1、實驗一 藥酶誘導劑及抑制劑對戊巴比妥鈉催眠作用的影響【目的】以戊巴比妥鈉催眠時間作為肝藥酶體活性指標， 觀察苯巴比妥及氯霉素對戊巴比妥 鈉催眠作用的影響，從而了解它們對肝藥酶的誘導及抑制作用。【原理】苯巴比妥為肝藥酶誘導劑， 可誘導肝藥酶活性，使戊巴比妥鈉在肝微粒體的氧化代 謝加速，藥物濃度降低，表現為戊巴比妥鈉藥理作用減弱，即催眠潛伏期延長，睡眠持 續時間縮短。而氯霉素則為肝藥酶抑制劑，能抑制肝藥酶活性，導致戊巴比妥鈉藥理作 用增強，即催眠潛伏期縮短，睡眠持續時間延長。【動物】小白鼠 8 只， 1822g【藥品】生理鹽水、 0.75%苯巴比妥鈉溶液、 0.5%氯霉素溶液、 0.5% 戊巴比妥

2、鈉溶液【器材】天平、鼠籠、秒表、注射器 1 ml X 4、5號針頭X 4【方法與步驟 】一、藥酶誘導劑對藥物作用的影響1、 取小鼠 4 只，隨機分為甲、乙兩組。甲組小鼠腹腔注射0.75%苯巴比妥鈉溶液0.1 ml/10g，乙組小鼠腹腔注射生理鹽水0.1 ml/10g，每天1次，共2天。2、 于第三天，給各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥鈉溶液0.1 ml/10g，觀察給藥后小 鼠的反應。記錄給藥時間、翻正反射消失和恢復的時間，計算戊巴比妥鈉催眠潛伏期及 睡眠持續時間。二、藥酶抑制劑對藥物作用的影響1、取小鼠 4只，隨機分為甲、 乙兩組。甲組小鼠腹腔注射 0.5%氯霉素溶液 0.1 ml/10g；

3、乙組小鼠腹腔注射生理鹽水 0.1 ml/10g。2、 30分鐘后，給各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥鈉溶液0.1 ml/10g，觀察給藥后小 鼠的反應。 記錄給藥時間、 翻正反射消失和恢復的時間，計算戊巴比妥鈉催眠潛伏期及 睡眠持續時間。【統計與處理 】以全班結果（睡眠持續時間，分）作分組 t 檢驗，檢驗用藥組與對照組有無顯著性 差異。（參見“數理統計在藥理學實驗中的應用” ）【注意事項 】1、催眠潛伏期為開始給藥到動物翻正反射消失的間隔時間，睡眠持續時間為翻正 反射消失至恢復的間隔時間。2、本實驗過程中，室溫不宜低于 20 C,否則戊巴比妥鈉代謝減慢，使動物不易蘇 醒。3、氯霉素溶液有結晶析出

4、時可在水浴中加熱溶解。4、吸取氯霉素溶液的注射器應預先干燥，否則易結晶堵塞針頭。【思考題 】1、何謂肝藥酶誘導劑與抑制劑？2、試從理論上解釋苯巴比妥及氯霉素對戊巴比妥鈉睡眠時間的影響。實驗二家兔血漿中水酸鈉濃度測定和藥代動力學參數測定【實驗目的】1. 以水酸鈉為例了解血漿藥物濃度隨時間變化的時量關系。2. 了解藥代動力學參數的臨床意義。【實驗材料】1. 動物：家兔1只，雌雄不限，體重（2.5+0.5）kg。2. 器材：試管5支、離心管3支、試管架、小玻棒、10ml吸管、注射器（1 ml、 5ml、l0ml）、手術器械、動脈插管、動脈夾、721分光光度計、離心機3. 試劑和藥品：25履基甲酸乙酯

5、、10液0.02%水酸鈉溶液、10匯氯醋酸溶液、 10%E氯化鐵溶液。【實驗步驟】1. 實驗準備：取離心管3支及試管5支，編號備用，麻醉（烏拉坦4ml/Kg）, 13號離心管及4、5號試管中分別加入10%E氯醋酸7ml2. 手術：頸動脈取血2ml,放入1號離心管3. 給藥：耳緣靜脈注入10%水酸鈉，150mg/Kg取血（5,35min分別取血2ml放入2、3號離心管，4、5試管分別加入蒸餾水及0.02%水酸鈉2ml）4. 離心：2000" 分，5min,取上清液6ml，加入10%E氯化鐵（12滴），比色（5min后， 波長510nm），計算結果。【注意事項】1. 注意頸總動脈插管術。

6、2取血時，要先用0.1%肝素潤濕注射器和針頭，取血后用肝素封管，避免血液凝固，每次取出血第1ml棄去不用，再吸取2ml置于離心管3. 給藥時間及給藥后取血時間要記清。4. 取上清夜時，要先將上清液倒入編號相對應的試管中，再吸取所需的ml數,以免吸入沉淀影響比色，注意吸管要對號使用。5. 計算Vd, CL時注意單位換算。【實驗結果】管號光密度（X）水酸鈉濃度（Y g/100ml標準管（5號）X0.02給藥后5min （2號）X 1C1給藥后35min （3號）X 2C2計算:1、半衰期（t 1/2）:K=y/xC=kxi ,C2=kx2（單位:g/100ml）t0.301t 1/2=（單位： m

7、in）（logC1 logC2）/ t注:k為清除速率常數，y為0.02g/100m1,x為標準管即5號管的光密度值；C1, C2分別為給藥后5、35分鐘取血時的血藥濃度； t為兩次取血的時間差2、表觀分布容積（Vd）:G=CX lg -1（0.301 Xt1/t 1/2）（單位：g/100ml）Vd=D/Co （單位：L/Kg）注：Db為用藥初始劑量（150mg/Kg），t1為用藥后到第一次取血的時間間隔3、清除率（CL）:CL=0.693/t 1/2 X Vd （單位：ml/min.Kg ）實驗三氨茶堿的血藥濃度測定及藥動學 研究【實驗目的】掌握血清中氨茶堿血藥濃度的紫外測定法，掌握血清中

8、茶堿提取法，驗證氨 茶堿的動力學模型，掌握二房室動力學模型的參數計算方法。用有機溶劑將血清 中的氨茶堿提出，用紫外測定法根據標準曲線測出氨茶堿濃度， 用殘差法運用計 算機進行數據處理、曲線描繪及參數計算，從而驗證氨茶堿動力學模型，使大家 對藥動學研究有一初步的了解。【實驗原理】1. 氨茶堿為臨床常用平喘藥，由茶堿與乙二胺縮合而成。在酸性條件下，可用有機溶劑從血清中提取出茶堿，再用堿液將茶堿從有機溶劑中提出。測量入 274和入298處的吸光度（A274為茶堿和本底，即溶劑、血清的吸光度，A298 為本底的吸光度）， A= A274-A298。茶氓壓1飲它旳違2. 氨茶堿經靜脈進入血液，隨血液循環

9、進行組織分布，達到平衡后轉入消除相。 時量曲線呈二房室動力學模型。3. 房室模型是抽象的數學模型，它的劃分與解剖學部位或生理學功能無關。藥 物轉運速率相同或相近的部位可劃分為同一房室。房室模型可以分為一室模型、 二室模型、多室模型。大多數藥物在體的轉運和分布符合二室模型。即藥物靜脈 注射入血后，首先快速進入血流量大的組織，如心、肝、腎、肺、腦等，然后緩慢地向血流量小的組織，如脂肪組織、靜止的肌肉組織等轉移。【實驗材料】1、動物家兔1只，雌雄不限，體重（2.5+0.5 ） kg2、藥品氨茶堿標準液3、試劑O.1mol/L HCIO.1mol/L NaOH異丙醇：氯仿抽提液（5:95 ）。4、儀器

10、754型紫外分光光度計液體渦旋混和器 數學坐標紙一 半對數坐標紙一。【實驗方法】1動物實驗部分1.1取健康家兔1只，稱重，將家兔置于兔臺。1.2在家兔一耳緣注射部位去毛、熱敷和消毒，待血管擴后，以左手拇指與食指 壓住靜脈耳根端，使靜脈充盈，給藥前用 12號針頭自耳靜脈取血1-1.5ml， 7號針頭平行刺入靜脈，抽動針管，見有回血即可推注。對其靜脈注射氨茶 堿 15mg/kg。1.3另一耳用銳利刀片切割取血。分別在給氨茶堿后5、10、20、30、60、120、180、300、420min 取血。1.4分離血清，各管均取血清 0.5ml于15ml試管中，力卩0.1mol/L鹽酸0.2ml、 抽提液

11、5ml，振搖混合，2500r/min離心10min。2血藥濃度測定（紫外分光光度法）2.1吸取下層氯仿液4ml置另一試管中，加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，振搖混 勻，2500r/min 離心 10min。2.2吸取上層堿液，以0.1mol/L NaOH溶液4ml作參比，振搖混勻，2500r/min 離心10mi n。測定其在入274和入298處的吸收度（A274和A298），計算 A。3制作茶堿標準曲線：取5支試管，依次加入茶堿標準液20、40、60、80、100 d， 各加入 0.1mol/L NaOH§液 4ml,終濃度依次為 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5

12、舊/ml， 測定各管的A274和A298,計算 A以茶堿濃度為橫坐標， A為縱坐標描點 繪圖，用Excel軟件求直線回歸方程，即為茶堿標準曲線的直線方程（圖示）。4將測得血清樣品的 A代入標準曲線的方程，求得相應的 C, CX 10即為茶堿 的血藥濃度。以時間為橫坐標，濃度對數為縱坐標，用CAPF軟件描點做圖，判斷氨茶堿在體代謝的房室模型。時間（min ） AC （/ml）血藥濃度（/ml）510203060120240480【注意事項】1. 紫外分光光度計使用前需預熱30min并激發氫燈。2. 振搖混勻藥液時防止濺出并準確加樣。3. 樣品離心前需配平。4. 測量時若更換波長，必須重新調節 0

13、和100%。【討論】1. 氨茶堿的時量曲線呈幾房室模型？為什么？2. 為何要測兩個波長下茶堿的吸光度并取其差值？3. 試述藥動學參數 V1、Vd、t1/2 a、t1/2 B、K10 K12、K21、Cl、AUC的含義。實驗四 體液 pH 對水酸鈉排泄的影響實驗目的】1學習尿液中水酸的檢測方法， 掌握體液 pH 對藥物排泄的影響及其臨床意 義。2 熟悉大鼠代謝籠的使用，鞏固大鼠的各種給藥方法。【實驗原理】水酸鈉經腎臟排泄物為水酸，尿液 pH 對水酸排泄影響非常大，當尿液呈酸 性時僅排泄 5%而尿液呈堿性時則排泄大約 85%。尿液中的水酸遇到三氯化鐵后可生成紫色絡合物， 根據反應后溶液紫色深淺 可

14、以定性分析水酸鈉排泄量的多少。【實驗材料】1.動物 大白鼠，雌雄不限，200300g。2器材 大白鼠代謝籠兩個，天平一個，棉手套一只，大鼠灌胃器兩個， 5 毫升注射器兩個，6號針頭兩個，30ml量筒1個，50ml注射器2個。3 .藥品 5%碳酸氫鈉溶液， 15%氯化氨溶液，（單盲法配制并編號為 A、B）， 2%水酸鈉溶液， 1%三氯化鐵溶液， 5%葡萄糖生理鹽水， 蒸餾水， 苦味酸， 1%速尿。 【實驗方法】1 .取大白鼠兩只稱重并編號。2給其中一只按0.5ml/100g灌胃A藥液，給另一只以同樣劑量灌胃B藥液。3. 30分鐘后給兩只大鼠灌胃 5%葡萄糖生理鹽水 2ml/100g。4. 30分

15、鐘后，分別給兩只大鼠腹腔注射 2%水酸鈉溶液 1ml/100g 及 1%速尿 0.2ml/100g 。5. 收集各鼠30分鐘尿液，將收集的尿液分別用蒸餾水稀釋到 30ml，加1% 三氯化鐵 5ml ，比較紫色深淺。【實驗結果】表2-1 體液pH值對水酸鈉排泄的影響鼠號 體重(g)藥物尿液反應后顏色結果分析1A2B【注意事項】1實驗步驟進行到4后，再將集尿籠插入代謝籠中，以免收集尿液前將集 尿籠污染。2實驗用燒杯、量筒、注射器、集尿籠應清洗干凈，否則影響反應pH,導致實驗結果不準確。【思考題】1. 藥物的排泄途徑有哪些？影響藥物排泄的因素有哪些？2. 體液pH還對藥物的哪些體過程有影響？有何臨床

16、意義？3. 實驗中給予碳酸氫鈉、氯化氨、葡萄糖生理鹽水、速尿等藥物的目的各 是什么？4. 根據反應后溶液紫色深淺為什么可以定性分析水酸鈉排泄量的多少？寫 出水酸與三氯化鐵的反應式。實驗五 酚磺酞藥代動力學參數的測定【實驗目的】測定PSP在家兔體藥代動力學參數。【實驗原理】酚磺酞（Phenolsulfonphthalein, PSP ,又名酚紅。靜脈注射后，不在體代謝，主要經腎近曲小管分泌排泄，屬于一室模型一級動力學消除。PSP在堿性環境中變為紅色，可用可見分光光度計于波長560 nm處進行定量測定。【實驗材料】1、動物家兔1只，2.53.0 kg，雌雄不限2 、藥品0.6%PSP溶液、PSP標

17、準溶液（0.5、1、2卩mol/L ）、3%X巴比妥溶液、稀 釋液（0.9% NaCl 29 ml + 1 mol/L NaOH 1ml ）3、器材兔臺、手術剪刀X 2、止血鉗X 2、眼科鑷子X 2、注射器（5 ml X1、2 ml x 1）、抗凝試管X 5、試管架、離心機、分光光度計、比色杯（0.5 ml X 5）、加液 器（1 ml X 1，250卩l X1）、燒杯、酒精棉球、干棉球、繩X 4、線 【實驗步驟】1、家兔稱重，用 3戊巴比妥（ 1 ml/kg ）耳緣靜脈麻醉，仰臥，固定于兔 板上，切開頸部皮膚，暴露頸淺靜脈，從其下緣穿一線，備取血時用。2 、用1ml干燥注射器從頸淺靜脈取血約

18、1 ml，然后由耳緣靜脈注射0.6 % PSP溶液，按0.4 ml/kg給藥，注射后分別在5、10、15、25分鐘各取血約1 ml， 置于備好的抗凝試管，離心（ 2000轉/分） 10分鐘。3 、PSP標準液的平均吸收系數 K的測定：取PSP標準液0.5、1、2卩mol/L及蒸餾水各1.55 ml，再各加入1 mol/L NaOH 0.05 ml，于波長560 nm處比色，測得吸收度（A），并計算出平均吸收系數（K） 值。4、 取血漿樣品0.1 ml,放入0.5 cm的比色杯，加入稀釋液1.5 ml搖勻(稀釋了 16倍)，于560nm處比色，記錄其吸收度。5、PSP血漿濃度計算：APSP 血漿濃度 (mg/L)=160.35410K(PSP的分子量為354，比色時取血漿0.1ml，稀釋了 16倍)6、藥代動力學參數計算：(1) 計算5、10、15及25分鐘時PSP的血漿濃度(Ct)(2) 以時間(t)與血漿濃度