1、    滋養細胞與妊高征            作者：時間：2007-11-22 12:13:00                     關鍵詞： 妊高征滋養細胞胎盤  妊高征的病因目前仍未明了，但胎盤與妊高征的發病密

2、切相關。滋養細胞是胎盤組織中的主要細胞類型，由于它與母體接觸最為緊密，在妊高征的研究中受到重視。胎盤滋養細胞分為細胞滋養細胞和合體滋養細胞，具有多種生物學活性。本文就滋養細胞與妊高征的發病關系作一綜述。 滋養細胞與正常妊娠 滋養細胞約在受精后第4天出現，為一層扁平細胞構成胚胞壁，至孕中期胎盤形成時可分為兩種類型：合體滋養細胞和細胞滋養細胞。前者與母血直接接觸，后者又分為絨毛內細胞滋養細胞、絨毛外滋養細胞和血管內滋養細胞。 胚胞植入后至孕10周前，胎盤細胞滋養細胞仍以內膜基質浸潤為主，很少侵及間質血管。孕12周后，滋養細胞加快侵蝕子宮蛻膜和臨近三分之一肌層及其螺旋動脈，破壞管壁經構而代之以纖維素

3、樣組織，將狹窄的彈性血管變為低阻、無彈性且血管擴張的子宮胎盤血管，并失去對血管活性物質的敏感性，從而使流入絨毛間隙的血量迅速增加。用氧電極直接導入法測得在孕810周絨毛間隙氧壓為2.4±0.9kPa，子宮內膜為5.3±1.6kPa；在孕1213周絨毛間隙氧壓增至8.1±1.6kPa。 近年來研究發現，細胞滋養細胞在侵蝕子宮組織并最終取代血管壁的過程中，其表面粘附分子表型發生改變，模擬血管內皮細胞表面抗原1。例如，絨毛內細胞滋養細胞表達55，但合體滋養細胞、胎盤床及錨狀細胞柱中的細胞滋養細胞均不表達55。相反，55在絨毛內細胞滋養細胞和細胞柱淺層中的細胞滋養細胞呈弱

4、或不表達，而子宮壁組織和侵入血管壁中的細胞滋養細胞高度表達。在體外培養的細胞滋養細胞侵蝕模型中，用抗-53抗體封閉53后使細胞滋養細胞侵蝕能力降低75%。另一種粘附分子 e-cadherin在細胞滋養細胞分布與55相似，而 vE-cadherin的表達類似53。由于正常血管內皮細胞表達53和 vE-cadherin，因此認為在侵蝕子宮壁和螺旋動脈并取代血管內皮細胞之前，細胞滋養細胞必須調整表面粘附分子的表達，出現血管內皮細胞表面抗原2。 滋養細胞與妊高征 一、滋養細胞侵蝕能力改變 妊高征患者滋養細胞侵蝕功能受損，從而導致胎盤種植較淺，這一觀點在組織學上已被廣泛證實

5、，并公認為是觸發妊高征病理生理改變的直接原因。最近有人提出了妊高征滋養細胞侵蝕功能降低的生化方面的證據。 de groot等3前瞻性地檢測了妊高征孕婦血中胰島素樣生長因子結合蛋白-1（ iGFBP-1）的含量，發現在孕中期（19±1周）為115.2±19.2nmol/L，較正常孕婦252.8±48.0nmol/L為低，距發生臨床癥狀的時間為20±1周。由于 iGFBP-1在孕期主要來源于子宮內膜間質，他們認為，妊高征滋養細胞侵蝕能力下降，子宮內膜破壞較小，因此其從子宮血管滲入母血就相應減少，和滋養細胞的侵蝕行為相一

6、致。 妊高征滋養細胞侵蝕能力低下的原因目前仍不清楚，但最終有兩種可能性：滋養細胞本身缺陷或細胞周圍環境的作用。 zhou等4用免疫組化方法觀察了妊高征患者絨毛外滋養細胞粘附分子的表達，發現與正常妊娠不同，這些具有侵蝕能力的細胞仍表達粘合素55，但53呈弱表達。另外，3、5、和1亞單位的水平與正常妊娠無差別，但6、5和51表達增強，11無或弱表達。提示妊高征細胞滋養細胞表型發生改變，不利于細胞侵蝕作用。鑒于妊高征患者均有子宮胎盤血管供血不足， genbacev等5研究了缺氧對滋養細胞侵蝕行為的影響。在氧飽和度分別為2%、20%的條件下，用提純的絨毛內細胞滋養細胞（1012周）

7、與子宮蛻膜（1012周，不含滋養細胞）在體外共同培養，72h后發現在2%O2濃度下滋養細胞大部分已侵入蛻膜深層，而2%O2濃度下滋養細胞甚至在96h仍只聚集在蛻膜表面，侵入量很少。用分離的細胞外基質（ eCMs）替代蛻膜組織，結果相似。后一種情況下滋養細胞無需蛻膜組織共同培養，表明缺氧本身對滋養細胞侵蝕能力有損傷作用。值得注意的是在2%O2條件下培養6天，細胞滋養細胞仍多貼附于 eMCs表面，若3天后 o2濃度改為20%再培養3天，細胞侵蝕能力恢復正常。 genbacev等所用蛻膜均取自正常妊娠子宮。而妊高征具有一定的遺傳傾向，因此母體子宮內膜也可能與妊高征胎盤滋

8、養細胞侵蝕能力低下有關。在體外實驗發現，細胞滋養細胞的侵蝕能力受多種細胞因子調控6。例如，激活素 a、白血病抑制因子、 iL-1等都能刺激細胞滋養細胞的侵蝕活性，而 tGF-、糖皮激素、缺氧等對此起抑制作用。子宮蛻膜中含有豐富的免疫細胞，分泌細胞因子構成復雜的網絡調節系統，妊娠后胎盤細胞滋養細胞的侵蝕活動即受這些免疫細胞及細胞因子的精細調節。 giudice等7研究發現 iGFBP-1在體外有抑制細胞滋養細胞侵蝕子宮蛻膜基質作用，在妊高征患者（2134孕周）胎盤床母兒交界處 iGFBP-1表達較對照組明顯增高。 二、滋養細胞增殖與分化

9、異常 絨毛內細胞滋養細胞脫離基底膜后有兩條分化途徑：融合成合體滋養細胞或侵入蛻膜成為絨毛外滋養細胞。在體外缺氧條件下培養，發現絨毛細胞滋養細胞的增殖能力與其分化呈反向關系。在2%O2濃度下，其侵蝕能力是20%O2的十分之一，而其結合3H胸苷和5-溴脫氧尿核苷的量是后者的23倍5。 alsat等8研究了缺氧對正常妊娠晚期細胞滋養細胞體外分化成合體滋養細胞的影響，觀察到在19%O2下培養3天，幾乎全部單核細胞經過聚集和融合為合體滋養細胞，免疫印跡發現粘附分子 e-cadherin表達轉陰。而9%O2濃度下，單核細胞仍呈聚集狀，合胞體少見， e-cadherin持續陽性

10、。同時激素分泌水平下降， hCG平均為289±26IU/L，而19%O2下為1100±155IU/L。但缺氧組70%細胞表達增殖細胞核抗原（ pCNA），而19%O2組無 pCNA表達。若將缺氧狀態的細胞滋養細胞改為20%O2濃度下培養，3天后所有細胞恢復正常。 妊高征胎盤病理特點是合體滋養層發育不良，細胞滋養細胞增生， pCNA陽性細胞增多9。這些病變的發生機理可以通過缺氧來解釋，但滋養細胞的接觸和融合也與其侵蝕過程一樣，是復雜的細胞間粘附分子作用的結果，受多數因子調控，值得繼續深入研究。 三、滋養細胞分泌血管活性物質失衡 胎盤是一

11、個內分泌器官，分泌多種甾體和蛋白質激素，其中滋養細胞還能合成和產生前列腺素等血管活性物質。妊高征患者滋養細胞分泌血管活性物質與正常孕婦不同。 cervar等10在體外分離培養妊高征（3140孕周）胎盤中的滋養細胞，培養5天后，測到內皮素-1、2產量較對照組減少，而 tXB2濃度增高， tXB2/6-keto-PGF1比例上調，血管緊張素、6-keto-PGF1和白三烯 b4濃度二組相似。 ding等11更進一步分離純化出孕晚期妊高征胎盤中細胞滋養細胞進行培養，一周后 tXB2濃度較對照組升高34倍，而6-keto-PGF1與 

12、;pGE2濃度兩組間無差異。另外有作者12證實血管緊張素肽酶 a定位于絨毛內細胞滋養細胞，其活性在妊高征胎盤增高，并與血壓、蛋白尿程度呈正相關。 這些資料提示，妊高征滋養細胞分泌血管活性物質比例失衡，進一步加重了血管功能損害，激活凝血系統。前列腺素的產生與前列腺素合成酶的活性相關，已證實缺氧能使體外培養的滋養細胞中前列腺素 h合成酶-2表達增高， tXB2產生增多13。 johnson等14在體外培養滋養細胞揭示，細胞滋養細胞產生 tXB2，合體滋養細胞產生 pGE2，不產生或很少產生 tXB2；滋養細胞與纖維蛋白基質共同培

13、養時 tXB2產生增加；滋養細胞在分化過程中可以調節環氧化酶的表達，并受纖維蛋白基質的調控。此結果模擬了妊高征胎盤纖維蛋白嚴重沉積而產生的病理生理過程。 四、滋養細胞對血管內皮損傷作用 血管內皮損傷在妊高    征發病中的作用近年來得到廣泛的研究。血管內皮細胞直接暴露于血液循環，對它的損害作用最可能是血液中含有某種“毒性”成分。鑒于胎盤在妊高征發病中的作用，人們自然設想到血清中活性因子很可能是胎盤釋放入血的。事實上，最早將滋養細胞與妊高征聯系在一起是在1893年，當時 schmorl首次報道了在1例死于子癇的婦女雙肺中發現了滋養細胞。

14、后來認識到妊娠時滋養細胞進入母血循環是正常生理現象，但妊高征孕婦胎盤微絨毛呈棒狀改變，局部有壞死和脫落，有更多的滋養細胞進入母血。因此，人們想象滋養細胞損傷血管內皮。 smarason等15從正常妊娠和妊高征孕婦胎盤分離出合體滋養細胞微絨毛膜（ sTBM），發現二者均能抑制體外培養的血管內皮細胞增殖，而且抑制程度相同，對內皮細胞單層結構改變的形態相似。據此，他們假設是因為母血中混入的合體滋養細胞成分損傷了全身血管內皮。盡管正常孕婦胎盤也有這種作用，但妊高征患者血中滋養細胞成分增多。后來，他們又發現16妊高征孕婦外周血漿具有抑制血管內皮細胞增殖的能力，但血清卻失去這種作用。將 

15、;sTBM加入男子外周血中，也出現類似結果。 cockell等17用制備的 sTBM囊泡灌注去甲腎上腺素預先處理過的皮下小動脈，觀察對乙酰膽堿舒血管作用的影響，同時用生理鹽水和紅細胞膜灌注作對照。結果發現灌注2h后，對照組不影響小動脈對乙酰膽堿的反應，而 sTBM組對其反應明顯降低。電鏡證實，反應組小動脈內皮中斷，細胞器扭曲，內皮下平滑肌細胞正常。新近，有學者采用多種抗滋養細胞膜抗體，通過免疫熒光和流式細胞技術來檢測妊高征患者血漿中 sTBM濃度，結果發現，妊高征婦女外周及子宮靜脈血漿中的 sTBM水平均高于正常妊娠婦女（外周血漿：29.12n

16、mol/L對7.36nmol/L；子宮靜脈血漿：91.84nmol/L對32nmol/L），并且子宮靜脈血漿中濃度高于外周血漿，證實了胎盤滋養細胞脫落 sTBM進入母血循環。他們還發現，妊高征患者血漿抑制血管內皮細胞增殖活性與血漿中 sTBM濃度呈相關性18。 五、滋養細胞表達 hLA抗原 胎兒作為半個異體移植物而不被母體排斥，其原因之一被認為與滋養細胞不表達 hLA抗原有關。資料表明，合體滋養細胞無 hLA抗原表達，但絨毛外細胞滋養細胞表達此類抗原，后來確定為 hLA-G，屬于 hLA-I類抗原。對 hLA-G的

17、表達調節及其功能知之甚少，由于其主要出現于絨毛外細胞滋養細胞，推測它的表達是滋養細胞侵入母體所必需，具有抑制母體局部免疫反應作用19。 colbern等20研究了妊高征胎盤組織 hLA-G抗原的表達情況，發現在孕晚期胎盤滋養細胞與蛻膜交界處 hLA-G表達水平較正常孕婦降低。但他們同時注意到妊高征組絨毛外細胞滋養細胞數目也較正常組減少，而每個細胞滋養細胞的表達水平兩組間無差異性。 hLA-G在正常妊娠和病理妊娠中的作用有待于更深入地研究。 結語 綜上所述，妊高征胎盤滋養細胞的病理改變是復雜多樣的，牽涉到多方面的細胞生物學特性。在胎盤發生過程中，滋養細胞的

18、作用十分復雜并受到精細調節。一方面它侵入母體子宮組織特別是螺旋動脈，另一方面它表現出良性的生物學行為。目前已知滋養細胞植入較淺而致胎盤缺血缺氧啟動了疾病的發生過程。但妊高征滋養細胞侵蝕能力受阻的起因不明，繼續加快這方面的研究，將有助于最終揭示妊高征的發病機理。參考文獻 1 Zhou Y et al.J Clin Invest,1997;99:2139-2151 2 Zhou Y et al.J Reprod Immunol,1998;39:197-213 3 De&

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