1、細胞模擬試題及答案一、填空（每空一分，共25分）1. 實驗室的物理防護是由隔離的設備、實驗室的設計、實驗實施等三個方面組成，根據其密 封程度的不同，分為P1、P2、P3 P4四個生物安全等級。典型的 P4實驗室由更衣區、過 濾區、緩沖區、消毒區、核心區組成。2. 細胞系是原代培養經初步純化獲得的以一種細胞為主的、能在體外長期生存的不均一細胞 群體。3. 細胞株是指從一個經過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細_ 胞增殖形成的細胞群。4. 干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。干細胞的增殖特性為緩慢性和自穩性。5. 培養細胞的生長特點為貼附、接觸抑制和密度抑制。6. 植

2、物細胞培養的原理是基于動物細胞的全能性。7. 植物細胞懸浮培養的方法為分批培養法、連續培養法和半連續培養。8. 植物組織培養中培養材料的消毒過程中，消毒的基本原則是既要殺死附著其上的微生物又 不損傷材料。9. 細胞生長測定的一般方法為：細胞計數、測定細胞密實體積、細胞鮮重或干重。10. 體外培養的細胞根據其生長方式主要分為貼附型細胞和非貼附型細胞。11. 人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮。12. 細胞融合主要經過了兩原生質體或細胞互相靠近、細胞橋形成、胞質滲誘、細胞核融合幾 個步驟。其中細胞橋形成是最關鍵的一步。13. 花粉單倍體植株的鑒定方法有形態鑒定、細胞學鑒定、雜交鑒定、分子

3、標記鑒定。14. 胚胎工程主要是對哺乳類動物的胚胎進行某種人為的工程技術操作，然后讓它繼續發育， 獲得人們所需要的成體動物。15. 人工誘導單倍體形成的方法包括：遠緣雜交、延遲授粉、核置換、射線照射、花藥培養等。二、單項選擇題（每題1分，共10分）1. 人參皂甙粉是人參中重要的藥用成分，以前只能從人參中提取產量極低，因而價格昂貴。 目前人參皂甙粉可以通過下列哪項技術迅速大量獲取（B）A .基因工程 B.植物組織培養C .植物體細胞雜交D .發酵工程2. 下列有關動物細胞培養的敘述不正確的是（ C）A 通過動物細胞培養可獲得大量的細胞分泌蛋白B 動物細胞培養前要用胰蛋白酶處理，以使細胞分散C 細

4、胞癌變都發生于原代培養過程中D 目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為 10 代以內的，以保持其正常核型3. 盡管各種合成培養基給動物細胞培養帶來極大方便， 但許多實驗表明， 單純使用合成培養基細胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此，在使用時通常仍然需要加入一定量的(C)A.平衡鹽溶液B. 瓊脂糖C. 動物血清D. 甘露醇4. 制備人工種子的關鍵是控制(A)A. 胚狀體的同步發育B.人工種皮的同步發育C. 胚狀體的單獨發育D.人工種皮的單獨發育5.細胞融合中使用（C）方法可以在顯微鏡下直接定向誘導細胞融合A. 仙臺病毒法B.PEG誘導C. 電融合誘導法D.高Ca+和pH誘導法6.中胚層來源的細胞在體

5、外培養時一般表現為哪種形態（ A）7.A. 成纖維細胞型細胞C. 上皮型細胞D.B.在每一代貼附生長細胞的生長過程中多形型細胞游走型細胞,哪一個時期的細胞數隨時間變化成倍增長 ,活力最佳 ,最適合進行實驗研究（ D）A. 穩定期B. 衰亡期C.潛伏期D.對數生長期8.以下哪種方法或技術適合進行動物細胞的大規模培養？（D）9.A. 懸滴培養法C.旋轉管培養法B.D.單克隆抗體制備選擇親本時應選擇（ A）培養瓶培養法多孔載體培養技術A. 骨髓瘤細胞系和免疫動物屬于同一品系B. 骨髓瘤細胞系和免疫動物屬于不同品系C. B 淋巴細胞和骨髓瘤屬細胞屬于不同品系D. B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞無親緣關系10

6、. 下列關于哺乳動物胚胎發育和胚胎工程的敘述，正確的是（D）A. 卵裂期胚胎中細胞數目和有機物總量在不斷增加B. 胚胎分割時需將原腸胚的內細胞團均等分割C. 胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小和蛋白質合成旺盛等特點D. 胚胎干細胞是一類未分化細胞，可從早期胚胎中分離獲取三、多項選擇（每題 3 份，共 15 分）1. 由外植體或單個細胞形成愈傷組織一般要經過三個步驟（ABD）A.啟動期B.生長期C. 分裂期D.分化期2. 植物單細胞培養方法有（ ABCD）A. 平板培養法B.看護培養與飼養層培養法C. 液體淺層靜置培養法D. 細胞懸浮培養法3. 動物細胞培養室，無論細胞種類和供體的年齡如何，在細胞的

7、全生長過程中大致都要經過 三個主要階段（ ABC）A.原代培養期B.傳代期C. 衰退期D.穩定期4.干細胞從所具有的分化功能上分為（ABC)A.單能干細胞B.多能干細胞C. 全能干細胞D.胚胎干細胞5.動物多倍體育種的方法有（ABC)A.溫度休克法B.水靜壓法C. 細胞松弛素 BD.秋水仙素四、簡答題（共 35分）1. 二級生物安全適用于處理什么材料，具體要求有哪些（ 8 分） 答：適用于：（1）來自于來自于靈長類動物的材料和細胞系（2）接觸過靈長類的病毒或被其轉化了的細胞系（3）含有支原體的細胞系。要求：（1）所有可能產生氣溶膠的操作都應使用垂直層流生物安全小室；（2）所有污染物都應放入裝滿

8、蒸餾水的防漏的不銹鋼桶中；（3）大的塑料器皿蓋緊后放入高壓消毒袋中進行高壓消毒；（4）在處理或沖洗用過的器皿前，應先進行高壓消毒；（5）進行操作時要帶乳膠手套。2. 原生質體分離的方法有哪些，各有何優缺點（ 6 分） 答：（1）機械法優點：可避免酶制劑對原生質體的破壞。 缺點：獲得完整原生質體的數量少，使用此法的植物種類有限。（2）酶解法 優點：可獲得大量原生質體，條件溫和，原生質體完整性好，幾乎所有植物都 可用此法。缺點：影響原生質體的活力。3. 植物組織培養的基本步驟（ 6 分） 答：（1）培養材料的采集（2）培養材料的消毒（3）制備外植體（4）接種和培養（5）根的誘導（6）組織苗的練苗移

9、栽4. 細胞系和細胞株的鑒定指標及方法（ 8 分） 答：鑒定指標：（ 1）純度：分析以何種細胞為主， 所占比例為多少， 混雜有哪些其他細胞。（2）細胞生物學特征：細胞形態、結構、染色體組型、生長曲線、分裂指 數、倍增時間是否與來源細胞一致。（3）穩定性：傳代過程中細胞學特征是否發生變化。（4）污染情況：檢查是否有微生物或其他細胞系的污染。 鑒定方法：細胞形態學觀察； 繪制生長曲線， 計算分裂指數； 染色體組型和帶型分析； 同工酶譜檢測4. 植物細胞固定化的方法及特點答：吸附法：利用固體吸附劑將細胞吸附在其表面而使細胞固定化的方法。包埋法：將細胞包埋在多孔載體內部而制成固定化細胞的方法。 特點：

10、（1）由于載體的保護作用，減小剪切力作用，提高細胞存活率和穩定性。（2）細胞束縛在一定空間內，不易聚集成團，促進代謝產物的分散。（3）可簡便地在不同培養階段更換不同的培養液。（4）固定化植物細胞可連續反復使用，可縮短生產周期，提高生產效率。（5）容易與培養液分離，有利于產品的分離純化，提高產品的質量。五、綜合分析題（ 15 分）植物單細胞培養的程序及各步中應注意的事項答：1. 建立細胞株（1） 材料準備a. 確定植物種類品種b. 選擇單細胞或愈傷組織或葉肉、下胚軸等c. 借助酶處理：酶的種類、濃度、處理時間都對材料有一定影響（2） 制備細胞懸浮液a. 培養基成分篩選b. 懸浮培養，振蕩次數為8090次/minc. 用 200300目鋼網過濾盒離心沉降2. 選擇細胞株平板篩選a. 細胞