1、.乙肝五項乙肝五項膠體金定性實驗膠體金定性實驗濱醫附院檢驗科濱醫附院檢驗科.認識乙肝病毒認識乙肝病毒.乙肝五項檢測v HBsAgv HBsAbv HBeAgv HBeAbv HBcAb.認識乙肝五項認識乙肝五項.在認識乙肝五項前，在認識乙肝五項前，先了解乙肝病毒感染的相關臨床先了解乙肝病毒感染的相關臨床.急性肝炎急性肝炎 慢性肝炎慢性肝炎 來源來源 之前從來未感染過 l 急性乙肝轉變而來。l 乙肝攜帶者發病后轉變而來l 原發性慢性乙肝新近感染病毒后表現為慢性乙肝的過程 ALT ALT升高幅度升高幅度 較大500-1000U或更高 不大多在正常值5倍左右感染時間感染時間一般不超過半年 半年以上病

2、程特點病程特點 病程順利，無需特殊治療，一般不用抗病毒藥 反復，復雜，遷延不愈預后預后預后良好若有不良因素，5-10%成慢性抗病毒為主的綜合治療完全可控制病情發展、推遲和預防肝硬化，肝癌的發生結果結果 6個月內sAg、eAg、DNA可轉陰并出現抗HBs,獲得對乙肝的免疫 病毒不會被徹底清除不存在大 、小三陽全轉陰.急性肝炎？慢性肝炎？攜帶者？急性肝炎？慢性肝炎？攜帶者？T T細胞免疫功能細胞免疫功能能否清除病毒、引起損傷能否清除病毒、引起損傷疾病疾病完全完全、并產生抗體急性肝炎低下不足以、持續引起病理反應慢性肝炎完全缺乏不清除、不引起病理反應無癥狀攜帶者.乙肝五項及血清學診斷乙肝五項及血清學診

3、斷.vHBsAgHBsAg 已感染已感染標志標志 不反映病毒有無復制、復制程度、傳染性強弱不反映病毒有無復制、復制程度、傳染性強弱vHBsAbHBsAb 中和性抗體標志，中和性抗體標志，是否康復是否康復或或是否有抵抗力是否有抵抗力的主要標志。的主要標志。 乙肝疫苗接種者，若僅此項陽性，應視接種成功 若感染病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人體內也會產生vHBeAgHBeAg 病毒病毒復制復制標志。持續陽性標志。持續陽性3 3個月以上則有慢性化傾向個月以上則有慢性化傾向 vHBeAbHBeAb 病毒病毒復制停止復制停止標志。病毒復制減少，標志。病毒復制減少，傳染性較弱傳染性較弱vHBcAbHBc

4、Ab 曾感染或正感染曾感染或正感染者都會出現的標志者都會出現的標志 HBcAb-IGM是新近感染或病毒復制標志 HBcAb-IgG是感染后就會產生的.兩對半檢查兩對半檢查 判斷是否感染乙肝或粗略估計病毒復制水平的初步檢查 兩對半兩對半 評估病情嚴重程度價值不大評估病情嚴重程度價值不大 肝功能肝功能 衡量肝臟是否有肝細胞壞死或炎癥存在衡量肝臟是否有肝細胞壞死或炎癥存在的重要檢查（的重要檢查（轉轉氨酶價值最高氨酶價值最高），治療的重要參考指標。），治療的重要參考指標。 HBV DNA HBV DNA 判斷如何治療的參考依據，也可評估傳染性。判斷如何治療的參考依據，也可評估傳染性。 一般一般DNAD

5、NA越高，傳染性越強越高，傳染性越強（應同肝功能一起檢查）（應同肝功能一起檢查）. 膠體金（colloidal gold）也稱金溶膠（goldsol），是金鹽被還原成原子金后形成的金顆粒懸液。膠體金.vHBsAg, HBeAg檢測試紙條采用雙抗體夾心法，試紙條含有被事先固定于膜上測試區(T)的多克隆抗體和控制區(C)的相應抗體。HBsAb檢測試紙條采用雙抗原夾心法，試紙條含有被事先固定于膜上測試區(T)的乙肝表面抗原和控制區(C)的相應抗體。.14雙抗體夾心法G區：金標特異性抗體(兔型)C區：羊抗兔IgT區：特異性抗體 吸水紙標本標本陽性結果陽性結果.v測試時，血清/血漿標本滴入試劑板加樣處，

6、隨之標本在毛細效應下向上層析。如標本中含有相應的待測物質，在測試區內（T）出現一條紅色條帶,則是陽性結果。如標本中不含有相應的待測物質，則測試區內（T）將沒有紅色條帶，則是陰性結果。無論相應的待測物質是否存在于標本中，一條紅色條帶都會出現在質控區內（C）。質控區內（C）所顯現的紅色條帶是判定是否有足夠標本，層析過程是否正常的標準，同時也作為試劑的內控標準。.vHBeAb, HBcAb檢測試紙條采用競爭抑制法，試紙條含有被事先固定于膜上測試區(T)的單克隆抗體和控制區(C)的相應抗體。測試時，血清/血漿標本滴入試劑板加樣處，隨之標本在毛細效應下向上層析。如標本中含有相應的抗體，則同膜上測試區(T

7、)的單克隆抗體競爭與預包被在乳膠顆粒上的相應抗原反應。如標本中沒有相應的抗體，預包被在乳膠顆粒上的相應抗原則同膜上測試區(T)的單克隆抗體全部結合。強陽性標本，測試區內（T）將沒有紅色條帶，弱陽性標本，測試區內（T）將有一條非常弱的紅色條帶，陰性標本，測試區內（T）將會出現明顯的紅色條帶。.17競爭法標本標本G區：金標特異性抗體(兔型)C區：羊抗兔IgT區：標準抗原 吸水紙陽性結果陽性結果.18標本標本G區：金標特異性抗體(兔型)C區：羊抗兔IgT區：標準抗原 吸水紙陰性結果陰性結果.v無論相應的抗體是否存在于標本中，一條紅色條帶都會出現在質控區內（C）。質控區內（C）所顯現的紅色條帶是判定是

8、否有足夠標本，層析過程是否正常的標準，同時也作為試劑的內控標準。.v標本收集標本收集：標本收集后應盡快分離出血清或血漿以避免溶血。檢測時應盡量使用新鮮的標本。標本若不能及時送檢，可在2-8冷藏3天。長期保存需冷凍于-20，忌反復凍融。.v操作步驟操作步驟：在進行測試前必須先完整閱讀使用說明書，使用前將試劑板和血樣標本恢復至室溫（20-30）。v1.從原包裝鋁箔袋中取出試劑板，在小時內應盡快地使用。v2.用吸管吸取血清/血漿標本，逐滴（每孔2-3滴）加入試劑板的五個加樣孔中。v3.等待紅色條帶的出現，測試結果應在15分鐘時讀取。20分鐘后判定無效。.v檢驗結果判定：陽性（+）：兩條紅色條帶出現，

9、一條位于測試區（T）內，另一條位于質控區（C）。陽性結果表明：標本中含有待測物質。v陰性（-）：僅質控區（C）出現一條紅色條帶，在測試區（T）內無紅色條帶出現。陰性結果表明：標本中檢測不出待測物質。v無效：質控區（C）未出現紅色條帶，表明不正確的操作過程或試紙條已變質損壞。在任何情況下，應重新測試。如果問題仍然存在，應立即停止使用此批號產品，并與當地供應商聯系。v注意：測試區（T）內的紅色條帶可顯現出顏色深淺的現象。但是，在規定的觀察時間內，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應判為陽性結果。.v強陽性（+）：僅質控區（C）出現一條紅色條帶，在測試區（T）內無紅色條帶出現。陽性結果表明：標本中含有待測抗體。v弱陽性（+）：質控區（C）出現一條紅色條帶，在測試區（T）內有非常弱的紅色條帶出現。弱陽性結果表明：標本中含有少量待測抗體。v陰性 （-）：兩條紅色條帶出現，一條位于測試區（T）內，另一條位于質控區（C