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1、梯度洗脫程序的設(shè)置梯度洗脫:乙腈/水體系。初始比例:乙腈:水=70%:30%。保持2分鐘;10分鐘內(nèi)漸變?yōu)?00%:0。保持10分鐘。液相的軟件界面如下圖(泵的控制部分):1、 將“泵數(shù)”處設(shè)置為“2”。在上圖的左下角位置。2、 在“初始流量”處設(shè)置為A泵(輸乙腈):70%;軟件會(huì)自動(dòng)將B泵(輸水)設(shè)為30%。設(shè)置后見下圖。3、 在時(shí)間表的時(shí)間處輸入“2”(指初始比例保持時(shí)間),A處輸入“70”,按“加入”。設(shè)置后見下圖。4、在時(shí)間表的時(shí)間處輸入“12”(10分鐘加上初始保持時(shí)間等于12),A處輸入“100”,按“加入”。設(shè)置后見下圖。5、 在時(shí)間表的時(shí)間處輸入“22”(見下面的注1),A處輸
2、入“100”,按“加入”。設(shè)置后見下圖。 注1:到前一步的總時(shí)間為12分鐘,加上這一步需要10分鐘,等于22分鐘。6、 在時(shí)間表的時(shí)間處輸入“22.001”,A處輸入“70”,按“加入”。設(shè)置后見下圖。當(dāng)切換進(jìn)樣閥至INJECT狀態(tài)時(shí),軟件就會(huì)自動(dòng)按上面的梯度程序來控制泵了。當(dāng)按下軟件的停止按鈕時(shí),梯度程序會(huì)自動(dòng)中止。上面的操作步驟中,第5步和第6步也可以不設(shè)置。等樣品中所有組份都出峰后按下軟件的停止按鈕時(shí),梯度程序會(huì)自動(dòng)中止,同時(shí)流動(dòng)相比例回到初始流量處所設(shè)置的比例。兩次進(jìn)樣的間隔時(shí)間要求不少于十分鐘(需要等基線穩(wěn)定后才能進(jìn)下一次樣品)。重要提示:1、液相色譜所用的水必須為超純水或雙蒸水,也可以直接購(gòu)買“娃哈哈”等品牌的純凈水代替。絕對(duì)不能使用礦泉水。2、 如果是超純水或雙蒸水,一般要求當(dāng)天制備當(dāng)天使用(不要超過三天)。3、 如果是購(gòu)買的市售的純凈水,必須當(dāng)天開封當(dāng)天使用(不要超過三天)。4、 實(shí)驗(yàn)表明,純水放置一天后即有細(xì)菌存在。如果純水中含有5%-10%的有機(jī)物(如甲醇、乙腈),可以放置三至五天,放置三天后即有細(xì)菌存在。
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