1、Z作業測評固效果1.2014濰坊聯考為提高我國稻米的含鐵量，通過農桿菌介導將菜豆的鐵結合蛋白基因導入了一個高產粳稻品種中。獲得了高含鐵量轉基因水稻株系，下圖為培育過程。請分析并回答問題：(1)獲取重組載體用到的“手術刀”是_。過程用_法將重組載體導入愈傷組織細胞。(2)重組載體中的標記基因的作用是_。檢測目的基因是否轉錄，需用_作探針。(3)圖中過程須在_條件下進行，培養基中除加入營養物質外，還需添加植物激素，作用是_。(4)過程除了用秋水仙素或低溫誘導來處理，還可以采用_技術，該技術常用的誘導劑是_。解析：將目的基因導入植物細胞常用的方法是農桿菌轉化法，檢測目的基因的轉錄，常用分子雜交的方法

2、，基因探針就是用同位素標記的目的基因，該題的目的基因是鐵結合蛋白基因。過程是植物組織培養須在無菌條件下進行，培養基中的植物激素主要是生長素和細胞分裂素，主要用于促進細胞的生長和分化，通過植物體細胞雜交技術可以培育多倍體，常用聚乙二醇作誘導劑，也可以用離心、振動、電刺激等物理手段誘導。答案：(1)限制性核酸內切酶農桿菌轉化(2)檢測目的基因是否導入受體細胞同位素標記的鐵結合蛋白基因(3)無菌促進細胞分裂、生長、分化(4)植物體細胞雜交聚乙二醇2下圖是利用基因工程方法培育抗蟲棉的過程。請回答相關問題：(1)從蘇云金芽孢桿菌的DNA上獲取抗蟲基因，需要用到的工具是_，此工具主要是從_生物中分離純化出

3、來的，它能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的_鍵斷開。(2)構建重組質粒時，常用Ti質粒作為載體，是因為Ti質粒上具有_，它能把目的基因整合到受體細胞_。(3)E過程是利用_技術完成的，要確定抗蟲基因導入棉花細胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體水平上還需要做_實驗。(4)將目的基因導入植物細胞，除采用上圖中的方法外，還可采用_法和花粉管通道法。解析：(1)限制酶用于切割DNA分子，獲取目的基因。限制酶主要從原核生物細胞中獲取。限制酶可斷開磷酸二酯鍵，將DNA分子切開。(2) Ti質?？蓪DNA片段整合到植物細胞的染色體DNA上，故將目的

4、基因借助Ti質粒導入植物細胞中。(3)E過程利用了植物組織培養技術?？砂押οx接種到轉基因植株上，以檢測轉基因植株的抗蟲基因是否正常表達。答案：(1)限制酶原核磷酸二酯(2)TDNA片段染色體DNA上(3)植物組織培養抗蟲的接種(4)基因槍3轉基因生物可作為生物反應器，用來生產人們所需的藥用蛋白，如激素、抗體、疫苗、酶等，甲圖是通過生物工程培育能產生人胰島素的煙草的過程。(1)構建表達載體的A過程中，可選用不同限制酶，如乙圖所示過程，采用EcoR I和EcoR V酶切含有目的基因的DNA和質粒，這樣可以防止酶切產物在加入DNA連接酶后，出現_；若在圖中只使用一種DNA連接酶，應選用_(填“Eco

5、liDNA連接酶”或“T4 DNA連接酶”)。(2)D過程采用的方法是_，如受體細胞是單子葉植物體細胞一般不采用該方法，原因是_；E過程體現的生物學原理是_。(3)如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，F過程應該用_作為探針。解析：(1)用不同的限制性核酸內切酶切割質粒和目的基因，形成的黏性末端不同，再用DNA連接酶連接，可以防止質粒和含目的基因的外源DNA自身環化。若在圖中只使用一種DNA連接酶，應選用T4DNA連接酶，因為T4DNA連接酶既可以連接黏性末端，也可以連接平末端。(2)圖中目的基因導入植物細胞用的是農桿菌轉化法。受體細胞若是單子葉植物體細胞一般不采用農桿菌轉化法，因為大

6、多數農桿菌對單子葉植物沒有感染能力。植物組織培養的理論基礎是細胞的全能性。(3)檢測目的基因是否導入受體細胞時，應用放射性同位素標記的人胰島素基因作探針。答案：(1)質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化T4DNA連接酶(2)農桿菌轉化法單子葉植物傷口處細胞不分泌酚類物質，不能吸引農桿菌移向這些細胞(或大多數農桿菌對單子葉植物沒有感染能力)細胞全能性(3)放射性同位素標記的人胰島素基因4下圖為培育轉基因抗蟲棉的技術流程，請據圖回答：(1)質粒上標記基因的作用是_。(2)過程是_，這是基因工程的核心步驟，其目的是_。(3)過程采用最多的方法是_，檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞DNA分子上的方法

7、是_。(4)過程的培養基除含有必需的營養物質、瓊脂外，還需要添加_，過程的實質是_。解析：(1)基因工程中運載體上的標記基因的作用主要是可以通過標記基因檢測目的基因是否導入成功。(2)過程是基因表達載體的構建過程，主要的目的是使目的基因在受體細胞中穩定保存并遺傳給后代，同時能夠使目的基因能夠表達和發揮作用。(3)過程是將重組質粒導入受體細胞，最常用的方法是采用農桿菌轉化法，檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞DNA分子上采用DNA分子雜交的方法。(4)是植物組織培養的脫分化過程，在培養過程中必須要添加植物激素。過程是再分化過程，實質是基因的選擇性表達。答案：(1)檢測受體細胞中是否含有目的基因(2)

8、基因表達載體的構建使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發揮作用(3)農桿菌轉化法DNA分子雜交(4)植物激素基因的選擇性表達5如圖所示為科學家利用番茄葉細胞和馬鈴薯葉細胞雜交培育“番茄馬鈴薯”植株的過程，請回答下列問題。(1)過程使用了_酶，以使植物原生質體相互分離，此處使用的溶液濃度較大，從而保證植物細胞會發生_，以保護原生質體不被破壞；在動物細胞培養技術中，使細胞分離開來的酶是_。(2)過程在化學藥劑_的作用下會發生細胞融合；動物細胞融合的方法與植物細胞不相同的是_。(3)過程_屬于脫分化，過程_屬于再分化，細胞發生分化的根本原因是_。(4)過程的

9、細胞工程技術是_，其培養時選用的材料通常是分生組織，原因是_。(5)植物體細胞雜交的研究在_方面，取得了巨大突破。解析：本題考查植物體細胞雜交的有關知識，意在考查考生的綜合運用能力。(1)過程使用含有纖維素酶和果膠酶的高濃度溶液處理植物細胞，使植物細胞發生質壁分離，從而保護原生質體不被破壞。在動物細胞培養技術中，使細胞分離開來的酶是胰蛋白酶或膠原蛋白酶。(2)過程是誘導原生質體融合，常用的化學促融劑是聚乙二醇(PEG)，而用滅活的病毒促進細胞融合是動物細胞融合特有的方式。(3)過程為脫分化，過程為再分化，愈傷組織在細胞增殖過程中，由于基因選擇性表達形成具有根、莖、葉的植物體。(4)過程為植物組

10、織培養。植物組織培養過程中，由于分生組織細胞分裂旺盛、全能性高，因此常作為組織培養的材料。(5)植物體細胞雜交可以克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙，實現不同物種間的基因交流。答案：(1)纖維素酶和果膠質壁分離胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)(2)聚乙二醇(PEG)可以使用滅活的病毒(3)基因的選擇性表達(4)植物組織培養全能性高，易培養形成愈傷組織(5)克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙62014南昌模擬人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請分析回答：(1)制備單克隆抗體過程中要用到_和_

11、技術。(2)在B淋巴細胞內DNA合成有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤所阻斷。而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有S途徑。利用DNA合成途徑不同的特點配制的HAT培養基含有多種成分，其中添加的_成分具有篩選雜交瘤細胞的作用。最終篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是_。培養雜交瘤細胞的條件包括：無菌、無毒的環境、營養、_、_。解析：(1)制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養和動物細胞融合技術。(2)利用DNA合成途徑不同的特點配制的HAT培養基含有多種成分，其中添加的氨基嘌呤具有篩選雜交瘤細胞的作用。雜交瘤細胞的特點是能無限增殖并分泌特異性抗體。培養雜交瘤細胞的條件包括：無菌、無毒的環境、營養、溫度和p

12、H、氣體環境。答案：(1)動物細胞培養動物細胞融合(2)氨基嘌呤能無限增殖并分泌特異性抗體溫度和pH氣體環境7矮牽牛是觀賞花卉，生產上常用組織培養繁殖，下表是在不同條件下矮牽牛不同部位組織培養結果。請結合實驗結果和有關知識回答。(1)培養基接種前需要對外植體進行_處理，培養基進行_處理，以防止污染。(2)從表中結果可知，選擇_作外植體，6BA濃度為_，NAA濃度為_時可以獲得大量的無根試管苗。(3)培養基中，6BA屬于_類生長調節劑，NAA屬于_類生長調節劑。無根試管苗在移栽前需要誘導生根，誘導生根的培養基中一般不加入_(填“6BA”或“NAA”)，并且需要降低培養基中_濃度，以便提高試管苗的

13、自養能力。解析：為了防止在培養過程中雜菌的污染，需對外植體進行消毒處理，對培養基進行滅菌處理。由表中信息知，選擇葉或莖尖作外植體，6BA濃度為2 mgL1，NAA濃度為0.2 mgL1時，可以獲得大量無根試管苗，結合植物組織培養技術可知，6BA屬于細胞分裂素類生長調節劑，NAA屬于生長素類生長調節劑。誘導生根的培養基中一般不加入6BA，為提高試管苗的自養能力，需降低蔗糖濃度，降低試管苗對蔗糖的依賴性。答案：(1)消毒滅菌(2)葉或莖尖2 mgL10.2 mgL1(3)細胞分裂素生長素6BA蔗糖8克隆技術是人類醫學科學史上的一個里程碑，在于其為人類認識自身奧秘和紛繁復雜的生物界提供了銳利武器并展

14、示了廣闊前景?！爸委熜钥寺　敝赴鸦颊唧w細胞移植到去核卵母細胞中形成重組胚，把重組胚體外培養到囊胚，然后從囊胚內分離出ES細胞，獲得的ES細胞使之定向分化為所需的特定細胞類型(如神經細胞、肌肉細胞和血細胞)，用于替代療法。下圖所示為人類“治療性克隆”的大概過程，請據圖作答。 (1)過程A表示_，是目前實現體細胞克隆的關鍵技術，該技術的主要操作是應用患者的體細胞作為核供體，由細胞提供_，進行人工重組。 (2)經過程B得到的結構中，是未分化的細胞，因而這些細胞被認為是胚胎干細胞。在體外培養條件下，胚胎干細胞具有增殖能力并保持_狀態。(3)在進行C過程時，通常在合成培養基中加入適量血清，其原因是_。細胞培養應在含5%CO2的恒溫培養箱中進行，CO2的作用是_。(4)“治療性克隆”的結果說明高度分化的體細胞的核仍然具有_。相同的胚胎干細胞，“克隆”的結果各種各樣，如有的是神經細胞，有的是血細胞，有的是肌肉細胞，究其本質原因是_的結果。解析：本題考查與治療性克隆有關的核移植、動物細胞培養及胚胎干細胞的有關問題。(1)A過程為將供體的體細胞