1、應(yīng)用化學(xué)論文應(yīng)用化學(xué)畢業(yè)論文天然產(chǎn)物論文天然產(chǎn)物化學(xué)論文雙水相萃取藻藍(lán)蛋自與藻藍(lán)蛋自微囊化研究作者姓名:徐長波學(xué)科名稱:應(yīng)用化學(xué)研究方向:天然產(chǎn)物提取與改性摘要 采用鹽析法和雙水相萃取技術(shù)從鈍頂螺旋藻中分離純化藻藍(lán)蛋白(C-Phycocyanin, C-PC)。通過對傳統(tǒng)鹽析工藝的優(yōu)化改進(jìn)，確定了分段鹽析C-PC所需硫酸錢的梯度飽和度，結(jié)果表明:經(jīng)過四步硫酸錢鹽析，C-PC純度為3.55，回收率為47.13%。進(jìn)一步增加鹽析次數(shù)，C-PC純度增加不明顯，Ifu回收率顯著下降。鹽析法分離C-PC的最高純度為3.96，回收率為9.66% o 雙水相萃取是近年來發(fā)展起來的蛋白純化新方法。采用雙水相體

2、系直接從C-PC粗提液中分離純化C-PC，研究了雙水相的類型、成相鹽的種類、聚合物的平均分子量和濃度、成相鹽的濃度、體系pH以及中性鹽的類型和濃度對C-PC分配影響，確定了分離純化C-PC的雙水相類型為聚合物/鹽系統(tǒng)，成相鹽為酒石酸鉀鈉，萃取C-PC的最佳條件是:聚乙二醇濃度為16% (w/w)，平均分子質(zhì)量為2000，酒石酸鉀鈉濃度為21% (w/w)，體系pH為6.0。雙水相萃取次數(shù)的增加有利十C-PC純度提高，二次雙水相萃取后，C-PC純度為3.91，回收率為83.57%。雙水相萃取技術(shù)與二步鹽析相結(jié)合可獲得純度為5.01的C-PC o 以殼聚糖和海藻酸鈉為囊材，對純化后的C-PC進(jìn)行微

3、囊，通過實驗確定了制備C-PC微囊的最佳工藝條件是:殼聚糖的脫乙酞度為74%，轉(zhuǎn)速600r/min，攪拌時間30min，針頭距離凝膠浴液面l Ocm，滴加速度30滴/min,海藻酸鈉濃度2.5% (w/v)，殼聚糖濃度0.6% (w/)，C-PC/海藻酸鈉1/4 (w/w)，CaCI:濃度2.0% (w/v)。 l冬43幅;表19個;參46篇。關(guān)鍵詞:藻藍(lán)蛋白;鹽析;雙水相萃取;微囊【付費索取全文】Q聯(lián)系Q：138113721 Q聯(lián)系Q:139938848 目次引言. .1第1章文獻(xiàn)綜述. 2 1.1 C-PC的研究進(jìn)展. 2 1.1.1 C-PC的結(jié)構(gòu). 2 1.1.2 C-PC提取和純化的

4、研究進(jìn)展. 3 1.2雙水相萃取技術(shù).3 1.2.1雙水相系統(tǒng). 3 1.2.2雙水相萃取技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)展. 5 1.2.3雙水相萃取技術(shù)的發(fā)展趨勢. 7 1.3微囊技術(shù).7 1.3.1微囊的概念.8 1.3.2微囊材料.8 1.3.3殼聚糖/海藻酸鈉微囊. 9 1.4論文研究主要內(nèi)容. 12第2章鹽析法富集藻藍(lán)蛋白. 14 2.1實驗儀器與材料.14 2.1.1實驗儀器.14 2.1.2實驗材料.14 2.2實驗方法.14 2.2.1 C-PC粗提液的制備.14 2.2.2殼聚糖最佳濃度的確定.15 2.2.3 C-PC特征吸收波長的確定. 15 2.2.4 C-PC硫酸錢鹽析梯度的研究.15

5、 2.2.5兩步鹽析.15 2.2.6四步鹽析.15 2.2.7多次鹽析.16 2.2.8分析方法.16 2.3結(jié)果與討論.17 2.3.1 C-PC粗提液的預(yù)處理.17 2.3.2 C-PC特征吸收波長的確定.18 2.3.3不同鹽析梯度對C-PC分離的影響.19 2.3.4兩步鹽析對C-PC分離的影響.19 2.3.5四步鹽析對C-PC分離的影響. 21 2.3.6多次鹽析對C-PC分離的影響. 22 2.4小結(jié).23第3章雙水相萃取藻藍(lán)蛋白. 24 3.1實驗儀器與材料.24 3.1.1實驗儀器.24 3.1.2實驗材料.24 3.2實驗方法.25 3.2.1 C-PC粗提液的制備.25

6、 3.2.2雙水相萃取C-PC . 25 3.2.3分析方法.25 3.3結(jié)果與討論.26 3.3.1雙水相系統(tǒng)類型的確定.26 3.3.2成相鹽的確定. 28 3.3.3聚合物平均分子量的確定.29 3.3.4 PEG 2000濃度的確定.30 3.3.5酒石酸鉀鈉濃度的確定.32 3.3.6體系pH對C-PC分配的影響. 34 3.3.7中性鹽對C-PC分配的影響. 36 3.3.8放大操作實驗.37 3.3.9多效萃取.37 3.3.10制取高純度C-PC的探索.38 3.4小結(jié). 40第4章藻藍(lán)蛋白微囊化研究. 41 4.1實驗儀器與材料. 41 4.1.1實驗儀器.41 4.1.2實

7、驗試劑.41 4.2實驗方法.41 4.2.1殼聚糖脫乙酞度的測量. 41 4.2.2殼聚糖/海藻酸鈉空白微囊的制備. 42 4.2.3殼聚糖/海藻酸鈉微囊粒徑的測定. 42 4.2.4殼聚糖/海藻酸鈉微囊膨脹度的測量. 43 4.2.5 C-PC微囊的制備. 43 4.2.6工藝條件的設(shè)計. 43 4.2.7 C-PC微囊包埋率與載藥量的測定. 44 4.2.8 C-PC微囊體外釋放性能的測定. 44 4.3結(jié)果與討論. 45 4.3.1殼聚糖脫乙酞度對成囊的影響. 45 4.3.2攪拌速度對成囊的影響. 45 4.3.3攪拌時間對成囊的影響. 46 4.3.4滴加速度對成囊的影響. 46 4.3.5針頭與液面距離對成囊的影響. 47 4.3.6殼聚糖/海藻酸鈉微囊徑粒的分布. 48 4.3.7殼聚糖/海藻酸鈉微囊顆粒的膨脹度. 48 4.3.8溶液pH對C-PC微囊性能的影響. 49 4.3.9海藻酸鈉濃度對C-PC微囊性能的影響. 50 4.3.10殼聚糖濃度對C-PC微囊性能的影響. 52 4.3.11投藥量對C-PC微囊性能的影響. 54 4.3.12 CaCI:濃度對C-PC微囊性能的影響.55 4.3.13正交優(yōu)化結(jié)果.57 4.3.14 C-PC微囊形貌.58 4.3.15 C-PC微囊的總釋放研究.59 4.4小結(jié).59結(jié)論.61參考文獻(xiàn).63中國博