1、全自動生化分析儀如何校準1、校準的重要性和必要性2、首先必須明確生化分析儀不論如何先進，它還是一個比較器，它測試出來的標本結果是隨著標準限的設置不同而變化的。所以，在衛生部臨床檢驗中心擬定的“臨床實驗室(定量測定)室內質控工作指南”中明確指出“對測定標本的儀器一定要求進行校準，校準時要選擇合適的(配套的)標準品/校準品；如有可能，校準品應能溯源到參考方法或/和參考物質；對不同的分析項目要根據其特性確立各自的校準頻率?！边@說明校準儀器是室內質控的重要部分，強調了校準工作的必要性和重要性，同時指出了校準的方法和要求。二、確立測定系統的概念對于一個臨床檢測項目，如果所用方法的測定原理、試劑、儀器、校

2、準品中任何一個不同，都可能得到不同的測定結果。因此，測定系統包括測定原理、試劑、儀器、校準品四要素。如果我們想要得到準確可靠的測定結果，而該結果又具有與國際、國內其他實驗室的可比性，應該自己建立一個標準測定系統。在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標準品，即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準品(c.fas),在貝克曼CX-7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準品等。各儀器廠家均有自己的標準測定系統。對于校準品不能亂用，如絕對不能用貝克曼的校準品校準日立生化儀，同樣也不能用寶靈曼的校準品去校準貝克曼生化儀。三、校準品和質控品校準品(Calibrationmaterials)含有已知量的欲測物，用以

3、校準該測定方法的數值，它與該方法及試劑、儀器是相關聯的。校準品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統誤差。因此最好為人血清基質，以減少基質效應造成的誤差。質控品(Controlmaterials)只用于和待測標本同時測定的，為了控制標本的測定誤差，因此要求保存時間十分穩定。前者是校準其值而后者是控制誤差用的。四、校準前準備1 .了解燈泡已使用多久？檢查飄移是否合乎要求；2 .檢查比色杯的清潔及磨損情況？必要時進行更換；3 .用清潔劑泡洗管道4 .測定儀器的精密度及線性是否達到儀器性能要求？5、定值質控血清是否可以校準儀器？6、我們在相同條件下，同時用五個進口產品，每家兩種不同濃度的定值如

4、TP、ALBUREAUAALRGGTCKHBDHLDAMY等，在日立7170A上進行測定(用常規試劑），詳見質控血清對部份常規測定項目（如T、ALBUREACr、UAK、NaCl、ASTALT）結果與靶值比較：表不同廠家定值質控對TP、ALB、ASTALP結果與靶值比較TPALBUREAASTALP偏偏偏偏偏T差%T差T差T差T差汽巴5420544-94康寧17.399.0.5310.56.2汽巴44221-1-20康寧26.894.089.35.768411.765.2寶靈523-805-22曼10.04.85.17.96.458.311.242.7寶靈423-2-1-32曼28.6.883

5、.75.0446.774012.384.7RAND5643746-2-OX19.7.360.8.88.67.3217.71416.1RAND38252-1-3-OX29.336.9.981.65.674412.79417.1Huma744-353-1-n12.186.74.18.78.163.57.5682.2Huma2-2-2-1-2-n29.82.689.82.765.15.085111.7879.1Bio-6031702-22Red139.28.1414.652Bio-41201-2-20Red22.7978.04.440114.398.84* 從總蛋白結果來看RANBOXBio-Red

6、相差為6.45%,而寶靈曼與Bio-Red較為接近；* 從白蛋白結果分析，寶靈曼與Bio-Red相對相差5.75%,與總蛋白結果明顯不同。Bio-Red則與汽巴康寧比較接近。* UREA結果中凡是高值均上不去，分析其原因很可能與我們采用試劑盒的質量有關，所以試劑盒的線性范圍理應成為選擇試劑盒的重要依據之一。但從低值結果分析，也有5%勺偏差（Bio-Red與Human* AST與ALT測定值均低于靶值，這就涉及我們選用什么K值問題。* ALP測定中RANDOX-16.6%）與寶靈曼（2.7%）靶值之間竟相差19.3%,這可能涉及試劑盒選用緩沖液種類，PH值以及所用£值等有關。通過上述結

7、果比較，說明不同廠家生產的定值質控血清靶值之間有的相差較大，提示我們決不能用定值質控血清代替校準品作校準用。六、校準方法例如日立（Hitachi）系列您必須購買寶靈曼（Boehringer）的試劑及其校準的說明書設置參數，用c.f.a.s.校準血清進行校準，即可獲得各項目的校準K值，同時觀察一下各項目測定時反應進程圖，檢查各項目參數設置是否在最佳位置，如不在最佳位置應予以重新設置并測定。此時得到的K值即為準確的校準K值，然后測定待測的10至20份新鮮血清三次取其平均值，應該說此結果是用Hitachi-Boehringer檢測系統所獲的測定值。然后用此血清值校準其它測定系統。表日立7170、BM

8、試劑連續四個月每天進行校正（n=81）K值的變化TAAACUUTCGCCGPLBLTSTreareaAGholluaKGTM36321ean017940232744756S86641D6.6939.7448C21219V%.8.0.1.7.82111153267354327244974492864603511115660.26.16.97.48.46.81.117.911111916.9.1.4.2.0.6.6.97、關于酶活性測定校準問題8、有的主張不進行校準而采用固定K值，有的作者以為應該進行校準。酶活力計算公式如下：酶活力（u/l）=A/minXVx106/（eXvXl）令k=Vx106

9、/（eXv;則酶活力（u/l）=A/minxk常用K值有以下幾種：a）理論K化根據理論摩爾消光系數（&）來計算，如NAD由6.22X103b）實測K值：由于儀器波長的精密及半寬度不同，而應根據實測£值來設定K值c）廠家給的K值：廠家生產試劑盒說明書上提供的K值（有的廠家提供6.3X103）d）校準K值：通過校準物直接校準得到的K值在日立7170A全自動生化分析儀上，可以得到幾種不同的酶K值，見下表表日立7170A全自動生化分析儀上用不同方法得到幾種酶的K值指示物長波理論K值實測K值校準K值LTANADHnm34024442642(8.1%)3026(23.8%)STANADH

10、nm34024442642(8.1%)2775(13.5%)KCNADPHnm34038783878(8.1%)3886(8.3%)GTG4NAmm40514181539(8.5%)1612(13.7%)GTG4NBmm40514751739(17.9%)A4NA405757825LP(PH10mm(8.9%)注：1校準物為寶靈曼c.f.a.s,試劑也用寶靈曼的配套試劑。2括號內數字是該K值與理論K值相比的變化率以上摘自張克堅文章中*從上述K值中不難發現實測K值大于理論K值，這說明生化分析儀的測光系統還存在著一定誤差，如波長、半寬度及光徑等偏差，使儀器達不到理論上的最佳狀態；*校準K值與實測K

11、值之間也存在一定的差距，即使指示物和儀器相同，其差異可能由試劑及校準品造成的；*作者認為最好使用校準K值，但必須由兩個先決條件：1必須使用配套的試劑；2必須使用配套的高質量的校準品，但校準K值應有其溯源性。關于酶活標準品，歐洲標準局（BCR和美國國家標準技術研究院（NIST）均發表了人血清基質的酶活性標準物，相信不久將會有公認的標準（校準）品問世。8、必須擬訂校準計劃（文件）校準工作不是僅進行一次就可萬事無憂一勞永逸，而必須經?；０凑铡芭R床實驗室質量控制（QC的要求（草案）”必須要求擬定校準計劃，其內容包括：1 .建立校準方法選擇合適（配套）的校準品，包括校準品數目、類型和濃度；如有可能校準品應溯源到參考方法或參考物質；確定校準的頻度。至少每六個月進行一次校準；如有下列情況發生時，必須進行校準*改變試劑的種類，或者批號更換了。如果實驗室能說明改變試劑批號并不