1、脾神經對脾臟免疫功能調控的研究進展    關鍵詞 神經;脾臟;免疫     脾臟作為全身最大的周圍淋巴器官，其結構和功能復雜，近年來對脾臟免疫功能的研究愈來愈深入，尤其是神經對脾臟免疫的調控研究取得了較大進展，現綜合文獻概述如下。    1 支配脾臟神經的結構特點    支配脾臟的神經主要是腹腔交感神經節后纖維，富含去甲腎上腺素能傳出神經纖維，同時含有膽堿能神經纖維，由脾門伴隨脾動脈進入脾臟。脾交感神經不含傳入神經纖維，幾乎是無髓鞘和Schwann細胞的傳出神經束。

2、目前尚未發現副交感神經纖維支配。DeVries等分析牛脾交感神經軸膜的分子結構顯示，其軸膜主要有5種分子量居于40130Da的多肽構成，脂質占干重的59.4%，主要是以膽固醇和神經鞘磷脂的形式存在，與周圍神經系統軸突起始部的軸膜結構相一致。    Felten等用酪氨酸羥化酶免疫組化染色發現酪氨酸羥化酶陽性神經纖維不僅分布于脾臟被膜和小梁，而且還分布于T細胞區和邊緣區。電鏡發現部分脾淋巴細胞與神經末梢直接接觸，一個淋巴細胞可以與多個神經末梢接觸，甚至被神經末梢包圍，在神經末梢與淋巴細胞接觸部位，二者之間的間隙比突觸間隙還小，且淋巴細胞膜增厚，似形成特化結構。提示神

3、經末梢與淋巴細胞之間可能進行突觸樣化學傳遞。Schimdtova等在同一組織切片上通過雙重組化染色顯示野雞脾臟中央動脈周圍同時存在還原型輔酶:II-硫辛酰胺脫氫酶（NADPH-diaphorase）和乙酰膽堿脂酶（Acetycholinestease，ACHE）陽性神經細胞，在紅髓和脾包膜僅有ACHE陽性神經纖維。楊宏等證實成年小鼠的脾內血管周圍和紅髓、白髓的淋巴細胞之間廣泛存在生長相關蛋白（GAP-43）樣免疫反應陽性神經纖維，用結核菌素衍生蛋白誘發脾臟免疫應答反應，結果顯示不僅中央動脈周圍，而且動脈周圍淋巴鞘外層、邊緣區和紅髓等部位的神經纖維較對照組顯著增多，說明脾臟的神經纖維處于結構不斷

4、重塑、功能不斷改建之中，這與機體不斷接受刺激、免疫系統與神經內分泌系統同時不斷地感受刺激、協調功能、作出應答和調節有關。有報道老年大鼠脾臟神經纖維的密度下降，預示脾臟神經纖維密度與脾臟免疫功能強弱呈正相關系，似乎也說明這一點。這些研究結果較深入地揭示了神經系統對脾臟免疫功能調控的結構基礎。    2 神經遞質的性質、存儲與釋放    脾交感神經末梢與脾組織的接點屬于化學性突觸，其內存在一類特殊的細胞器突觸囊泡，根據其大小和電子密度高低分為大致密顆粒囊泡、小致密顆粒囊泡和亮泡，是儲存神經遞質的場所。神經遞質是神經系統與免疫系統的偶聯劑。

5、現知脾交感神經末梢釋放的遞質主要是去甲腎上腺素、腎上腺素、神經肽Y等。Lovisetti認為與這些遞質有關的蛋白嗜酪顆粒蛋白A，嗜酪顆粒蛋白B和NESP55（一種新的嗜酪顆粒樣蛋白）在脾觸突傳遞過程中逐步降解成為小分子多肽，最后形成遞質以出胞機制釋放。另有作者通過對神經分泌型蛋白和膜蛋白在脾交感神經亞細胞器的分布研究后發現NESP55、血管緊張素和胺載體VMAT2 僅存在于大致密顆粒囊泡，觸突短桿素同時分布于大致密顆粒囊泡和亮泡中，而SNAP-25、構造蛋白（syntaxin）和N型、L型Ca2+ 離子通道蛋白存在于一類特殊類型的亮泡中，預示神經末梢釋放的遞質是以一種特殊類型的神經泡的形式運輸

6、到神經末梢突觸前膨體，在受到刺激后釋放。而胺載體只存在于大致密顆粒囊泡中，提示小致密顆粒囊泡的形成可能需要重新利用大致密顆粒囊泡的膜成分。但也有人認為脾神經末梢的兩個相互獨立的分泌通道觸突囊泡和致密顆粒囊泡都是由軸突內質網分化形成。至于神經末梢膨體釋放的重要遞質去甲腎上腺素，Depotter等認為是以兩種形式存在于神經末梢大致密顆粒囊泡和小致密顆粒囊泡，前者含有與膜相連的多巴胺-羥化酶和可容性多巴胺-羥化酶，后者不含可溶性羥化酶，而神經肽只存在于大致密顆粒囊泡中。多巴胺-羥化酶和去甲腎上腺素的釋放在一定范圍內隨刺激頻率的增加而增加，而神經肽的釋放則相應低1020倍。作者進一步觀察狗脾交感神經發

7、現，刺激頻率在220Hz之間，釋放的去甲腎上腺素和神經肽Y隨刺激強度增加而增多，反復刺激后，腎上腺素和神經肽Y的釋放分別減少12.5%和11%，去甲腎上腺素只能從大致密顆粒囊泡中以出胞方式釋放。由此不難看出神經遞質在觸突的儲存部位和釋放途徑存在分歧，這可能與實驗動物的種屬和實驗方法有關。    3 中樞神經對脾神經電生理的調控    脾臟的交感神經是中樞神經系統與免疫系統之間的重要聯系途徑，中樞神經對脾交感神經的作用直接影響脾臟免疫功能的表現。一般認為脾交感神經電生理活動增強能抑制脾臟免疫功能，反之則增強脾臟免疫功能。舒翠莉等在大白鼠

8、第三腦室注射甲硫-腦啡肽（類阿片物質），能顯著增強脾交感神經電生理活動;注射IFN-2出現相同效應，并可被阿片受體阻斷劑納洛酮所反轉。因此，該效應可能是通過中樞神經系統的阿片受體所介導。這同時也說明IFN-2作為免疫反應產物不僅直接參與免疫反應，而且通過對中樞神經系統的作用反饋性調節免疫反應的產生和強度。在第三腦室注射IL-2則脾交感神經的電生理活動受到抑制，這種抑制也能被納洛酮所逆轉，上述結果提示第三腦室附近的阿片受體對脾交感神經電生理活動發揮重要的調控功能。    此外，靜脈內注射細菌內毒素脂多糖也能增強脾交感神經電生理活動，縮短其潛伏期。如事先給予前列腺素合

9、成抑制劑消炎痛，該效應明顯減弱或消失。在第三腦室內直接注射前列腺素2，同樣能迅速增強脾交感神經的電生理活動，表明脂多糖是通過中樞前列腺素的合成這一中間環節使脾交感神經電生理活動增強，說明第三腦室周圍結構受前列腺素刺激對脾交感神經生理電活動的影響。這部分解釋了細菌所致炎癥反應與免疫應答的消長關系。    靜脈輸注精氨酸和賴氨酸能抑制脾交感神經傳出沖動，Niijima等推測是肝門部化學感受器感受刺激后通過肝迷走神經將信號傳人下丘腦，再由下丘腦發出指令抑制脾交感神經電生理活動，從而提高脾臟免疫力。這可能是氨基酸增強機體免疫力的重要神經調控機制之一。因此，中樞神經對脾交感

10、神經電生理活動的調控部位主要是在第三腦室周圍和下丘腦。    4 脾神經對脾臟免疫功能的調控    許多實驗已經證實脾交感神經對脾臟免疫功能的影響主要表現為兩方面:調節脾臟血液灌流量和脾免疫細胞功能。Roagusch等的研究結果顯示，低劑量脂多糖能刺激機體產生內源性IL-1作用于脾交感神經節后水平，抑制脾交感神經興奮所致的收縮，從而增加脾臟血流量，提高脾臟免疫功能。該作者直接靜脈給予亞劑量（不引起發熱的劑量）的IL-1，同樣能顯著增加脾臟血流量，而骨骼肌血流量無改變。去除脾交感神經以后，該效應完全消失。此結果較好地支持了脾血液灌流量增

11、加是脾神經受抑制，血管緊張度降低所致的觀點。MacNeil也記錄到脾交感神經電生理活動與內毒素呈劑量依賴關系，內毒素劑量越大，脾交感神經電生理活動強度越高，潛伏期越短，脾臟血液灌流量越低，腎交感神經對此反應較弱，說明脾交感神經對內毒素更敏感，能快速調節脾臟血流量，使之表現出相應的免疫反應。    Besedovsky切除脾交感神經后向腹腔內注射綿羊紅細胞致敏，觀察脾內抗體形成細胞數較對照組明顯增加，用特異性更高的6-羥多巴作化學性交感神經切除后，再用綿羊紅細胞致敏得到同樣的結果。Wiliams等給新生小鼠腹腔注射6-羥多巴胺后，再向腹腔注射綿羊紅細胞，也發現脾內抗體形成細胞增加，認為這可能是交感神經切除后c-GMP增高，影響Ts細胞分化或抑制其活性，也可能是增強了TH 細胞活性。  &