體移至到上述6種培養(yǎng)
3、基的培養(yǎng)皿內,倒置于28恒溫培養(yǎng)箱中,于接種7d后測量菌落直徑,每個處理重復3次,求平均值。2 .結果與分析2.1 不同碳源對病原菌菌絲生長的影響由表1可以看出,在供試的6種碳源中,菌絲都可以生長,但是不同碳源對病原菌菌絲生長影響不同。在接種7d后可見玉米小斑病菌對碳源的利用有明顯的差異,麥芽糖、淀粉作為碳源時,病菌菌絲生長速度最快而且菌絲稠密,菌落平均直徑分別為69.4、67.6mm;其次是蔗糖、孚腐、甘露醇,菌落平均直徑分別為66.2、65.0、63.0mm;葡萄糖作為碳源時,病菌菌絲生長速度最慢且菌絲稀少,菌落平均直徑為58.9mm。2.2 不同氮源對病原菌菌絲生長的影響由表2可以看出,
4、在供試的5種氮源中,菌絲都可以生長,但是不同氮源對病原菌菌絲生長的影響不同。在接種7d后,玉米小斑病菌對氮源的利用有明顯的差異,氯化核作為氮源時,病菌菌絲生長速度最快而且菌絲稠密,菌落平均直徑73.8mm;其次是蛋白月東,菌落平均直徑為67.6mm;硝酸鉀、硫酸核作為氮源時,病菌菌絲生長速度較慢且菌絲稀少,菌落平均直徑分別為49.7、47.5mm;玉米小斑病菌在尿素為氮源培養(yǎng)基中生長最慢,菌落平均直徑為27.7mm。3 .結論與討論碳源是構成細胞和代謝產物中碳架的營養(yǎng)物質,也是玉米小斑病菌生理活動所需要的能源,合適的碳源更有利于病菌菌絲的生長。本試驗結果表明,麥芽糖、葡萄糖、淀粉、學糜、甘露醇、蔗糖均可被該病原菌利用,其中淀粉、麥芽糖作為碳源時菌落平均直徑最大,菌絲生長速度最快,且菌絲濃密健壯、長勢強;葡萄糖作為碳源時,菌落平均直徑最小,菌絲生長速度最慢。氮是蛋白質的基本成分,也是核酸和酶類的重要物質元素,玉米小斑病菌菌絲對供試的氮均可利用,但利用程度不同:以硫酸核、硝酸鉀、蛋白月東、氯化核、尿素作為氮源時,氨化核、蛋白月東最有利于病原菌菌絲的生長,尿素最不利于菌絲的生長。因此可以看出,病原菌對碳源的利用以淀粉、麥芽糖最佳,對葡萄糖的利用較差;病原菌對氮源的利用以氯化鐵、蛋白月東最佳,對尿素的利用較差。本研究探討了不同的碳源和
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