1、第五章DNA和蛋白質技術、單項選擇題（本大題共15小題，每小題 4分，共60分）1 .（黑龍江哈爾濱師大附中 2019-2020學年質檢）下列關于 “DNA1提取與鑒定”實驗操作時所用試劑的搭配，不正確的是（）選項操作步驟選用試劑A提取雞血細胞中的核物質蒸儲水B溶解細胞核內的 DNA2 mol/L 的 NaCl 溶液C析出 2 mol/L NaCl溶液中的DNA蒸儲水D提取雜質較少的 DNA2 mol/L 的 NaCl 溶液【解析】使用蒸儲水使雞血細胞吸水漲破， 提取核物質，A正確；在實驗中，先用2 mol/L 的NaCl溶液溶解DNA ,除去不溶的一些雜質，再將溶液稀釋 （加蒸儲水）為0.1

2、4 mol/L ,此 時DNA沉淀析出，B、C正確；一般用冷卻的體積分數為 95%的酒精提取雜質較少的 DNA , D錯誤。2 （山東濰坊一中2019-2020學年期中）PCR技術是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術，如圖表示合成過程。下列說法錯誤的是（）A.甲過程高溫使 DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用B 丙過程用到的酶在高溫下失活，因此在PCR 擴增時需要再添加C.如果把模板DNA的兩條鏈用15N標記，游離的脫氧核甘酸不做標記，控制“94 -55 C72 C”溫度循環3次，則在形成的子代 DNA中含有15N標記的 DNA占25%D PCR 中由堿基錯配引起的變異屬于基

3、因突變【答案】 B【解析】丙過程用到的酶是Taq DNA 聚合酶，其特點是耐高溫，不會失活。3 （福建泉州五中 2019-2020 學年調研）在 DNA 的粗提取與鑒定實驗中有三次過濾：（1）過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液（2）過濾含黏稠物的質量濃度為0.14 mol/L 的 NaCl 溶液（3）過濾溶解有DNA 的質量濃度為 2 mol/L 的 NaCl 溶液以上三次過濾分別為了獲得 （）A 含核物質的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA 的濾液B 含核物質的濾液、濾液中DNA 黏稠物、含 DNA 濾液C.含核物質的濾液、濾液中 DNA黏稠物、紗布上的 DNAD 含較純DNA 濾液、紗布上黏稠物、

4、含DNA 濾液【答案】 A【解析】過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液應取其濾液（其內含DNA） ；過濾含黏稠物的質量濃度為 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液應取黏稠物（其內含析出的DNA） ； DNA 易溶于質量濃度為 2 mol/L 的 NaCl 溶液，故過濾該溶液時應取濾液（其內溶有DNA） 。4 （湖北孝感高級中學2019-2020 學年期中）多聚酶鏈式反應（PCR 技術 ）是體外酶促合成特異 DNA 片段的一種方法， 由高溫變性、 低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期，循環進行，使目的 DNA 得以迅速擴增，其簡要過程如圖所示。下列關于PCR 技術的敘述，不正確的是（）11A

5、PCR 技術是在實驗室中以少量DNA 制備大量 DNA 的技術B 反應中新合成的DNA 又可以作為下一輪反應的模板C.獲取目的基因的唯一途徑是從基因文庫中獲取D 應用PCR 技術與探針雜交技術可以檢測基因突變【答案】C【解析】獲取目的基因的途徑有：從基因文庫中獲取、 PCR 技術擴增、人工合成。5 （廣西南寧三中 2019-2020 學年質檢） “X 基因 ”是 DNA 分子上一個有遺傳效應的片段，若要用 PCR 技術特異性地拷貝 “X 基因 ” ，需在 PCR 反應中加入兩種引物，兩種引物及其與模板鏈的結合位置如圖甲所示。經 4 次循環后，產物中有5 種不同的 DNA 分子，如圖乙所示，其中

6、第種DNA分子的個數是（）B 4C 6D 8【答案】D【解析】PCR 技術擴增時，由兩種引物決定所擴增的片段的特定序列，上一次循環的產物為下一次循環的模板。第一次循環形成和，第二次循環形成4個DNA ,以此類推，4次循環后共形成16個DNA,其中各1個，各3個，共8個。6 （陜西西安交大附中 2019-2020 學年期中） PCR 一般要經過三十多次循環， 從第二輪循環開始，上一次循環的產物也作為模板參與反應，由引物I延伸而成的 DNA單鏈作模板時將 （）A .仍與引物I結合進行DNA子鏈的延伸B.與引物H結合進行 DNA子鏈的延伸C .同時與引物I和引物H結合進行子鏈延伸D 無需與引物結合，

7、在酶的作用下從頭合成子鏈【答案】 B【解析】當由引物I延伸而成的DNA單鏈作模板時，此單鏈引物端為5端，因此與它互補的子鏈應從另一端開始合成，即與引物H結合延伸DNA子鏈。7（ 云南省玉溪一中 2019-2020 學年調研） 利用 PCR 技術將某小段DNA 分子擴增 n 代，需（）A 測定 DNA 分子兩端的核苷酸序列，以便設計引物對B 2n 對引物參與子代DNA 分子的合成C.向反應體系中加入解旋酶、DNA聚合酶等D 保持反應體系溫度恒定不變，確保擴增的正常進行【答案】 A【解析】測定 DNA 分子兩端的核苷酸序列，以便設計引物對，引導DNA 聚合酶從引物的3端延伸DNA鏈。一個DNA分子

8、擴增n代后，形成2n個DNA分子，需要（2n1）對引物。反應體系中不需要加入解旋酶， PCR 過程中溫度不是恒定不變的，而是經過了升溫、降溫和再升溫。8 （四川省攀枝花一中2019-2020 學年期中）下列關于電泳的說法正確的是（）A.電泳是指不帶電的分子在電場的作用下發生遷移的過程B 電泳的過程要在一定的 pH 下，所以一定要使用緩沖液C.葡聚糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是兩種常用的電泳方法D.聚丙烯酰胺凝膠電泳中，溶液中加入SDS,電泳的遷移率主要取決于分子所帶電荷的多少和分子相對分子質量的大小【答案】B【解析】電泳的過程實質上是帶電粒子在電場的作用下發生遷移的過程，A 錯誤； 電泳過程

9、要在一定的 pH 條件下進行，所以要在溶液中加入緩沖液，以維持溶液pH 的穩定， B正確； 最常用的電泳方法是瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳， C 錯誤； 聚丙烯酰胺凝膠電泳的過程中，為了消除電荷對遷移率的影響，可在凝膠中加入 SDS， SDS 可以與各種蛋白質形成蛋白質 SDS 復合物， SDS 所帶負電荷的量遠遠超過蛋白質分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質之間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于分子的大小， D 錯誤。9 (甘肅省慶陽一中 2019-2020 學年質檢)下列有關提取和分離血紅蛋白的敘述，錯誤的是 ()A .樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液B 通過透析可

10、以去除樣品中分子量較大的雜質，此為樣品的粗提取C.可通過凝膠色譜法將相對分子質量較大的雜質蛋白除去，即樣品的純化D 可通過SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度【答案】B【解析】樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液，A 正確； 通過透析可以去除樣品中分子量較小的雜質， B 錯誤； 可通過凝膠色譜法將相對分子質量較大的雜質蛋白除去，即樣品的純化， C 正確；SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳法是蛋白質純度鑒定使用最多的方法， D 正確。10 (安徽省銅陵一中 2019-2020 學年期中)血紅蛋白的提取和分離中，將攪拌好的混合液離心后，試管中的溶液分為 4 層，從上到下依次是()A.無色

11、透明的甲苯層、血紅蛋白的水溶液、脂溶性物質的沉淀層、其他雜質的暗紅色沉淀物B 脂溶性物質的沉淀層、無色透明的甲苯層、血紅蛋白的水溶液、其他雜質的暗紅色沉淀物C.無色透明的甲苯層、脂溶性物質的沉淀層、血紅蛋白的水溶液、其他雜質的暗紅色沉淀物D 脂溶性物質的沉淀層、血紅蛋白的水溶液、無色透明的甲苯層、其他雜質的暗紅色沉淀物【答案】 C【解析】血紅蛋白液離心后分四層，其中第二層是脂溶性物質的沉淀層。11 (福建省南平一中 2019-2020學年調研)下列有關 “DNA的粗提取和鑒定”實驗的敘 述，正確的是()A 用兔的成熟紅細胞可提取 DNAB 在沸水浴的條件下， DNA 遇二苯胺會被染成紫色C.用

12、酒精進行提純，原因是 DNA溶于酒精，蛋白質不溶于酒精D DNA 對高溫的耐受性一般要比蛋白質強【答案】D【解析】兔屬于哺乳動物，其成熟的紅細胞中無細胞核， 不適合作為提取DNA 的材料；DNA 不溶于酒精，蛋白質溶于酒精，所以可用冷卻的酒精來對 DNA 進行提純；大多數蛋白質不能忍受6080 c的高溫，而DNA在80 C以上才會變性；DNA溶液與二苯胺試劑 經沸水浴會變藍。12 (江西省撫州一中 2019-2020 學年期中) 下列關于體外擴增 DNA 的敘述， 正確的是 ()A. DNA聚合酶只能從5端延伸DNA鏈B. DNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸C.擴增DNA利用了熱變性的

13、原理D 擴增的對象是氨基酸序列【答案】 C【解析】DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA ,只能從子鏈的3端延伸DNA鏈，因此DNA 的復制需要引物， 當引物與 DNA 母鏈通過堿基互補配對進行結合時， DNA 聚合酶就 能從引物的3'端開始延伸DNA鏈，因此DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。PCR 利用了 DNA 熱變性原理，擴增的對象是脫氧核苷酸序列。13(湖北省宜昌二中 2019-2020 學年質檢) 下列有關 PCR 技術的敘述， 錯誤的是 ()A 變性過程破壞的是DNA 分子內堿基對之間的氫鍵B 引物的設計要有一段已知目的基因的核苷酸序列C.延伸過程中需要Taq 酶、

14、ATP 、四種核糖核苷酸D 利用DNA 雙鏈復制的原理【答案】C【解析】變性過程破壞的是DNA 分子內堿基對之間的氫鍵， A 正確；引物的設計要有一段已知目的基因的核苷酸序列， B 正確；延伸過程中要Taq 酶、 ATP 、四種脫氧核糖核苷酸， C 錯誤； PCR 技術的原理是DNA 雙鏈復制， D 正確。14 (山西省朔州一中 2019-2020 學年期中)下列關于血紅蛋白的提取和分離操作的敘述，不正確的是()A.色譜柱內不能有氣泡存在，一旦發現有氣泡，必須重裝B 凝膠用自來水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液C 為加快凝膠膨脹， 可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱， 逐漸升溫至接近沸騰，通常只需

15、12 hD 在血紅蛋白提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理，是讓血紅蛋白處在穩定的 pH 范圍內，維持其結構和功能【答案】B【解析】由于裝填凝膠柱時用到的是商品凝膠，為干燥的顆粒， 使用前需要用蒸餾水充分溶脹后， 配成凝膠懸浮液，再用洗脫液進行充分洗滌平衡， 使凝膠裝填緊密，也可在沸水 浴中加熱膨脹，既可節約時間，也可除去凝膠中的微生物，排出膠粒內的空氣。15( 湖南省張家界一中 2019-2020 學年調研) 下列有關 DNA 和蛋白質的溶解性的說法，不正確的是()A DNA 能夠溶解在氯化鈉溶液中，但不能溶解于酒精溶液中B 蛋白質能夠溶解在酒精溶液中，但不能溶解于氯化鈉溶液中C.用蒸儲水將2

16、mol/L的氯化鈉溶液調至0.14 mol/L ,能夠析出的物質是DNAD 提取較純凈的 DNA 時所用的試劑是冷卻的體積分數為 95% 的酒精溶液【答案】 B【解析】 DNA 和蛋白質等其他成分在不同濃度的 NaCl 溶液中溶解度不同， 利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使DNA 充分溶解，而使蛋白質等雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的， A 正確， B 錯誤；在物質的量濃度為 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中， DNA 析出而蛋白質溶解， 所以用蒸餾水將2 mol/L 的氯化鈉溶液調至0.14 mol/L ， 能夠析出的物質是DNA ，C 正確； DNA 不溶于酒精溶液，但是細胞

17、中的某些蛋白質則溶于酒精，利用這一原理，可以將 DNA 與蛋白質進一步地分離， D 正確。二、綜合題 (本大題共 2 小題，共 40 分 )16.(河北省張家口一中2019-2020學年期中)如圖是利用PCR技術和電泳技術進行的某一次親子鑒定結果圖譜，請根據圖譜和所學知識回答問題：(1)PCR 技術能把某一DNA 分子片段進行擴增。它是利用了 DNA 的原理，通過控制 來控制 DNA 與結合。(2)利用PCR 技術擴增 DNA 的過程中還需要酶的作用，但它必須在相應的 的作用下才能完成對DNA 的復制。假若有一段DNA 序列為：5' -GTTAACCTTAG 3'3'

18、-CAATTGGAATC 5'所用引物I為5' -GTTA-OH,則引物H為(3) 圖是含有21 個氨基酸的多肽水解得到的氨基酸混合物電泳的結果， 故可推知該多肽由 種氨基酸構成。(4)圖為某小孩和其母親，以及待測定的四位男性的DNA ,分別由酶處理后，生成若干DNA片段，并進行擴增，然后進行電泳所得到的一組DNA指紋圖譜，請分析：F1F4中，你認為 是該小孩真正生物學意義上的父親。為什么？【答案】(1)熱變性溫度解聚(2)耐高溫的DNA聚合引物 5' -CTAA-OH(3)6 (4)F2 因為 C 和 F2 兩者之間的 DNA 指紋圖譜有相同的區段【解析】 PCR 技

19、術是在體外模擬體內 DNA 復制過程，利用 DNA 的熱變性原理，替代原有的解旋酶的作用，且所用 DNA 聚合酶為耐高溫的 DNA 聚合酶，但是復制過程要提供現成的引物， 引物序列和目的基因兩端的堿基互補配對。 氨基酸混合物進行電泳時， 因為相同的氨基酸相對分子質量和所帶電荷數相同， 所以在電泳時只出現1 條帶， 圖所示圖譜出現 6 條帶，所以該多肽由 6 種氨基酸組成。從遺傳角度分析，兒子的 DNA 一半來自父方，一半來自母方，仔細觀察圖不難發現，F1F4中F1、F3、F4不可能是孩子的父親，C和F2 兩者之間的 DNA 指紋圖譜有相同的區段，所以 F2 最可能是其生物學意義上的父親。17.(遼寧省鐵嶺一中 2019-2020學年質檢)PCR是一種體外快速擴增DNA的方法，用于擴增特定的 DNA