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文檔簡介
1、設計性實驗設計性實驗 丹參對垂體后葉素致兔心肌缺血的丹參對垂體后葉素致兔心肌缺血的保護作用保護作用【實驗目的實驗目的】 2/16/2022free teamplate from 2 學習用垂體后葉素造成急性心肌缺學習用垂體后葉素造成急性心肌缺血的實驗方法,觀察藥物抗心肌缺血的實驗方法,觀察藥物抗心肌缺血的作用。血的作用。【實驗原理實驗原理】 2/16/2022free teamplate from 3 垂體后葉素可使全身血管(包括冠狀血垂體后葉素可使全身血管(包括冠狀血管)收縮,靜脈注射后使動物產生急性管)收縮,靜脈注射后使動物產生急性心肌缺血狀態,出現心室肌靜息張力的心肌缺血狀態,出現心室肌
2、靜息張力的增加和發展張力的下降,以及心電圖增加和發展張力的下降,以及心電圖STST段及段及T T波的變化,可作為冠狀動脈痙攣,波的變化,可作為冠狀動脈痙攣,急性發作的心絞痛模型。急性發作的心絞痛模型。 垂體后葉素的注射劑量不同可引起不同垂體后葉素的注射劑量不同可引起不同程度的障礙,劑量不大時,可迅速恢復,程度的障礙,劑量不大時,可迅速恢復,因此可反復在同一動物身上進行多次實因此可反復在同一動物身上進行多次實驗。驗。【材料與方法材料與方法】2/16/2022free teamplate from 4一、實驗動物:家兔一、實驗動物:家兔1 1只只二、器材與藥品:二、器材與藥品:10ml10ml注射
3、器,注射器, 1ml1ml注注射器,手術臺,嬰兒秤,射器,手術臺,嬰兒秤, MedLabMedLab生物生物信號采集分析系統。垂體后葉素注射信號采集分析系統。垂體后葉素注射液,液,2020氨基甲酸乙酯,丹參注射液,氨基甲酸乙酯,丹參注射液,生理鹽水。生理鹽水。三、方法與步驟:三、方法與步驟: 2/16/2022free teamplate from 51.1.取家兔一只,稱重,用取家兔一只,稱重,用25%25%烏拉坦溶液,按烏拉坦溶液,按1g/kg1g/kg(4ml/kg4ml/kg)靜脈注射麻醉,麻醉后將)靜脈注射麻醉,麻醉后將兔背位固定于手術臺上。兔背位固定于手術臺上。2.2.正中切口頸部
4、皮膚,分離右側頸總動脈正中切口頸部皮膚,分離右側頸總動脈, ,遠遠心端結扎,并在近心端夾上動脈夾,以阻斷心端結扎,并在近心端夾上動脈夾,以阻斷血流,用虹膜剪作血流,用虹膜剪作“V”V”形切口,將連于壓形切口,將連于壓力換能器的已充滿肝素生理鹽水的心導管向力換能器的已充滿肝素生理鹽水的心導管向心臟方向插入頸總動脈內,移去動脈夾,觀心臟方向插入頸總動脈內,移去動脈夾,觀察屏幕顯示先出現血壓波形,繼續將導管插察屏幕顯示先出現血壓波形,繼續將導管插向左室腔。向左室腔。3.3.當波形由血壓波變成下沿達當波形由血壓波變成下沿達0mmHg0mmHg附近具有附近具有明顯舒張期而峰頂平坦的波形時,即表明導明顯舒
5、張期而峰頂平坦的波形時,即表明導管口已通過主動脈瓣進入左室腔內,再送入管口已通過主動脈瓣進入左室腔內,再送入導管約導管約0.20.20.4cm0.4cm,若還保持同樣波形則可,若還保持同樣波形則可把心導管結扎固定。把心導管結扎固定。4.4.將心電輸入線的三個針形電報分別插入右前將心電輸入線的三個針形電報分別插入右前肢及右、左后肢皮下,記錄肢及右、左后肢皮下,記錄IIII導聯心電導聯心電(或(或采用頭胸導聯)采用頭胸導聯) 。5.5.MedLabMedLab生物信號采集處理儀參數設置:生物信號采集處理儀參數設置:記錄方式:連續記錄;記錄方式:連續記錄;存盤方式:連續存盤;存盤方式:連續存盤;第第
6、1 1通道:通道: ACAC輸入,放大倍數輸入,放大倍數10001000;第第2 2通道:通道: DCDC輸入,放大倍數輸入,放大倍數200200;采樣速率:采樣速率:1ms1ms。2/16/2022free teamplate from 8 6.6.將頭皮針連接在已注滿生理鹽水的將頭皮針連接在已注滿生理鹽水的10ml10ml注射器上,注射器上,然后用頭皮針頭刺入耳緣靜脈中,并用木夾或膠布然后用頭皮針頭刺入耳緣靜脈中,并用木夾或膠布固定。連續記錄正常心室內壓、心電。固定。連續記錄正常心室內壓、心電。 (左室內壓峰值左室內壓峰值:LVSPLVSP,mmHg,mmHg。由心室壓基線到曲線。由心室壓
7、基線到曲線頂峰高度;頂峰高度;左室舒張末壓左室舒張末壓:LVEDPLVEDP,mmHg,mmHg。心室舒張。心室舒張末或收縮初室內壓轉折點到基線高度;末或收縮初室內壓轉折點到基線高度;左室內壓正左室內壓正負變化速率最大值負變化速率最大值:dp/dtmaxdp/dtmax,mmHg/s,mmHg/s。)。)LVSPLVEDP7.7. 制作心肌缺血制作心肌缺血 由耳緣靜脈注射垂由耳緣靜脈注射垂體后葉素體后葉素1.5U/kg1.5U/kg(用生理鹽水稀(用生理鹽水稀釋到釋到3ml3ml),),3030秒注射完畢。并立秒注射完畢。并立即于注射后即于注射后20s20s、40s40s、1min1min、2
8、min2min、5min5min、10min10min、20min20min、30min30min,分,分別記錄心功能參數及心電圖的變化,別記錄心功能參數及心電圖的變化,特別注意觀察心率、特別注意觀察心率、STST段、段、T T波的波的變化。變化。8.8. 待心功能參數及心電圖恢復正待心功能參數及心電圖恢復正常后,由耳緣靜脈注射解救藥常后,由耳緣靜脈注射解救藥物丹參注射液物丹參注射液2.5ml/kg2.5ml/kg,15min15min后再給同量的垂體后葉素,后再給同量的垂體后葉素,觀察上述同樣時間內心功能參觀察上述同樣時間內心功能參數及心電圖的變化。數及心電圖的變化。【實驗結果】2/16/2
9、02211 實驗結果以曲線表示,對已記錄的實驗結果以曲線表示,對已記錄的實驗結果進行回放重顯、剪輯,對實驗結果進行回放重顯、剪輯,對給藥前后的波形進行測量給藥前后的波形進行測量 以表格形式記錄實驗原始數據以表格形式記錄實驗原始數據 綜合全實驗室的綜合全實驗室的實驗數據實驗數據結果進結果進行行統計處理統計處理藥物對垂體后葉素所致兔心肌缺血的對抗作用藥物對垂體后葉素所致兔心肌缺血的對抗作用組別T波(mv)ST段(mv)心率(次/min)給藥前給藥后 給藥前給藥后給藥前給藥后垂體后葉素生理鹽水組別LVSPLVEDP- dp/dtmax+dp/dtmax給藥前給藥后給藥前給藥后給藥前給藥后給藥前給藥后
10、垂體后葉素生理鹽水【注意事項注意事項】2/16/2022free teamplate from 13 STST段上移多發生在注射垂體后葉素段上移多發生在注射垂體后葉素后,立即至后,立即至1.5min1.5min內,內,5min5min內恢復;內恢復;T T波升高常在注射后立即至波升高常在注射后立即至45s45s之間,之間,25min25min至至1 1小時,恢復正常。小時,恢復正常。參考文獻:參考文獻:1.1.苗戎苗戎, , 陳靜陳靜, , 韓力軍韓力軍, , 張莉張莉. . 復方丹參注射液復方丹參注射液對急性實驗性心肌缺血左室舒張功能的影響對急性實驗性心肌缺血左室舒張功能的影響J. J. 天
11、津中醫天津中醫 , 1998,(03), 1998,(03)2. 2. 苗戎苗戎, ,陳靜陳靜, ,高嵐高嵐. . 復方丹參注射液對心肌缺復方丹參注射液對心肌缺血左室血左室dp/dTmindp/dTmin的影響的影響J. J. 現代中西醫結合現代中西醫結合雜志雜志 , 1998,(07), 1998,(07)3. 3. 魏硯明魏硯明, , 歐陽五慶歐陽五慶, , 張黎張黎, , 王俊王俊, , 申進寶申進寶. . 玉米幼芽提取物對垂體后葉素致家兔心肌缺血玉米幼芽提取物對垂體后葉素致家兔心肌缺血的保護作用的保護作用J. J. 安徽農業科學安徽農業科學 , 2007,(07), 2007,(07)
12、附:配對樣本均數的附:配對樣本均數的t檢驗檢驗 所謂配對樣本(所謂配對樣本(paired sample)是)是指兩個樣本中的觀察對象由于存在指兩個樣本中的觀察對象由于存在某種聯系或具有某些相近的重要特某種聯系或具有某些相近的重要特征而結成對子(征而結成對子(matching),每對),每對中的兩個個體隨機分配接受兩種不中的兩個個體隨機分配接受兩種不同的處理。同的處理。 主要有三種情況主要有三種情況醫學研究中常見的配對樣本:醫學研究中常見的配對樣本:配成對子的兩個個體分別給予兩種不同的處理配成對子的兩個個體分別給予兩種不同的處理(如把同窩、同性別和體重相近的動物配成一(如把同窩、同性別和體重相近
13、的動物配成一對;把同性別、同病情和年齡相近的病人配成對;把同性別、同病情和年齡相近的病人配成一對等);一對等);同一個體同時分別接受兩種不同處理(如同一同一個體同時分別接受兩種不同處理(如同一動物的左右兩側神經、同一份標本分成兩部動物的左右兩側神經、同一份標本分成兩部分);分);同一個體自身前后的比較(如高血壓患者治療同一個體自身前后的比較(如高血壓患者治療前后的舒張壓比較、肝炎患者治療前后的轉氨前后的舒張壓比較、肝炎患者治療前后的轉氨酶比較等)。酶比較等)。 對于配對樣本數據,應該首先計算出對于配對樣本數據,應該首先計算出各對差值的均數。當兩種處理結果無各對差值的均數。當兩種處理結果無差別或
14、某種處理不起作用時,理論上差別或某種處理不起作用時,理論上差值的總體均數應該為差值的總體均數應該為0,故可將配對,故可將配對樣本資料的假設檢驗視為樣本均數與樣本資料的假設檢驗視為樣本均數與總體均數總體均數=0的比較,所用方法為配對的比較,所用方法為配對t檢驗(檢驗(paired t-test) 公式:公式:2/16/202218其中,Sd為差值d的標準差例:例:用簡便法和常規法分別對用簡便法和常規法分別對12份份人尿進行尿鉛含量測定,所得結果人尿進行尿鉛含量測定,所得結果如表如表10-1。問根據現有資料能否說。問根據現有資料能否說明兩種方法檢測結果不同?明兩種方法檢測結果不同? 利用利用Exc
15、el進行醫學統計進行醫學統計t檢驗分析檢驗分析 單擊單擊“工具工具”菜單中的菜單中的“數據分析數據分析”命令可以命令可以瀏覽已有的分析工具。如果在瀏覽已有的分析工具。如果在“工具工具”菜單上菜單上沒有沒有“數據分析數據分析”命令,應在命令,應在“工具工具”菜單上菜單上運行運行“加載宏加載宏”命令,在命令,在“加載宏加載宏”對話框中對話框中選擇選擇“分析工具庫分析工具庫”。 在進行兩個樣本均值相等假設分析時,可使用在進行兩個樣本均值相等假設分析時,可使用t-檢驗分析,根據情況選擇:成對雙樣本均值檢驗分析,根據情況選擇:成對雙樣本均值分析、雙樣本等方差假設分析和雙樣本異方差分析、雙樣本等方差假設分
16、析和雙樣本異方差假設分析。假設分析。 2/16/202222成對雙樣本均值的成對雙樣本均值的t-檢驗分析:檢驗分析: 當樣本中的觀察值存在配對關系時,當樣本中的觀察值存在配對關系時,可以使用可以使用“成對雙樣本成對雙樣本t-檢驗檢驗”。例。例如對一個樣本組在實驗前后進行了兩如對一個樣本組在實驗前后進行了兩次檢測,為確定實驗前后樣本均值是次檢測,為確定實驗前后樣本均值是否相等,應使用成對否相等,應使用成對t檢驗。檢驗。2/16/2022232/16/2022242/16/202225數據錄入:數據錄入:數據分析數據分析 分析時,在分析時,在“工具工具”菜單中,單擊菜單中,單擊“數據分析數據分析”
17、命令。在數據分析對命令。在數據分析對話框中,選擇話框中,選擇t-檢驗:成對雙樣本均檢驗:成對雙樣本均值分析,拉出成對雙樣本均值分析值分析,拉出成對雙樣本均值分析對話框對話框2/16/202226選擇輸入項:選擇輸入項:2/16/202227其中有如下輸入項:其中有如下輸入項: 變量變量1的區域:輸入需要分析的第一的區域:輸入需要分析的第一個數據區域的單元格引用。該區域個數據區域的單元格引用。該區域必須由單列或單行數據組成。可單必須由單列或單行數據組成。可單擊輸入框右面的按鈕,回到電子表擊輸入框右面的按鈕,回到電子表格上自數據開始的單元格向結尾的格上自數據開始的單元格向結尾的單元格拖動。此時變量
18、單元格拖動。此時變量1的區域的區域(A1.K1)自動進入輸入域中。然后單擊自動進入輸入域中。然后單擊輸入域右面的按鈕,回到原對話框。輸入域右面的按鈕,回到原對話框。2/16/202228其中有如下輸入項:其中有如下輸入項: 變量變量2的區域:輸入需要分析的第二的區域:輸入需要分析的第二個數據區域的單元格引用。該區域個數據區域的單元格引用。該區域必須由單列或單行的數據組成。輸必須由單列或單行的數據組成。輸入方法同前。變量入方法同前。變量2的區域為的區域為(A2.K2)。2/16/202229假設平均差:在此輸入期望中的假設平均差:在此輸入期望中的樣本均值的差值。缺省為樣本均值的差值。缺省為0值,即值,即假設樣本均值相同。假設樣本均值相同。標志:如果輸入區域的第一行或標志:如果輸入區域的第一行或第一列中包含有標志項,應選中第一列中包含有標志項,應選中此項:如果輸入區域沒有標志項,此項:如果輸
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