1、腸道腺病毒的檢測和臨床意義1第一頁，共36頁2第二頁，共36頁 v 腸道病毒腸道病毒 ( (小小RNARNA病毒科病毒科) )v 輪狀病毒輪狀病毒v 腸道腺病毒腸道腺病毒 呼腸病毒科呼腸病毒科v 杯狀病毒杯狀病毒v 星狀病毒星狀病毒3第三頁，共36頁v2020世紀世紀5050年代初期，一位科學家對手術切除的人扁桃年代初期，一位科學家對手術切除的人扁桃體增殖腺小塊進行細胞培養時意外發現在培養的腺樣體增殖腺小塊進行細胞培養時意外發現在培養的腺樣組織內潛伏著一種未知的病毒，這種病毒可引起培養組織內潛伏著一種未知的病毒，這種病毒可引起培養的單層細胞發生病變。由于這種病毒被首先發現于腺的單層細胞發生病變

2、。由于這種病毒被首先發現于腺樣組織中，樣組織中，19561956年國際病毒命名委員會將這類病毒命年國際病毒命名委員會將這類病毒命名為腺病毒，名為腺病毒，19621962年正式命名為腺病毒科年正式命名為腺病毒科4第四頁，共36頁腺病毒血清型目前，已經發現有100多種類型的腺病毒可以感染人、哺乳動物和禽類，其中能感染人類的腺病毒（人腺病毒）就有50多型，把人腺病毒的41個血清型分為A-F 6個組：A-E組：各型病毒均能在人的組織細胞 (如腎細胞) 常規培養中增殖，稱為普通腺病毒；F組（40和41型）：是從糞便中發現，用常規細胞培養不能增殖的腺病毒，僅在選擇性細胞上生長，稱為腸道腺病毒。 5第五頁，

3、共36頁流行性腺病毒胃腸炎廣泛分布于世界各地，在小兒，發病情況僅次于輪狀病毒性腸炎。最小發病年齡為1月，絕大多數發生于3歲以下的嬰幼兒。Ad-40主要感染1歲左右嬰兒，Ad-41則感染稍大的幼兒，全年均可發病，但腺病毒性胃腸炎一般呈散發性。6第六頁，共36頁v腸道腺病毒通過消化道傳播，主要原因是因為樹突狀細胞缺乏腺病毒受體，不能感染附近淋巴結。 流行性7第七頁，共36頁v腺病毒胃腸炎的潛伏期約10天，主要表現為腹瀉，量少或多，呈水樣便或稀便，少數可排出粘液，病程4-8天，常伴嘔吐。部分患者有呼吸道癥狀，少數患者發熱，病程多自限，排毒時間約1周。某些患者失水較嚴重，個別重度失水者可死亡。 流行性

4、8第八頁，共36頁v各型腺病毒所致腹瀉持續時間不等，以腸腺病毒胃腸炎腹瀉時間最長，大多患者有嘔吐，持續1-2天，少數有發熱。非腸型腺病毒腹瀉患者發熱較多。約20腺病毒腸炎患者有呼吸道癥狀。 流行性9第九頁，共36頁10第十頁，共36頁 11第十一頁，共36頁培養特性：人類腺病毒無敏感動物，也不能在雞胚中生長。但能在來源于人的多種細胞培養中增殖，引起明顯CPE：細胞腫脹變圓、集聚成葡萄串狀，并可在感染的細胞核內形成嗜堿性包涵體。 生物學性狀生物學性狀12第十二頁，共36頁v腺病毒外膜無類脂質包膜，故能耐乙醚和氯仿等脂溶劑；并能耐受蛋白酶及膽汁的作用。但不耐熱在室溫中可存活10d以上，5630mi

5、n滅活。生物學性狀生物學性狀13第十三頁，共36頁v突出小結和六鄰體都必須插入細胞表面的受體分子，病毒才能被細胞攝入，被內體包裹。v在內體的酸性環境中降解，進入細胞質，將DNA釋放到細胞核內。v腺病毒利用自身的DNA聚合酶進行復制，先對一條親代鏈進行互補復制，取代第二條親代鏈，然后DNA聚合酶再對第二條親代鏈進行復制，因此，病毒 DNA的兩條鏈都是連續的。14第十四頁，共36頁15第十五頁，共36頁v因為腺病毒復制緩慢，感染細胞容易受到宿主防御系統的攻擊，因此腺病毒有1/4的基因組用來對付宿主的防御系統。 v通過釋放兩種E1B蛋白來抑制細胞的凋亡，使受感染的細胞能支持到病毒完成復制。致病性和免

6、疫性致病性和免疫性16第十六頁，共36頁v感染后期病毒復制組裝完成時，腺病毒產生病毒死亡蛋白給細胞致命一擊徹底釋放病毒。v腺病毒制造VARNA來免遭干擾素的破壞，通過結合PKR，使之失活，使病毒蛋白質合成。17第十七頁，共36頁v阻止MHC-I類分子在病毒感染細胞上表達以阻止CTL的攻擊。v腺病毒合成RID蛋白結合病毒感染細胞的死亡受體以逃避天然殺傷細胞的攻擊。v病毒利用自身的聚合酶進行基因組復制，增加了抗原漂移的機會。18第十八頁，共36頁腺病毒對腺病毒對呼吸道呼吸道、胃腸道、胃腸道、尿道尿道和和膀胱膀胱、眼、眼、肝臟肝臟等均可感染，人腺病毒約等均可感染，人腺病毒約1/31/3的已知血清型通

7、常的已知血清型通常與人類疾病相關，但一種血清型可引起不同的臨床疾患；相反，不同血清型也可引起同一種疾患與人類疾病相關，但一種血清型可引起不同的臨床疾患；相反，不同血清型也可引起同一種疾患。19第十九頁，共36頁呼吸道感染的典型癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎，同時伴有發熱、呼吸道感染的典型癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎，同時伴有發熱、寒戰、頭痛和肌肉寒戰、頭痛和肌肉 痛等，包括以下痛等，包括以下4 4種不同的綜合征：種不同的綜合征：1 1急性發熱性咽喉炎由急性發熱性咽喉炎由C C組病毒引起，出現咳嗽，鼻塞、發熱組病毒引起，出現咳嗽，鼻塞、發熱和咽喉部潰瘍等癥狀，這些表現難以與其他病毒引起的輕型呼和咽喉部潰瘍等癥

8、狀，這些表現難以與其他病毒引起的輕型呼吸道感染鑒別吸道感染鑒別2 2咽結膜熱多由咽結膜熱多由B B組腺病毒組腺病毒3 3和和7 7型所致，愈后尚好，一般無型所致，愈后尚好，一般無后遺癥。后遺癥。 3 3急性呼吸道疾病急性呼吸道疾病 多由腺病毒多由腺病毒4 4、7 7型引起，也可見于型引起，也可見于3 3型型4 4、肺炎、肺炎 腺病毒肺炎約占兒童期肺炎的腺病毒肺炎約占兒童期肺炎的10%10%，多由腺病毒，多由腺病毒3 3、7 7型引起；在青年人腺病毒肺炎的病死率為型引起；在青年人腺病毒肺炎的病死率為8%8%10%10%20第二十頁，共36頁腺病毒致輕型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎的并發癥。腺病毒

9、致輕型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎的并發癥。濾泡性結膜炎可由許多型腺病毒引起，類似于衣原體性結膜炎濾泡性結膜炎可由許多型腺病毒引起，類似于衣原體性結膜炎，而且為自限性。由腺病毒，而且為自限性。由腺病毒8 8、1919和和3737型引起的角結膜炎為型引起的角結膜炎為重型感染，具高傳染性，以急性結膜炎開始，擴至耳重型感染，具高傳染性，以急性結膜炎開始，擴至耳前淋巴結，隨后發生角膜炎。前淋巴結，隨后發生角膜炎。 胃腸炎胃腸炎許多腺病毒在腸道細胞中復制，隨糞便排出，但大多許多腺病毒在腸道細胞中復制，隨糞便排出，但大多血清型與胃腸道疾病無關。而血清型與胃腸道疾病無關。而4040型和型和4141型腺病毒可

10、引起嬰型腺病毒可引起嬰幼兒與年少（幼兒與年少（4 4歲以下）兒童的胃腸炎，致腹痛、腹瀉歲以下）兒童的胃腸炎，致腹痛、腹瀉。C C組腺病毒能引起某些嬰幼兒腸套疊。組腺病毒能引起某些嬰幼兒腸套疊。 21第二十一頁，共36頁腺病毒腺病毒1111、1212型能引起兒童急性出血性膀胱炎，尿中出現病毒型能引起兒童急性出血性膀胱炎，尿中出現病毒。3737型可引起女性宮頸炎和男性尿道炎，常由性傳播感染。在免型可引起女性宮頸炎和男性尿道炎，常由性傳播感染。在免疫功能低下者可引起偶發或嚴重的病毒感染，尤其在器官移植病人疫功能低下者可引起偶發或嚴重的病毒感染，尤其在器官移植病人中發生嚴重呼吸道感染和病毒性肝炎，多由

11、中發生嚴重呼吸道感染和病毒性肝炎，多由1 1、5 5和和7 7型腺病毒引起型腺病毒引起。艾滋病患者可感染多種血清型腺病毒，并能出現抗原性介于中間。艾滋病患者可感染多種血清型腺病毒，并能出現抗原性介于中間的雜合型毒株，而且常為致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的的雜合型毒株，而且常為致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的E1AE1A蛋白可反式激活蛋白可反式激活HIVHIV的轉錄，加速的轉錄，加速HIVHIV的復制。臨床發現的復制。臨床發現37%37%的艾滋病患者病毒性腹瀉是由腺病毒所致。的艾滋病患者病毒性腹瀉是由腺病毒所致。 22第二十二頁，共36頁免疫性免疫性腺病毒感染后，產生特異性抗體，對同型

12、病毒的感染有保護作用，免疫力持久。 致病性和免疫性致病性和免疫性23第二十三頁，共36頁24第二十四頁，共36頁v病原分離培養后, 應用亞屬特異的免疫熒光測定法、放射免疫測定、ELISA、DNA雜交等進行腺病毒亞屬的鑒定。再應用型特異性血清進行中和試驗。v缺點：不僅費時費力, 結果也不夠理想25第二十五頁，共36頁 病毒分離病毒分離：標本（患者咽喉、眼分泌物、糞便等） 敏感細胞 CPE 分離株為抗原，用抗病毒診斷血清作CF試驗，確定是否為腺病毒；用已知腺病毒型特異性免疫血清做NT試驗可定型。 亦可用直接或間接免疫熒光方法，檢測臨床診斷疑為腺病毒肺炎的嬰幼兒鼻咽部脫落細胞中的腺病毒抗原。微生物學

13、檢查法微生物學檢查法 26第二十六頁，共36頁 采取患者早期和恢復期雙份血清做CF試驗、HI試驗及NT試驗。恢復期血清抗體滴度比早期增長4倍以上有診斷意義。其中CF試驗最為常用。微生物學檢查法微生物學檢查法 27第二十七頁，共36頁ELISAELISA方法方法 檢測ADV抗原、抗體操作簡單、快速、特異性強，有助于臨床對疾病的早期明確診斷，結果判定用簡單的分光光度計，客觀準確，3 4h即可出結果，可大批檢測，陽性率遠優于病毒分離，亦優于血清學技術，適用于流行病學調查。IgM產生早于IgG，有利于早期診斷，IgG產生稍晚，雖不能早期診斷，但相當一部分在7一14天內檢測單份血IgG陽性再結合臨床也可

14、診斷。28第二十八頁，共36頁胸部胸部X X線及線及CTCT影像表現影像表現 肺內表現以多肺葉受累的肺實變為主要特征，其中團簇狀影尤為突出，此類團簇狀影有較明顯的特征性，常密度較高、邊緣模糊、強化均勻。肺外表現以胸膜增厚和少量胸腔積液為主，少數患者出現縱隔氣腫或氣胸。小氣道改變多見。29第二十九頁，共36頁vAlland 和 Saitoh-Inagawa 在六鄰體基因的- 管狀物形成 P1區設計了一對引物，應用 PCR 結合 RFLP, 即將腺病毒的特定序列用 PCR 擴增后, 其產物再用限制性內切酶進行酶切圖譜分析v優點：法分辨率高、重復性好、簡單快速30第三十頁，共36頁腺病毒抗原檢測試劑

15、盒（膠體金法）陽性率3.7% （12/322）平均年齡：8月齡，最大15月齡，最小4月齡。北京萬泰PCR-熒光探針（EV71、腸道病毒通用引物、柯薩奇病毒）陽性率12.5%（1/8） 湖南 圣湘31第三十一頁，共36頁32第三十二頁，共36頁腺病毒感染主要在冬春季流行，通過呼吸道和接觸傳播，其預防措施和預防其他呼吸道傳染病相似，主要是勤腺病毒感染主要在冬春季流行，通過呼吸道和接觸傳播，其預防措施和預防其他呼吸道傳染病相似，主要是勤洗手，勤消毒，避免接觸患者及其呼吸道飛沫；平常多飲水，多吃蔬菜和水果，注意鍛煉身體；室內多通風，洗手，勤消毒，避免接觸患者及其呼吸道飛沫；平常多飲水，多吃蔬菜和水果，注意鍛煉身體；室內多通風，保持清潔；冬春流行季節盡量少去人員密集的公共場所，外出時戴口罩，以防感染。保持清潔；冬春流行季節盡量少去人員密集的公共場所，外出時戴口罩，以防感染。防防 治治 原原 則則 預防預防33第三十三頁，共36頁 正在使用和試用的疫苗有甲醛滅活疫苗和減毒活疫苗。但因腺病毒對新生地鼠有致癌作用，人們對于疫苗的作用難免有疑慮。最近有人研制腺病毒衣殼亞單位疫苗，可解決疫苗的安全性問題。 目前尚無特效治療方法防防 治治 原原 則則