1、資料常用pH緩沖溶液的配制和pH值 · 常用pH緩沖溶液的配制和pH值常用pH緩沖溶液的配制和pH值序號 溶液名稱 配制方法 pH值1 氯化鉀-鹽酸 13.0 ml 0.2 mol/L HCl 與25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均勻后，加水稀釋至100 ml 1.72 氨基乙酸-鹽酸 在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g，加480 ml濃鹽酸，再加水稀釋至1L 2.3 3 一氯乙酸-氫氧化鈉 在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH，溶解完全后再加水稀釋至1 L 2.8 4 鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸 把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二

2、甲酸氫鉀溶液與6.0 ml 0.1 mol/L HCl混合均勻，加水稀釋至100 ml 3.6 5 鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與17.5 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml 4.8 6 六亞甲基四胺-鹽酸 在200 ml水中溶解六亞甲基四胺40 g，加濃HCl 10 ml，再加水稀釋至1 L 5.4 7 磷酸二氫鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氫鉀與23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml 6.8 8 硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0

3、.2 mol/L的硼酸-氯化鉀與4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻，加水稀釋至100 ml 8.0 9 氯化銨-氨水 把0.1 mol/L 氯化銨與0.1 mol/L 氨水以2：1比例混合均勻 9.1 10 硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化鉀與43.9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml 10.0 11 氨基乙酸-氯化鈉-氫氧化鈉 把 49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化鈉與51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻 11.6 12 磷酸氫二鈉-氫氧化鈉 把 50.0 ml 0.

4、05 mol/L Na2HPO4與26.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻，加水稀釋至100 ml 12.0 13 氯化鉀-氫氧化鈉 把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl與66.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml 13.0一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事項1藥品要有較好的質量 試劑分為優級純（保證試劑，Guaranteed reagent，GR）、分析試劑（Antalytical reagent，AR）化學純（Chemical pure，CP）和實驗試劑（Laboratory reagent，LR）等等。工業用的化學試劑，雜質較

5、多，只在個別情況下應用，如配洗液用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2藥品稱量要精確。3配制試劑用水應用新鮮的去離子水或雙蒸餾水，比電阻值在50萬歐姆以上，pH在5.57.0之間才可應用，在組織培養等特殊用途時應注意此項要求，配制一般化驗用溶液只要求用雙蒸餾水或去離子水。配好后的溶液，應立即除菌處理（如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質），以防雜菌生長。（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸緩沖液11/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液的配制：稱取磷酸二氫鉀（KH2PO4，AR）9.08g，用蒸餾水溶解后，傾入1 000ml容量瓶內，再稀釋至刻度（1 000ml）。21/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液的配制：稱

6、取無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸餾水溶解后，放入1 000ml容量瓶內，再加蒸餾水稀釋至刻度（1 000ml）。3按附表的比例，配制成不同pH值的緩沖溶液。附表1 磷酸鹽緩沖液配制法（單位：毫升）pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO4pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218

7、.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0UID18 帖子722 精華16 積分8 閱讀權限10 來自宜昌 在線時間49 小時 注冊時間2006-3-2 最后登錄2010-9-11

8、0;查看個人網站查看詳細資料· （三）0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na2HPO4（ml）0.15Mol/L NaH2PO4（ml）6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。NaH2PO4·H2O分子量=138.00

9、 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。（四）0.2Mol/L PB緩沖液附表3 0.2mol/L PB緩沖液配制法pH0.2 Mol/L Na2HPO4（ml）0.2Mol/L NaH2PO4（ml）5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na2HPO4·

10、;2 H2O溶液35.61g/LNa2HPO4·12 H2O溶液含71.64g/L0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/LNaH2PO4·2 H2O溶液含31.21g/L欲配0.1Mol/L PB緩沖液則在0.2Mol/L PB緩沖液的基礎上加H2O稀釋1倍即可。欲配制PBS液時，則在溶液中加0.85的NaCl溶液即可。（五）無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g（如為Na2HPO4·12H2O，則為2.89g）KH2PO4 0.2g將上述試劑依

11、次溶于1 000ml去離子水中，完全溶解后，115高壓滅菌10min15min，存在4冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細胞分散劑以及洗滌細胞培養物。UID18 帖子722 精華16 積分8 閱讀權限10 來自宜昌 在線時間49 小時 注冊時間2006-3-2 最后登錄2010-9-11 查看個人網站查看詳細資料（六）硼酸鹽緩沖液（Borate saline buffer）1硼酸（3BO3）0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g加水至1 000ml。2硼砂（Na2B4O7）0.05Mol/L硼砂：硼砂19.

12、07g加水至1 000ml。附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸緩沖液配制法pH0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）pH0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0（七）巴比妥緩沖液1pH8.2離子強度0.05Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥鈉 47.6g蒸餾水 3 000ml1.17N HCl 55.0ml（1.17 N HCl=193ml濃HCl加1 807ml蒸餾水） 將4.76g巴比妥鈉溶于3 000ml蒸餾水

13、。 加1.17 N HCl 55ml。 用HCl調節pH到8.2，并加蒸餾水至4 265ml。2pH8.4 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥 1.84g巴比妥鈉 10.30g加蒸餾水至 1 000.00ml3pH8.6 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥 1.66g巴比妥鈉 12.76g加蒸餾水 1 000.00ml（八）0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液 見表附表5附表5 0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液配制法pH0.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）pH0.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）233723379.108.952558.067.902

14、527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5（九）三羥甲基甲烷鹽酸緩沖液（TrisHCl緩沖液）不同pH，0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羥甲基氨基甲烷加ml0.1NHCl，加水稀釋至100ml（見下表）附表6 TrisHCl緩沖液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl

15、(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)233723379.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羥甲基氨基甲烷（Tris）分子量=121.1

16、40.2Mol/L三羥甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1 000ml。0.1NHCl：取HCl8.6ml，加水至1 000ml。UID18 帖子722 精華16 積分8 閱讀權限10 來自宜昌 在線時間49 小時 注冊時間2006-3-2 最后登錄2010-9-11 查看個人網站查看詳細資料· （十）0.5Mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液NaHCO3 3.70gNa2CO3 0.60g溶于600.00ml蒸餾水中即得。不用時塞緊瓶塞，以免吸收空氣中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。（

17、十一）甘油磷酸緩沖液1配制pH8.0磷酸緩沖液0.1Mol/L Na2HPO4 94.50ml0.1N NaH2PO4 5.50ml混合即可29份甘油與1份pH8.0磷酸緩沖液混合，即為甘油磷酸緩沖液。用途：用于免疫熒光試驗。（十二）Hanks液1貯存液NaCl 80.00gKCl 4.00gNa2HPO4·12 H2O 1.52gKH2PO4 0.60g葡萄糖 4.00g0.4酚紅液 50.00ml雙餾水加至 100.00ml115高壓滅菌15min，冰凍保存。2工作液貯存液 1份雙餾水 9份115高壓滅菌15min。臨用時用滅菌的5.6NaHCO3液調pH值至7.2左右（溶液呈橙

18、紅色）。（十三）萘（鈉）氏試劑（Nesslers reagent）配方1：氯化汞 6.0g碘化鉀 12.4g20NaOH 30ml加蒸餾水至 100ml配方2：碘化汞 11.5g碘化鉀 8g蒸餾水 50ml（完全溶解后）過濾，加20NaOH 50ml。用途：檢測溶液中氨離子。（十四）阿氏（Alsevers）液葡萄糖 2.05g檸檬酸鈉 0.80g氯化鈉 0.42g蒸餾水 100ml溶解后，以10%檸檬酸調節pH至6.1，過濾，分裝，10磅10min滅菌，4保存。（十五）青、鏈霉素混合液（簡稱SP液或雙抗液）青霉素（40萬U） 5支鏈霉素（200萬g） 1支分別溶于100ml滅菌無離子水中或共同

19、溶于200ml滅菌無離子水中，混合后分裝小瓶，置-10-20冰箱保存備用（1萬單位g/ml）。臨用時，按1%的量加入營養液或其他溶液中，最后濃度是青霉素100U/ml，鏈霉素100ug/ml。（十六）洗液（清潔液）配方1：重鉻酸鉀 150g蒸餾水 300ml濃硫酸 3 000ml將重鉻酸鉀加入蒸餾水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩堝中加熱溶解，然后慢慢加入濃硫酸，邊加邊攪拌，見發熱過劇則稍停，冷卻后再繼續加。此為強洗液。盛清潔液的容器要堅固，上加厚玻璃蓋，操作時要穿橡皮圍裙、長統膠靴、戴上眼鏡和厚膠皮手套，以保安全。洗液一旦變綠，表示鉻酸已經還原，失去了氧化能力，不宜再用。如將這樣洗液加

20、熱，再加適量重鉻酸鉀，又可重新使用。配方2：濃硫酸 50%蒸餾水 50%重鉻酸鉀 5%此為中等強度洗液。配方3：重鉻酸鉀 100g蒸餾水 1 000ml加熱溶解，冷卻后緩慢加入工業硫酸 100ml此液為弱洗液，為棕紅色。使用此液時，必須預先用熱肥皂水將玻璃器皿洗凈，經自來水沖洗，瀝干然后才能浸入，否則該洗液很快失效。緩沖液名稱及常用濃度                      緩沖pH

21、范圍                        主要物質分子量MES (2嗎啉代乙磺酸)                       &

22、#160; 5.5-6.7                            195.2Bis-Tris                  

23、60;                        5.8-7.2                         &

24、#160;  209.2HEPES                                            6.8-8.2  

25、                          238.3PIPES                       &

26、#160;                     6.1-7.5                            302.

27、4MOPS                                             6.5-7.9    

28、;                        209.3Tricine                        

29、0;                   7.4-8.8                             179.2TEA (三乙醇

30、胺)                               7.4-8.3                  &#

31、160;         149.2甘氨酸-鹽酸緩沖液（0.05mol/L）       2.2-5.0                      甘氨酸Mr=75.07鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液（0.05mol/L） 2.2-3.8 

32、0;                鄰苯二甲酸氫鉀Mr=204.23磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液                    2.2-8.0         

33、60;         磷酸氫二鈉Mr=141.98檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸緩沖液               2.2-6.5                      檸

34、檬酸Mr=192.06檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液（0.1mol/L）   3.0-6.6        檸檬酸Mr=192.06  檸檬酸鈉Mr=257.96乙酸-乙酸鈉緩沖液（0.2mol/L）          3.6-5.8             乙酸鈉Mr=81.76 &#

35、160;   乙酸Mr=60.05鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉緩沖液          4.1-5.9                     鄰苯二甲酸氫鉀Mr=204.23磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液（0.2mol/L）  5.8-8.0 磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液（1/15 molL） 4.92-8.18 磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液（0.05mol/L）     5.8-8.0      巴比妥鈉-鹽酸緩沖液(18)              6.8-9.6