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文檔簡介

1、微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理手冊實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系文件目錄序號(hào)名稱備注1實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度2人員培訓(xùn)考核制度3人員健康監(jiān)護(hù)制度4生物安全檢查制度5實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范6事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度7實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)使用規(guī)定8實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度9實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本安全保管和檔案管理制度10實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度11實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度12實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置坎條13實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度1.目的規(guī)范生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的使用和管理,保證操作人員,實(shí)驗(yàn)對象和環(huán)境安全,確 保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。2 .適用范圍適用于檢驗(yàn)科生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)轉(zhuǎn)及在此環(huán)

2、境下的所有檢測工作。3 .職責(zé)進(jìn)入生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事檢測工作的所有人員嚴(yán)格按照本規(guī)定執(zhí)行。4 .具體要求:4.1 概述本手冊規(guī)定的各項(xiàng)要求,首先是為了保證實(shí)驗(yàn)室的安全運(yùn)行,包括防止實(shí)驗(yàn)室工作 人員的感染、防止實(shí)驗(yàn)室操作的病原微生物對環(huán)境的污染、防止檢測樣品的污染, 保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。本手冊規(guī)定的各項(xiàng)要求,同時(shí)也是為了保證實(shí)驗(yàn)室的工作質(zhì)量,即:實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的各 項(xiàng)結(jié)果和數(shù)據(jù),必須準(zhǔn)確可靠:實(shí)驗(yàn)室出具的檢驗(yàn)報(bào)告,必須明確完整。4.2 實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程開始工作前半小時(shí)。開啟實(shí)驗(yàn)室主電源,使實(shí)驗(yàn)室及生物安全柜投入運(yùn)行。開啟順序:開啟屋頂風(fēng)機(jī)開啟全排風(fēng)開啟空調(diào)開啟安全柜打開房間紫外線燈。工作人員按照

3、下列要求進(jìn)行個(gè)人防護(hù),才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域:( 1)在更衣室中換穿工作服和工作鞋。( 2)在清潔區(qū)內(nèi),根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求做好防護(hù)。( 3)實(shí)驗(yàn)中需使用腐蝕性試劑時(shí),在膠乳手套外加帶一次性塑料手套;需要進(jìn)行可能造成污染材料飛濺的操作時(shí),需加戴防護(hù)面罩。一切準(zhǔn)備工作就緒后,才將標(biāo)本和試劑從冰箱中取出,直接放入生物安全柜中。用完立即歸位,使其在冰箱外停留的時(shí)間盡可能短。4.不打開容器的觀察允許在生物安全柜外進(jìn)行,否則,必須在生物安全柜內(nèi)觀察結(jié)果。確保不含感染性的實(shí)驗(yàn)材料,才可以從實(shí)驗(yàn)室攜出。容器表面應(yīng)用75%乙醇消毒。每一實(shí)驗(yàn)步驟完成后,均應(yīng)清理臺(tái)面。所有用過的試劑均應(yīng)歸還原位;使過的吸管等長形器材放入儲(chǔ)存

4、污物的盒內(nèi);鋒利品放入專用的污物盒;紙巾軟物品放入污物袋;在臺(tái)面上噴灑75%乙醇,保持20 分鐘,然后以紙巾擦干。實(shí)驗(yàn)室的其他表面,也應(yīng)經(jīng)常用75%乙醇擦拭。放置污染物品的容器裝滿時(shí),應(yīng)更換新的容器。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對用過的污染物品進(jìn)行高壓消毒。工作完畢的更衣順序是,先用消毒液浸泡手套5 分鐘,然后依次除去口罩、防護(hù)服、鞋套,放入高壓消毒袋內(nèi),再次浸泡手套后除去手套,用75%酒精棉球擦面部裸露部位。每次工作完畢,生物安全柜內(nèi)用75%酒精擦拭臺(tái)面,消毒液消毒地面,開啟紫外線燈照射 1 小時(shí)后,逐一關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)和通風(fēng)設(shè)備 關(guān)閉順序與開啟順序相反 。4.3 實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)使用

5、鉛筆書寫。記錄內(nèi)容應(yīng)簡明扼要,包括實(shí)驗(yàn)日期,實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)的基本條件等提示記憶的內(nèi)容,并較詳細(xì)地記載觀察到的實(shí)際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結(jié)果。要求字跡應(yīng)清晰,數(shù)字成行成列,以避免錄入錯(cuò)誤。將上述記錄在紙張上的實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)用 80 福爾馬林,密閉熏蒸消毒6 小時(shí)后方可帶出實(shí)驗(yàn)室。或閣著實(shí)驗(yàn)室玻璃窗由清潔區(qū)工作人員抄錄一份。實(shí)驗(yàn)記錄必須在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后 24 小時(shí)內(nèi)錄入計(jì)算機(jī)。 記錄準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和錄入時(shí)間。再按照由實(shí)驗(yàn)室?guī)С龅臅鴮懹涗洠瑴?zhǔn)確地記載實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)。錄入后,書寫記錄保存 1 周,以備查驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)記錄錄入后,一般不得修改。因數(shù)據(jù)記錄錯(cuò)誤,錄入錯(cuò)誤,或?qū)嶋H觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果改變,必須更改記錄時(shí),不要?jiǎng)h除已經(jīng)錄入

6、的描述和數(shù)據(jù),而應(yīng)錄入新的描寫和數(shù)據(jù),并注明更改原因。每月一次,將上月計(jì)算機(jī)的實(shí)驗(yàn)記錄做出備份,備份的實(shí)驗(yàn)記錄不得修改。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期檢查實(shí)驗(yàn)記錄,核對備份與原始的實(shí)驗(yàn)記錄,對記錄中的缺陷提出修改意見。實(shí)驗(yàn)記錄保存一年。已使用的實(shí)驗(yàn)記錄 ( 出具報(bào)告,發(fā)表論文,或以其他方式引用 ) ,在使用后再保存一年。如無特殊必要,備份的實(shí)驗(yàn)記錄一般永久保存。在需要出具正式實(shí)驗(yàn)報(bào)告的場合,報(bào)告由實(shí)驗(yàn)者填寫署名,交實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人記錄核對后簽字,再由單位簽發(fā)人簽字并加蓋公章發(fā)出。4.4 標(biāo)本保管規(guī)則 根據(jù)標(biāo)本的性質(zhì)、目的進(jìn)行保存,每分標(biāo)本分兩份,一份檢測時(shí)使用,另一份備用。標(biāo)本因各種原因損失時(shí),啟用后備標(biāo)本,

7、并重新備份。確定不用的標(biāo)本,采用高壓滅菌后焚燒的方式銷毀。4.5 實(shí)驗(yàn)室裝備保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的定期保養(yǎng)按照提供實(shí)驗(yàn)室設(shè)備廠商的規(guī)定進(jìn)行,主要是對機(jī)械和電器部分進(jìn)行維護(hù)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器設(shè)備的保養(yǎng)由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行。維護(hù)有專業(yè)人員進(jìn)行。生物安全柜的濾器必須按說明書規(guī)定的時(shí)間定期由專業(yè)人員更換,其它儀器設(shè)備也應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要清潔保養(yǎng)。儀器設(shè)備需要更新,需要離開實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行維修,或損壞需要更換,以及必須臨時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室使用,使用完畢后必須撤出實(shí)驗(yàn)室的貴重儀器,在撤出實(shí)驗(yàn)室之前必須以恰當(dāng)?shù)姆绞絿?yán)格消毒,方可處理或重新投入使用。4.6 意外情況處理發(fā)生可疑的實(shí)驗(yàn)室感染事故時(shí),應(yīng)對被感染的人員進(jìn)行隔離觀察。如果判定為

8、法定的傳染病感染,應(yīng)按 傳染病防治法 的規(guī)定報(bào)告,同時(shí)給予有效的隔離治療一、 人員培訓(xùn)考核制度1. 目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員的培訓(xùn)考核2. 適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3. 人員培訓(xùn)考核制度3.1. 實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)新工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前,必須經(jīng)過培訓(xùn),取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的資格。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織進(jìn)行,并指定熟悉實(shí)驗(yàn)室工作的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括:( 1)相關(guān)檢驗(yàn)的國家診斷標(biāo)準(zhǔn)、處理原則以及本手冊內(nèi)容。( 2)實(shí)驗(yàn)室所有設(shè)備的使用方法。( 3)個(gè)人防護(hù)方法。( 4)實(shí)驗(yàn)室基本技術(shù)。( 5)實(shí)驗(yàn)室消毒凈化的方法。3.2. 實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過培訓(xùn)后,由實(shí)驗(yàn)

9、室負(fù)責(zé)人組織考核。通過考核后,還須與有資格的工作人員一同工作3 個(gè)月,才能獲得獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室操作的正式資格。三、 人 員健康監(jiān)護(hù)制度1. 目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員的健康監(jiān)護(hù)2. 適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員健康監(jiān)護(hù)制度2.1 工作人員從事工作前必須進(jìn)行HIV 抗體和甲肝、 乙肝、 丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測,每半年進(jìn)行一次HIV抗體復(fù)檢,并保留血樣一年以上。3.2 工作人員應(yīng)每年進(jìn)行一次體檢,便判斷生物安全危害是否發(fā)生。并將可能涉及生物安全危害的體檢結(jié)果存檔, 以3.3 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立人員健康監(jiān)護(hù)檔案,檔案內(nèi)容包括既往病史、檢測結(jié)果、免疫接種史等,以便對從事涉及生物安全危害人員

10、的健康狀況進(jìn)行跟蹤。3.4 實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。出現(xiàn)下列情況,不應(yīng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室:身體出現(xiàn)開放性損傷;患發(fā)熱性疾病:感冒、上呼吸道感染;其他導(dǎo)致抵抗力下降的狀況:妊娠、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)連續(xù)工作 4 小時(shí)以上或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。4、 生 物安全檢查制度1. 目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室生物安全,保證設(shè)備正常運(yùn)行。2. 適用范圍適用于生物安全涉及的儀器設(shè)備(比如生物安全柜等)3. 生物安全檢查制度實(shí)驗(yàn)室內(nèi),每2 個(gè)月以細(xì)菌培養(yǎng)的方式進(jìn)行安全性檢測。生物安全柜內(nèi)放置平板培養(yǎng)基 2 個(gè),實(shí)驗(yàn)室 4 角和中間各放置1 個(gè),半污染區(qū)放置2 個(gè)。將平皿敞開

11、5 分鐘,然后蓋上,每平板菌落數(shù)平均不得超過2 個(gè),超過標(biāo)準(zhǔn),需要對實(shí)驗(yàn)室或污染部位進(jìn)行甲醛熏蒸消毒。5、 實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范1. 目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室人員的生物安全行為規(guī)范2. 適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3. 生物安全組織管理與行為規(guī)范3.1 組織框架圖單位法人 或授權(quán) 負(fù)責(zé)人J實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人J生物安全員J實(shí)驗(yàn)室工作人員3.2 各類人員相應(yīng)行為規(guī)范( 1)負(fù)責(zé)組織生物安全實(shí)驗(yàn)室的立項(xiàng)、選址,施工隊(duì)的資質(zhì)驗(yàn)證。( 2)負(fù)責(zé)成立生物安全委員會(huì)負(fù)責(zé)生物安全,制定管理制度,監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行情況。( 3)負(fù)責(zé)組織對造成外環(huán)境污染、實(shí)驗(yàn)室污染、人身傷害事故的調(diào)查與處理。( 1)

12、組織制定安全手冊、操作規(guī)程等文件。( 2)按照上述文件要求組織實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作,保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全和實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量的準(zhǔn)確可靠。( 3)組織進(jìn)入生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的人員進(jìn)行業(yè)務(wù)培訓(xùn),保證工作人員熟知微生物的操作規(guī)程和技術(shù),掌握實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的特殊要求并熟練操作,對培訓(xùn)的結(jié)果進(jìn)行考核,決定進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格。( 1)對技術(shù)方法、化學(xué)品、材料與設(shè)備定期進(jìn)行內(nèi)部安全檢查,確保其符合國家和地方的有關(guān)安全與衛(wèi)生政策與標(biāo)準(zhǔn)。一旦發(fā)現(xiàn)不安全因素,立即停止工作并上報(bào)實(shí) 驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。( 2)與有關(guān)人員討論研究安全政策的問題。( 3)確認(rèn)所有工作人員都具有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的資格。( 4)為所有人員提供連續(xù)性的安全

13、要教育與指導(dǎo)。( 5)針對操作程序、技術(shù)方法和各種條件要求的變更,以及新設(shè)備的引進(jìn),為全體 工作人員提供最新的安全文獻(xiàn)和信息資料。( 6)定期檢查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù),組織對實(shí)驗(yàn)室裝備的常規(guī)保養(yǎng)。( 7)所有可能涉及潛在傳染性或有毒物質(zhì)泄露的意外事件與事故,即使沒有人員受傷或暴露,也要予以調(diào)查,并向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人員和安全委員會(huì)報(bào)告調(diào)查結(jié)果和提出建議。( 8)當(dāng)任何實(shí)驗(yàn)室工作人員的疾病或缺勤與工作有關(guān),并被記錄為可能的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染時(shí),協(xié)助隨訪調(diào)查其疾病或缺勤情況。( 9)確保在發(fā)生傳染性物質(zhì)濺灑其他事件時(shí),監(jiān)督消毒凈化程序得到正確執(zhí)行;并 對這類意外事件和事故進(jìn)行詳細(xì)的書面記錄。( 10)確保

14、任何需要修理和維護(hù)的儀器設(shè)備在消毒與凈化之后方可運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。生物安全員由主管檢驗(yàn)師以上的人員承擔(dān),必須具備如下資質(zhì):具有實(shí)際工作的經(jīng)驗(yàn);對操作的微生物有全面、完整的了解;具有組織實(shí)驗(yàn)室工作的能力;對工作有高度的責(zé)任心。( 1)生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室,只允許進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室目的規(guī)定的操作,與此無關(guān)的活動(dòng)一律不得進(jìn)行。( 2)必須按規(guī)定進(jìn)行個(gè)人防護(hù),方得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。( 3)保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔,每項(xiàng)工作完成之后,必須清理和清潔臺(tái)面,離開實(shí)驗(yàn)室( 4)注意個(gè)人的健康狀況,出現(xiàn)身體不適情況,應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。( 5)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食、吸煙、訪客和喧嘩。實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求( 1)必須了解實(shí)驗(yàn)室安全原

15、理,熟悉本手冊的各項(xiàng)規(guī)定,熟記緊急情況下的正確應(yīng)對措施。( 2)掌握病原微生物操作的基本要求,正確、安全地實(shí)用標(biāo)本,避免污染,以獲得準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。( 3)必須熟悉相關(guān)實(shí)驗(yàn)的國家標(biāo)準(zhǔn),能夠完成標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的任務(wù)。( 4)一旦發(fā)生意外,立即向生物安全員匯報(bào)。4、個(gè)人防護(hù)程序4.1 個(gè)人防護(hù)用品的使用要求4.2 個(gè)人防護(hù)用品的穿戴順序4.3 個(gè)人防護(hù)用品脫卸順序六、 事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度1、目的糾正檢驗(yàn)工作中的差錯(cuò),及時(shí)處理責(zé)任事故,吸取事故的教訓(xùn),確保檢驗(yàn)設(shè)備和人員的安全。2、范圍適用于檢驗(yàn)工作中出現(xiàn)的事故分析報(bào)告、調(diào)查和處理。3、職責(zé)3.1 事故責(zé)任部門負(fù)責(zé)人填寫事故報(bào)告單

16、,報(bào)告事故發(fā)生的原因及采取的措施。3.2 業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和有關(guān)科室負(fù)責(zé)人協(xié)助中心負(fù)責(zé)人做好事故的調(diào)查處理工作。4、工作程序4.1 事故分類凡違反各項(xiàng)規(guī)定所造成的事故均為責(zé)任事故,按其經(jīng)濟(jì)損失和人身傷害和大小分為 以下幾種:大小事故界限表損失情況小事故一般事故大事故重大事故經(jīng)濟(jì)損失w 100 元1001000元100010000元A 10000元人身傷亡受工 人休,一 一血<:一一人受傷,休 工3日以上兩人受傷或一人 受傷,休工1-6個(gè) 月三人以上受傷, 休工一年以上, 或一人致殘或死 亡。4.2 事故的處理4.2.1 事故發(fā)生后,應(yīng)立即采取有效措施,防止事態(tài)擴(kuò)大,搶救受傷人員和儀器設(shè)備,

17、 報(bào)告上級(jí)領(lǐng)導(dǎo)。4.2.2 事故發(fā)生3日內(nèi),事故責(zé)任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓(xùn)、責(zé)任,并由 發(fā)生事故科室填寫事故報(bào)告單,報(bào)業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科。4.2.3 事故發(fā)生后5日內(nèi),由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科協(xié)助中心負(fù)責(zé)人主持召 開事故分析會(huì),對事故進(jìn)行分析并對事故責(zé)任人作出處理。事故責(zé)任科室采取糾正 措施,防止類似事故再發(fā)生。4.2.4 重大事故發(fā)生后一周內(nèi),由檢驗(yàn)科負(fù)責(zé)人向上級(jí)主管部門送交事故處理專題 報(bào)告。4.2.5 事故報(bào)告處理單等記錄材料由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科歸檔保存。大事故和重大事故 記入事故責(zé)任人技術(shù)檔案。7、 實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)使用規(guī)定1. 目的規(guī)范生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的使用和管理

18、。2. 適用范圍適用于生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室。3. 具體要求:3.1 在具有生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室門口加貼專門的生物安全警示標(biāo)識(shí), 以避免無關(guān)人員 進(jìn)入相關(guān)區(qū)域,造成感染的危險(xiǎn)。3.2 在有可能對人員造成威脅的生物標(biāo)本儲(chǔ)存處加貼生物安全警示標(biāo)識(shí), 以防無關(guān)人 員將危險(xiǎn)標(biāo)本帶入安全區(qū)域?qū)θ藛T造成威脅。8、 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度1. 目的確保生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的正常運(yùn)行、實(shí)驗(yàn)人員、物品和環(huán)境的安全2. 適應(yīng)范圍適應(yīng)于生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室。3. 職責(zé)進(jìn)入生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室工作的所有工作人員嚴(yán)格遵照本管理制度執(zhí)行。4. 基本制度4.1 在主實(shí)驗(yàn)室設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。入口處貼有醒目的生物危險(xiǎn)標(biāo)志。4.2

19、非實(shí)驗(yàn)室有關(guān)人員和物品不得進(jìn)入。4.3 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得進(jìn)食和飲水,或者進(jìn)行其他與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)。4.4 實(shí)驗(yàn)室工作人員、 外來合作者、 進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室及其崗位之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的批準(zhǔn)。4.5 實(shí)驗(yàn)過程中,嚴(yán)格按有關(guān)操作程序操作,降低剪除和氣溶膠的產(chǎn)生。4.6 用移液器吸取液體,嚴(yán)禁口吸。4.7 實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須是經(jīng)受過專業(yè)培訓(xùn)的技術(shù)人員。 在獨(dú)立進(jìn)行工作前還需在中高級(jí)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行上崗培訓(xùn),達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn),方可開始工作。4.8 實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須被告知實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)并接受實(shí)驗(yàn)室安全教育, 自愿從事實(shí)驗(yàn)室工作。4.9 實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的所有制度、

20、規(guī)定和操作規(guī)程。4.10 實(shí)驗(yàn)室的工作人員在開始工作前必須留本底血清進(jìn)行有關(guān)的檢測,以后定期復(fù)檢。如有疫苗必須進(jìn)行免疫注射。4.11 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室前必須經(jīng)可行的消毒方法進(jìn)行消毒。4.12 工作前應(yīng)消毒,活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒。5. 實(shí)驗(yàn)室特殊管理制度5.1 進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)室時(shí), 應(yīng)禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室, 或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可入內(nèi),免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的人員不許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)同意方可入內(nèi)。5.2 實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前必須進(jìn)行有效的培養(yǎng)和模擬訓(xùn)練。 掌握預(yù)防暴露和暴露后的消毒處理程序。5.3 實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)接受必要的免疫接種和相應(yīng)的抗體水品測定。5

21、.4 實(shí)驗(yàn)室事故處理:工作人員在操作過程中發(fā)生意外,如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標(biāo)本濺及體表和口鼻眼內(nèi)、衣物污染實(shí)驗(yàn)臺(tái)面等均視為安全事故,應(yīng)視事故類型的不同情況,立即進(jìn)行緊急處理。具體措施按實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案執(zhí)行。5.5 填寫意外情況登記與處理記錄表,并按規(guī)定報(bào)告給有關(guān)部門。5.6 處特殊情況外,禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用銳器。5.7 剩余的標(biāo)本應(yīng)密封后置于適當(dāng)條件下保存。5.8 實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)使用鑒定合格的二級(jí)生物安全柜。5.9 實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維修前必須嚴(yán)格消毒,方可運(yùn)出。9、 實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種和生物樣本安全保管和檔案管理制度1、 目的規(guī)范 實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種 和生物樣本的保管和檔案管理2、 適

22、用范圍實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種 和生物樣本的處理和檔案管理3、 實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種 和生物樣本的保管3.1 按國家規(guī)定可以保存的菌(毒)種,由指定的專人負(fù)責(zé)登記、保存和管理。按期傳代、鑒定,必須在無菌室或接種罩內(nèi)進(jìn)行,并做好有關(guān)記錄。在保存過程中發(fā)現(xiàn)菌(毒)種變異或死亡,應(yīng)及時(shí)上報(bào)科長和中心主任。3.2 本區(qū)檢出的地方菌(毒)株應(yīng)及時(shí)上報(bào),因工作需要暫時(shí)保留的菌(毒)株也應(yīng)按上級(jí)規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行銷毀處理。新發(fā)現(xiàn)的菌(毒)株,要做好原始記錄,并上報(bào)主管部門復(fù)核確認(rèn)。3.3 菌(毒)種必須每種設(shè)一記錄卡,其內(nèi)容包括:名稱、編號(hào)、來源、分離日期、引進(jìn)日期、鑒定日期、鑒定結(jié)果、鑒定者、審核者、傳代情況、所用培養(yǎng)基

23、、保存方法、溫度、使用轉(zhuǎn)移及銷毀情況、保存者、部門負(fù)責(zé)人等。3.4 向上級(jí)主管部門申請索取菌(毒)種和向下級(jí)有關(guān)部門發(fā)放菌(毒)種時(shí),應(yīng)有2 人參加辦理,嚴(yán)格執(zhí)行國家有關(guān)規(guī)定,手續(xù)要完備,并認(rèn)真做好記錄備查。3.5 一、二類菌(毒)種,應(yīng)派專人向提供單位領(lǐng)取,不得郵寄;三類菌(毒)種的郵寄必須持有郵寄單位證明,并按照菌(毒)種郵寄與包裝的有關(guān)規(guī)定辦理。3.6 未經(jīng)上級(jí)批準(zhǔn),任何單位及個(gè)人不得以工作之便,進(jìn)行國際間各類菌(毒)種交流,做好菌(毒)種安全防范工作。4、 檔案管理制度4.1 、非實(shí)驗(yàn)室人員不得隨意查看實(shí)驗(yàn)室記錄4.2 、實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)妥善保存各種樣品登記本、報(bào)告單及實(shí)驗(yàn)室原始記錄,不

24、得擅自修改和銷毀4.3 、專人負(fù)責(zé)保管感染者檔案4.4 、未經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)不得向無關(guān)人員或單位提供任何實(shí)驗(yàn)室及感染者信息4.5 、 HIV 抗體初篩實(shí)驗(yàn)室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果,須進(jìn)一步確認(rèn),確認(rèn)前不得出具陽性報(bào)告及告知受檢者本人或有關(guān)單位十、 實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度1. 目的規(guī)范廢棄物處理2. 適用范圍尖銳器具和其他廢棄物的處理。3. 具體方法:3.1 尖銳器具的處理3.2 廢棄物的處理十一、實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度1. 目的規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的消毒隔離工作。2. 適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室。3. 職責(zé)所有工作人員都必須遵從本規(guī)程。4. 具體步驟4.1 實(shí)驗(yàn)室基本要求

25、4.2 消毒方法高壓消毒30 分鐘。其他器材方入有效氯為 2000mg/L 的含氯消毒液內(nèi)浸泡 1 小時(shí)以上。處理時(shí)應(yīng)避免皮膚損傷。高壓消毒30 分鐘。 防護(hù)鏡浸泡在75乙醇或有效氯為1000mg/L 的含氯消毒劑中,作用 30-60 分鐘。A1.5W,距紫外燈1米處照射強(qiáng)度A 70W限。高壓消毒30 分鐘,消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。5. 實(shí)驗(yàn)室高壓消毒安全操作5.1 使用前應(yīng)了解并掌握高壓鍋的原理及操作規(guī)則, 以及不正確使用而導(dǎo)致的災(zāi)難性后果。5.2 按照操作規(guī)程使用高壓鍋“編集”鍵,然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度,然后按“實(shí)行”鍵,把所設(shè)溫度存進(jìn)程序。“編集”鍵,然后按上下鍵調(diào)節(jié)到

26、滅菌所需時(shí)間,然后按“實(shí)行”鍵,把所設(shè)時(shí)間存進(jìn)程序。“實(shí)行”鍵執(zhí)行滅菌程序,此時(shí)“滅菌”燈閃爍。5.3 高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時(shí)不得離開崗位; 在日常使用過程中,必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,并按照規(guī)定進(jìn)行設(shè)備的維護(hù)。每 1 年保養(yǎng)一次,每月檢測一次消毒效果。5.4 高壓鍋的物品不得放的過滿,否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后,高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。5.5 定期檢查高壓鍋,以確保其正常工作,防止意外事故發(fā)生,保證消毒滅局效果。5.6 高壓滅菌安全操作步驟 30 分鐘,時(shí)間和溫度不得超過設(shè)定值,否則滅菌袋會(huì)融化,清理困難。十二、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案1目的規(guī)范緊急情況的處理工作。2適用范圍

27、微生物實(shí)驗(yàn)室和微生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室。3職責(zé)遇有緊急情況所有工作人員嚴(yán)格按此規(guī)程處理。4具體要求:4.1 造成或可能造成實(shí)驗(yàn)室污染, 但未造成人身傷害的實(shí)驗(yàn)室事故, 由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。例如實(shí)驗(yàn)過程中,由于標(biāo)本、試劑溢出濺落造成操作臺(tái)或地面的污染等,應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾,等消毒液徹底浸泡30 分鐘后,對污染的 物品進(jìn)行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室意外情況登記與處理記錄表,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理行動(dòng),并檢查處理效果。4.2 在沒有強(qiáng)毒微生物時(shí),再實(shí)驗(yàn)室內(nèi)受到意外傷害,例如割傷、燒傷、燙傷等,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作,用消毒液清洗

28、未破損的皮膚表面,傷口以碘伏消毒,眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。有在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員或派人迅速著裝進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,清除造成傷害的原因,清理實(shí)驗(yàn)材料,幫助受傷人員緊急處理并撤離實(shí)驗(yàn)室。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī),并將受傷原因及接觸微生物的情況通報(bào)負(fù)責(zé)人。對其進(jìn)行恰當(dāng)而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復(fù)之前,不得重新進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。實(shí)驗(yàn)室在經(jīng)過整理,消除了造成傷害的故障之后,方可重新使用。4.3 傷害事故可能導(dǎo)致被強(qiáng)毒微生物感染,例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體,首先進(jìn)行局部處理,用肥皂和水清洗污染的皮膚,擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液,用肥皂或清水沖洗,用消毒液浸泡或涂抹消毒,并包扎

29、傷口。在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面等情況,首先使用噴淋裝置,盡快將污染物沖洗掉,然后再進(jìn)行局部處理。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)向上級(jí)部門報(bào)告,對受傷害者進(jìn)行隔離觀察,同時(shí)根據(jù)情況預(yù)防性用藥,并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評(píng)價(jià)和處理方案。4.4 實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶膠污染,如壓力容器或管道破裂等,立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,疏散現(xiàn)場的所有人員,對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員。至少在1 小時(shí)內(nèi),任何人員不得進(jìn)入現(xiàn)場,以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內(nèi)的警示標(biāo)志。在生物安全員的監(jiān)督下進(jìn)行消毒、凈化處理;執(zhí)行這項(xiàng)工作

30、時(shí)應(yīng)當(dāng)穿戴合適的防護(hù)服及呼吸防護(hù)用具。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員除立即采取對應(yīng)措施外,應(yīng)向上級(jí)部門報(bào)告,填寫意外情況登記與處理記錄被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時(shí),用布或紙巾覆蓋,爾后將消毒劑傾倒其上,放置30 分鐘。其后即可清除掉,玻璃碎片應(yīng)當(dāng)用鑷子清理。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。破碎物品清理時(shí)如果使用了簸箕,應(yīng)將其進(jìn)行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡 24 小時(shí)。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把,放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應(yīng)佩戴手套。4.6 如果實(shí)驗(yàn)室的紀(jì)錄表格、 其他印刷品或書面材料遭到污染, 在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤后,應(yīng)當(dāng)將其棄入污染廢棄物容器。4.7 試管破碎于密閉式安全離心杯中所有密

31、閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發(fā)生了破損,應(yīng)當(dāng)將其蓋子擰松;爾后,將整個(gè)離心杯高壓滅菌。4.8 蓄意破壞堅(jiān)固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入,都是合適的防范措施。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員,視破壞種類按照上述方法進(jìn)行處理,并詳細(xì)填寫意外情況登記與處理記錄表。十三、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(一)艾滋病初篩檢測實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程1. 目的保證艾滋病病毒抗體ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。2. 適用范圍艾滋病病毒抗體ELISA實(shí)驗(yàn)。3. 具體要求3.1 樣品采集 樣品采集安試劑盒要求采集。采血時(shí)注意安全,用一次性注射器謹(jǐn)慎操作,防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。血樣如即時(shí)用

32、可存于普通冰箱,如要長期保存,分離血清置于 -20 及以下。同時(shí)做好記錄。3.2 樣品運(yùn)送樣品轉(zhuǎn)送,除特殊需要外,必須是血清或血漿,置于帶有蓋帽的試管內(nèi),或?qū)⑺芰显嚬苡镁凭珶舴馑溃乐箻悠妨鞒觥T嚬苌蠘?biāo)明姓名、時(shí)間、編號(hào),將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理,在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì),以免碰碎,容器外標(biāo)有HIV 檢測專用字樣和生物危害標(biāo)志。路途較遠(yuǎn)或氣候炎熱時(shí),容器應(yīng)置于4 以下運(yùn)送。這樣同時(shí)附送檢單。3.3 樣品登記和處理冰箱中,如要貯存,置于 -20 冰箱。3.4 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備3.5 加樣和稀釋根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標(biāo)板條固定在板架上,為了不損壞洗扳機(jī),每道上的酶標(biāo)板

33、條必須保持完整不足部分可用廢棄的微孔添充 ,檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符,按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測樣品,注意:空白只加標(biāo)本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴(yán)格按照試劑盒說明書規(guī)定的操作,一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準(zhǔn)確,小心不要使吸頭碰著酶標(biāo)板空上是包被抗原。為保證加樣的準(zhǔn)確,最好使用多孔道加樣器,使用時(shí)注意防止吸頭間的交叉污染。3.6 溫育 貼好封板膜, 按照試劑盒要求的溫度和時(shí)間進(jìn)行溫育, 最好選擇濕育方法。3.7 洗板開啟洗板機(jī)前,先檢查洗板機(jī)廢液瓶是否已排空,開啟后先用蒸餾水沖洗管道,再換上洗液瓶。按照試劑盒的要求,選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸

34、泡時(shí)間,根據(jù)所用酶標(biāo)板的條數(shù)確定洗板道數(shù),根據(jù)酶標(biāo)板的位置調(diào)節(jié)洗頭的位置,然后開始洗板,洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道。3.8 加酶結(jié)合物對于二步法ELISA 實(shí)驗(yàn)需加酶結(jié)合物,按試劑盒要求完成。3.9 加底物洗好板后應(yīng)立即加底物,需加自配的底物應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。3.10 終止反應(yīng) 在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)用試劑盒中的或根據(jù)要求自行配置的終止液終止反應(yīng)。3.11 酶標(biāo)儀讀物 按照試劑盒的要求選擇濾光片, 確定空白孔位置, 選擇合適達(dá)的打印報(bào)告格式,讀數(shù)并打印結(jié)果。3.12 所用儀器在使用后及時(shí)填寫使用記錄。3.13 結(jié)果判斷計(jì)算± 10%的標(biāo)本為灰色帶反應(yīng)。陽性及灰色反應(yīng)區(qū)標(biāo)本,用原有的試劑盒另一種試劑

35、重復(fù)試驗(yàn)。3.14 結(jié)果登記和報(bào)告將試驗(yàn)結(jié)果登記在記錄本和標(biāo)本試劑記錄本上,將OD直打印結(jié)果貼在原始記錄表上,檢查原始記錄表是否填寫完整,操作者,復(fù)核者簽字。陰性結(jié)果出具HIV 抗體篩查報(bào)告陰性,陽性或疑問結(jié)果填寫 HIV 抗體篩查陽性送檢單,由專入送疾控中心進(jìn)行確認(rèn)。3.15標(biāo)本留存轉(zhuǎn)送 陰性標(biāo)本收集血清冷凍保存一年。并填寫陰性血清保存記錄表,陽性標(biāo)本收集血清封口包好,冷藏運(yùn)送送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。4. 支持性文件全國艾滋病監(jiān)測工作規(guī)范艾滋病實(shí)驗(yàn)室安全操作及防護(hù)措施(二) 、結(jié)核桿菌實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)程1. 實(shí)驗(yàn)室管理制度( 1)實(shí)驗(yàn)室入口處必須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志,注明危險(xiǎn)因子,生物安全級(jí)別,試驗(yàn)室負(fù)責(zé)

36、人和相關(guān)負(fù)責(zé)人姓名和電話。( 2)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有明顯的區(qū)域劃分,清潔區(qū),辦污染區(qū)和污染區(qū)。( 3)無論進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)間長短,必須填寫工作日志。要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的一切操作規(guī)程。( 4)進(jìn)行結(jié)核菌操作時(shí),需有兩名工作人員同時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,盡量避免單獨(dú)工作。( 5)在對大批量的痰標(biāo)本和菌株進(jìn)行分離培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)前,英語中心新主任和實(shí)驗(yàn)室主任討論,必要時(shí)加強(qiáng)預(yù)防措施。( 6)試驗(yàn)室人員應(yīng)做結(jié)核菌素試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí),應(yīng)接種卡介苗,并做好登記記錄。 ( 7)外來進(jìn)修,參觀人員必須學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室的一切規(guī)章制度和有關(guān)操作規(guī)程,經(jīng)試驗(yàn)室主任批準(zhǔn)方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。2. 標(biāo)本采集人員安全要求( 1) 標(biāo)本采集人員的防護(hù):痰

37、標(biāo)本有病人自行留取,采集咽拭子等特殊標(biāo)本,采集人員應(yīng)穿防護(hù)服,戴一次性口罩,帽子,戴醫(yī)用手術(shù)手套。2)采集標(biāo)本污染器材的處理:采集標(biāo)本的痰盒,試管等污染器材均需高壓滅菌處理。3. 標(biāo)本運(yùn)送安全要求痰標(biāo)本需留置在特制的痰盒內(nèi)(直徑4cmi高2cm的光口蓋密閉的塑料盒),并放置在專用的痰標(biāo)本運(yùn)送箱內(nèi) , 運(yùn)送過程中切勿倒置, 嚴(yán)防痰液外溢。由有專人送至痰檢實(shí)驗(yàn)室 , 標(biāo)本送達(dá)后痰標(biāo)本運(yùn)送箱及時(shí)用乙醇或是碳酸等化學(xué)消毒劑或高壓的辦法徹底消毒。4. 實(shí)驗(yàn)操作安全要求( 1)結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室要求結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)為生物安全田級(jí)實(shí)驗(yàn)室,用于臨床診斷,教學(xué),屬中度危險(xiǎn).應(yīng)具備安全設(shè)備, 緩沖間實(shí)驗(yàn)室條件

38、應(yīng)滿足工作任務(wù)的要求, 有完善的試驗(yàn)設(shè)施, 試驗(yàn)室的環(huán)境應(yīng)清潔, 衛(wèi)生 , 安靜 , 無污染 , 試驗(yàn)室內(nèi)的管線設(shè)置應(yīng)整齊, 要有安全管理措施和報(bào)警, 應(yīng)積及急救設(shè)施, 房間數(shù)量不少于七間 , 包括實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備室 , 培養(yǎng)機(jī)制備室 , 顯微鏡檢查室 , 圖片檢查室 , 接種室 , 培養(yǎng)室高壓消毒室等。具備完善的質(zhì)量保證體系中應(yīng)有明確的分級(jí)責(zé)任制度, 以確保檢驗(yàn)的工作質(zhì)量保證檢驗(yàn) , 復(fù)核 , 科研結(jié)果等各項(xiàng)報(bào)告的準(zhǔn)確可靠性。( 2)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備及功能的要求結(jié)核菌素檢查時(shí)必須在二級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行, 無菌操作內(nèi)禁放雜物 ,并應(yīng)制定地面, 門窗 , 墻壁 , 設(shè)施等的定期清潔, 滅菌規(guī)程 , 操作間沒有紫外線燈 ; 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)光線明亮

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