1、食品添加劑棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)檢驗方法（二） a.4.3.2.1 辦法提要 棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)在的作用下，水解為維生素a醇，注入反相色譜柱上，用流淌相洗脫分別，紫外檢測器測定，外標法計算棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)含量。 a.4.3.2.2 參考色譜條件 a.4.3.2.2.1 色譜柱：c18液相色譜柱，125mm×4mm，粒徑5um，或同等性能的色譜柱。 a.4.3.2.2.2 流淌相：水=95：5(體積比)。 a.4.3.2.2.3 流速：1ml/min。 a.4.3.2.2.4 檢測波長：325nm。 a.4.3.2.2.5 進樣量：10ul。 a.4.

2、3.2.2.6 保留時光：維生素a醇的保留時光約為3min。 a.4.3.2.3 試樣溶液的制備 稱取約0.1g試樣，精確至0.0001g，置于100ml容量瓶中，用5ml戊烷快速溶解。加入40ml溶液。輕輕振搖，讓混合液在6065下水解反應10min(可采納水浴超聲處理)。冷卻至室溫，用異丙醇溶液稀釋至100ml，輕搖混勻防止產憤怒泡，得到試樣儲備液。移取適量試樣儲備液，用稀釋配制成每毫升約含100iu棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)的試樣溶液。 a.4.3.2.4 標準溶液的制備 稱取適量全反式醋酸維生素a標準品(稱樣量約含1×105iu全反式醋酸維生素a)，精確至0.0001g，

3、置于100ml容量瓶中，用5ml戊烷快速溶解。加入40ml四丁基氫氧化銨溶液。輕搖混勻，讓混合液在6065下水解反應10min(可采納水浴超聲處理)。冷卻至室溫，用異丙醇溶液稀釋至100ml，輕搖混勻防止產憤怒泡，得到標準儲備液。 移取5.0ml標準儲備液，置于50ml容量瓶中，用異丙醇稀釋定容至刻度，得到標準溶液。 a.4.3.2.5 測定 在a.4.3.2.2參考色譜條件下，分離對試樣溶液和標準溶液舉行測定，重復進樣兩次，分離記錄相應色譜圖中維生素a醇的峰面積值。按a.4.4結果計算中的公式(a.2)計算試樣中棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)的含量。 a.4.4 結果計算 a.4.4.1 紫

4、外分光光度法 棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)或醋酸維生素a含量w1以國際單位每克(iu/g)計，按公式(a.1)計算： 式中： a326試樣溶液在326nm處的吸光度； 1900棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)或醋酸維生素a的吸光度與含量之間的換算系數； v試樣溶液的稀釋體積，單位為毫升(ml)； m試樣的質量，單位為克(g)； 100換算系數。 試驗結果以平行測定結果的算術平均值為準。在重復性條件下獲得的兩次自立測定結果的肯定差值不大于算術平均值的2%。 a.4.4.2 液相色譜法 棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素a)含量w2以國際單位每克(iu/g)計，按公式(a.2)計算 式中： a1試樣溶液色

5、譜圖中維生素a醇的平均峰面積值； c用a.4.3.1紫外分光光度法測得的全反式醋酸維生素a標準品的含量，單位為國際單位每克(iu/g)； m2全反式醋酸維生素a標準品的稱樣量，單位為毫克(mg)； a2標準溶液色譜圖中維生素a醇的平均峰面積值； m1試樣的質量，單位為毫克(mg)。 試驗結果以平行測定結果的算術平均值為準。在重復性條件下獲得的兩次自立測定結果的肯定差值不大于算術平均值的10%。 a.5 酸值的測定 a.5.1 試劑和材料 a.5.1.1 。 a.5.1.2 。 a.5.1.3 -乙醇標準滴定溶液：c(koh)=0.1mol/l。 a.5.1.4 酚酞指示液：10g/l。 a.5

6、.2 分析步驟 精確稱取約2g試樣，精確到0.001g，溶于50ml由等體積和組成的混合溶劑中(該混合溶劑預先用氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液滴定至中性)，若試樣不能徹低溶解，則加熱到約90以確保試樣徹低溶解。加入0.5ml酚酞指示液，立刻用氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液滴定，滴定至溶液呈淡粉色并維持30s不褪色即為滴定盡頭。 a.5.3 結果計算 酸值(以koh計)w3以毫克每克(mg/g)計，按公式(a.3)計算： 式中： v試樣所消耗氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液的體積，單位為毫升(ml)； c氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液的實際濃度，單位為摩爾每升(mol/l)； m氫氧化鉀的摩爾質量，單位為毫克每毫摩爾(mg/mmol)