1、    連環素、在哮喘豚鼠模型中的表達變化        上皮鈣粘附素（E-cadherin，E-cd）與連環素(catenin)、結合構成的復合體是介導同型上皮細胞連接、維持呼吸道上皮細胞極性和完整性最重要的細胞粘附機制1。支氣管哮喘是氣道的慢性變應性炎癥，氣道粘膜上皮細胞脆性增加、上皮細胞脫落、基底膜暴露是支氣管哮喘的病理特征之一。為探討支氣管哮喘氣道粘膜上皮的這種改變是否與catenin 、的表達變化有關，我們應用免疫組化法觀察了catenin 、在支氣管哮喘模型中的表

2、達變化及地塞米松對其表達的影響。材料與方法健康豚鼠24只(雌雄不拘)，810周齡，體重200250 g(由本校實驗動物中心提供)。隨機分成3組：哮喘組(A組)、地塞米松干預組(B組)、 正常組(C組)，每組8只，A組于第1天腹腔注射10%卵蛋白(美國Sigma公司)1 ml，致敏2周后給于1%卵蛋白混懸液霧化吸入至出現腹肌收縮、呼吸困難等哮喘癥狀，每天1次，共7 d。B組處理同A組，不同之處是B組每次霧化誘喘前豚鼠腹腔注射地塞米松2 mg/kg。C組用生理鹽水代替卵蛋白和地塞米松。1周后以2% 戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉豚鼠、肺動脈插管快速灌注生理鹽水100200 ml至雙側肺呈白色，再接著肺動脈

3、持續灌注4% 多聚甲醛30 min，取下雙側肺組織，氣管內注入1.5 ml 4% 多聚甲醛，結扎氣管，至肺組織于4% 多聚甲醛中膨脹固定610 h，常規石蠟包埋切片。免疫組化SABC染色：采用武漢博士德公司SABC免疫組化試劑盒。取5 m厚石蠟切片，3% H2O2甲醇溶液30 min，微波修復抗原2 min×5次，抗原修復液室溫10 min，正常封閉山羊血清室溫30 min，分別滴加兔抗人、鼠catenin 、單克隆抗體(工作濃度均為1500，美國Sigma公司)、37 反應30 min，4 過夜，滴加生物素化二抗反應30 min，SABC復合物30 min，DAB顯色，蘇木素復染，

4、中性樹膠封片。結果判斷：以上皮細胞膜/漿染棕黃色為陽性，每張切片在光學顯微鏡下（×400倍）分別隨機計數500個氣管和細支氣管上皮細胞，計數陽性細胞百分率。數據統計分析：以±s 表示，采用SPSS 7.5統計軟件進行F檢驗。結果catenin 、在肺組織中的染色特征：正常組豚鼠氣管、細支氣管粘膜上皮細胞完整，catenin 、表達強陽性，其細胞定位主要在細胞膜上，在細胞連接的側面更為明顯，部分細胞胞漿亦有輕度著色，細胞輪廓清晰（1，2）。哮喘模型組氣道粘膜上皮細胞呈灶性脫落，氣管、細支氣管粘膜上皮catenin 、表達陽性細胞明顯減少、表達強度減弱，且彌散于胞漿內，細胞界線

5、模糊不清（3，4）。地塞米松干預組氣管、細支氣管上皮細胞catenin 、表達較哮喘組明顯增強（5，6）。各組catenin 、表達陽性率比較：見表1。 表1豚鼠呼吸道上皮細胞catenin 、陽性表達率（%，±s）組別鼠數catenin catenin 氣管細支氣管氣管細支氣管正常組890±489±687±488±4哮喘組855±760±752±754±6地塞米松組884±586±683±583±5注：與正常組比較 P<0.01，與地塞米松組比較 P<

6、0.01討論Catenin 、與E-cadherin復合體在介導同型上皮細胞之間粘附連接、維持上皮極性和完整性等方面起著重要作用。E-cd是一個跨膜蛋白，其胞膜內側區與catenin 、（緊密連接區還有catenin 參與）緊密結合，catenin 、起穩定E-cd于細胞膜上和介導細胞內信號傳導的功能，catenin 、的功能和表達變化均可影響E-cd在細胞膜上的穩定性，既而影響細胞的粘附功能。近年來有關catenin 、-E-cd復合體在腫瘤浸潤轉移以及炎癥損傷修復中的變化開始引起重視2，3。本組結果顯示，支氣管哮喘氣道上皮細胞出現損傷脫落時，氣管和細支氣管上皮細胞catenin 、的表達均

7、明顯降低，并脫離胞膜邊緣游離于胞漿之中，說明哮喘氣道上皮細胞損害涉及各級支氣管。而地塞米松干預后氣道上皮細胞catenin 、的表達均明顯上調，同時粘膜上皮層亦較完整。 以上結果表明，catenin 、的表達下調與支氣管哮喘氣道上皮細胞的損傷脫落密切相關。 1、2 分別為catenin、catenin 在正常豚鼠肺組織中表達SABC染色×4003、4分別為catenin、catenin 在哮喘豚鼠中表達SABC染色×4005、6 分別為地塞米松干預組catenin、catenin 的表達SABC色×400)作者單位：潘頻華（410008 長沙，湖南醫科大學湘雅醫院

8、呼吸科）吳鄂生（410008 長沙，湖南醫科大學湘雅醫院呼吸科）陳清蘭（410008 長沙，湖南醫科大學湘雅醫院呼吸科）尹本義（410008 長沙，湖南醫科大學湘雅醫院呼吸科）胡成平（410008 長沙，湖南醫科大學湘雅醫院呼吸科）陳瓊（410008 長沙，湖南醫科大學湘雅醫院呼吸科）參考文獻1王曦，李軍，吳人亮. 上皮鈣粘附素-連環素復合體功能調控的研究進展. 國外醫學分子生物學分冊，1998，20：42.2Efstathiou JA，Pignatelli M. Modulation of epithelial cell adhesion in gastrointestinal homeostasis. Am J Pathology , 1998，153:341.3Ozawa M，Kemler R. Altered cell adhesion activity by pervanad