1、不同證候的雄激素性脫發患者受損頭皮的 病理特征及雄激素受體表達的規律【關鍵詞】 雄性激素受體摘要：【目的】探討雄性激素受體AR在雄激素性脫發AA患者 受損頭皮的表達特點和分布規律及其與中醫證候的關系.【方法】將80例中醫證型屬脾胃濕熱或肝腎缺乏兩型的 AA患者作為研究對象, 用免疫組織化學法檢測和比照其禿發區與正常非禿發區AR水平,并與32例正常人頭皮組織的AR水平進行異體對照研究.【結果】表皮 顆粒細胞層、棘層、基底層、真皮纖維母細胞、血管內皮細胞、神經 組織、立毛肌、汗腺、皮脂腺、毛根鞘、毛乳頭AR表達均為陽性.而表皮角質層、皮下脂肪、內毛根鞘、毛干細胞和毛母質細胞染色均 為陰性.AA患者

2、禿發區頭皮總AR陽性細胞百分率以及表皮、汗腺、 皮脂腺、毛根鞘、毛乳頭五個皮膚結構中的 AR陽性細胞百分率均高 于非禿發區及正常人P<001.且各皮膚結構AR值上下與禿發區毛 發稀稠程度存在相關性.脾胃濕熱組患者禿發區汗腺、皮脂腺中以及 總體AR陽性細胞百分率高于肝腎缺乏組P<005,而表皮、毛根鞘、 毛乳頭上的AR表達在兩組間差異無統計學意義P>005.【結論】AR 與AA發病有關,局部AR含量的異常是AA的病因之一；不同中醫證 候的禿發患者禿發區的病理特征以及 AR的數量也不同,脾胃濕熱型 患者頭皮禿發區的AR表達總的要比肝腎缺乏的患者高.關鍵詞：雄激素性脫發；禿發/中醫

3、病機；受體,雄激素；脾胃濕熱；肝腎缺乏雄激素性脫發(androgenetic alopecia,AA),又稱男性型脫 發、脂溢性脫發、彌散型禿發.迄今, AA的病因及發病機理已證實 與雄激素及其受體有關1-2.但對于大局部AA患者,其血液中的 雄激素水平并無異常3-5.因此,目前對受損頭皮局部雄激素受體 (androgen receptor , AR)數量的檢測已引起研究者的關注.AR屬于 爸體激素受體超家族,它是一種轉錄因子,只有AR存在的靶組織細胞才能使雄激素發揮其生物功能.然而AR在AA中的表達情況、AA的中醫證型與禿發區 AR的關系尚未見有報道,故我們采用免疫組織 化學法對80例AA患

4、者禿發區和非禿發區皮膚組織中 AR含量進行測 定,并與32例正常人頭皮組織進行對照,現報告如下.1資料與方法11 一般資料病例選自2001年3月至2002年1月間我院皮膚科診斷為 AA的患者,共80例,均為男性；年齡2149歲,平均3133歲；病 程120年,平均675年.對照組32例,來源于本院神經外科的手 術患者和頭部瘢痕植發患者的正常頭皮組織,共32例,均為男性；年齡2048歲,平均3088歲.80例AA患者中醫辨證分為兩型,脾胃濕熱組 47例,平均 年齡2919歲,病程平均586年；肝腎缺乏組33例,平均年齡3436 歲,病程平均813年.參照?臨床皮膚病學?6和?中藥新藥臨床研究指導

5、原那么? 第三輯7進行診斷和中醫辨證分型.13納入標準禿發組：1符合上述診斷標準；2年齡在1850歲,男 性；3近3個月未用性激素避孕藥物者；4近1個月未經任何脫發 治療；5依從性好者.對照組：1年齡在1850歲,男性；2近3個月未用性 激素避孕藥物者；3本人和家族均無AA 4依從性好者.14排除標準1頭部有其他皮膚疾患者；2有其他明顯內分泌功能失調 性疾病者；3其他疾病、藥物、理化因素等引起的脫發者；4不合 作或資料不全者.15取材部位禿發組取禿發區及后枕非禿發區全層頭皮,局部患者取前額及頭頂兩個稀疏程度不同的脫發區.對照組取后枕手術切口頭皮全 層,標本經蘇木素伊紅HE染色證實為正常頭皮組織

6、,其他條件同禿 發組.16試劑來源AR的抗體為即用型單克隆鼠抗人型 AR抗體、鏈霉菌抗生 物素蛋白一過氧化物酶SP試劑盒和聯苯二胺DAB顯色試劑盒均為 美國DAK公司產品.標本經40g/L的甲醛固定,石蠟包埋,切成3m厚,經脫 蠟、水化后,依次參加一抗(AR抗體)、生物素化的二抗、鏈親和素一 過氧化物酶溶液,以上各步驟間均以001mol/L磷酸鹽生理鹽水緩沖 液(PBS)(pH=72)清洗3次.用新鮮配制的DAB-H2O雙色,中性樹脂 封片.分別用陽性片作陽性對照,以PBSS沖液代替一抗作陰性 對照.18測定方法每張切片在Leica圖像分析儀系統上,采用光學顯微鏡觀 察,并以HE染色切片作對照

7、.陽性結果判定：細胞漿或細胞核出現 棕黃色顆粒為陽性,與陰性對照片染色一致的為陰性. 采用百分數法 計數：每個皮膚結構如表皮、汗腺等隨機取 466個高倍鏡視野,每 張涂片記數500個以上同類細胞,計算選取視野中組化染色陽性細胞 的百分比.19統計學處理方法采用SPSS100建立數據庫及統計分析,顯著性水平 =005. 2結果21光學顯微鏡下結果211 AR在表皮的分布角質層AR表達為陰性.顆粒細胞層、棘層、基底層 AR表達 均為陽性,AR陽性細胞率從顆粒層至基底層逐漸增多,在顆粒層與 棘層AR以細胞核陽性為主,基底層 AR那么以細胞漿陽性為主(見圖 1-a) o212 AR在真皮的分布纖維母細

8、胞、血管內皮細胞、神經組織、立毛肌 AR呈陽性 表達,皮下脂肪AR陰性.213 AR在汗腺的分布汗腺的排泄部、分泌部細胞核均有 AR的分布,且排泄部AR 陽性百分率高于分泌部見圖1-b.214 AR在皮脂腺的分布皮脂腺的基內幕胞和腺細胞都有高水平的AR表達見圖1-c,且以核陽性為主.同一標本中,兩種中醫證型比擬,脾胃濕熱 型AA患者的皮脂腺在形態上分葉增多、體積增大.215 AR在毛囊的分布外毛根鞘基層和棘層 AR染色均為陽性見圖1-d.以毛囊 縱切面觀察：毛囊漏斗部 AR陽性表達與表皮分布和含量根本一致. 峽部以下至毛小球部,外毛根鞘 AR陽性百分率逐漸減少.毛乳頭上 有較高水平的AR表達見

9、圖1-e,而內毛根鞘、毛干細胞和毛母質 細胞染色均為陰性.禿發區毛乳頭體積較非禿發區小,但細胞形態無 明顯變化.在禿發區和非禿發區,無論是縮小化的生長末期毛囊還是 休止期毛囊,AR的分布均一致.22 AR陽性百分率的比擬結果221禿發區、非禿發區和對照組 AR陽性百分率比擬表1顯示,禿發區總體以及禿發區表皮、汗腺、皮脂腺、毛根鞘、毛乳頭五個皮膚結構的 AR陽性百分率均高于非禿發區和正常 人對照組均P< 001,非禿發區總體以及上述部位 AR陽性百分率與 正常人對照組比擬,差異無統計學意義均P>005.表1禿發區、 非禿發區和對照組AR陽性百分率的比擬略222禿發區稀稠程度與AR關系

10、80例禿發組中有38例在前額與頭頂兩個禿發程度不同區域 各取了標本.這兩個區域的 AR陽性百分率比照見表2.經配對t檢 驗,結果顯示稀疏禿發區的總體 AR陽性百分率、表皮與皮脂腺的 AR 陽性百分率與稠密禿發區比擬,差異均有統計學意義.經相關性檢驗, 各皮膚結構AR值上下與禿發區毛發稀稠程度存在相關性,即頭發相 對稠密的禿發區AR值低,頭發相對稀疏的禿發區 AR值高.表2 38 例AA患者稀疏禿發區和稠密禿發區的 AR陽性百分率比擬略223不同中醫證型患者禿發區的 AR陽性百分率的比擬 脾胃濕熱型患者禿發區 AR陽性百分率在汗腺和皮脂腺比肝腎缺乏型高,差異有統計學意義分別為t=2358, P=

11、0021; t=2878, P=0005,但在表皮、毛根鞘和毛乳頭中的AR陽性百分率兩種證型差 異均無統計學意義P>005,見表3.而在非禿發區,五個皮膚結構 兩種證型間AR陽性百分率的差異均無統計學意義P >005o表3兩 種中醫證型禿發患者禿發區 AR陽性百分率比擬略3討論現代醫學研究說明,AA是一種雄激素依賴的常染色體顯性 多基因遺傳性禿發,雄激素睪酮,特別是游離活性睪酮以及二氫睪 酮、毛囊單位的AR酶的活性、遺傳易感性的禿發區頭皮在 AA發 病中起著重要的作用.雄激素與受體結合,形成雄激素一受體復合物,后者進入細胞核,結合到基因位點特異的激素反應元件上,從而刺激或介導毛發生

12、長的細胞內過程.國內鞏氏5對AA患者和正常人的血清睪酮水平進行了測定,發現兩組間差異無 統計學意義.Sawaya等8通過研究也發現局部皮膚受體量與血清 雄激素水平無相關性.因此,AA患者毛囊單位的雄激素及其受體水 平比血清更能反映AA本質.本研究通過對80例AA患者頭皮禿發區 AR檢測并與自體、異體比照研究發現：31AR在頭皮的分布規律本研究光鏡下的結果提示：禿發區、非禿發區以及正常人對 照組頭皮的表皮顆粒細胞層、棘層、基底層、汗腺、皮脂腺、毛根鞘、 毛乳頭均有AR的陽性表達,說明這些細胞是雄激素在皮膚的靶細胞. 表皮角質層、真皮膠原纖維、皮下脂肪、內毛根鞘、毛干細胞和毛母 質細胞染色那么均呈

13、陰性.本研究光鏡下的結果與藍長貴9卜Winter 10、Razel 11的研究結果一致.AR在皮膚的分布規律說明,雄激素能刺激真皮纖維母細胞和血管內皮細胞的增殖,對神經組織也有直接調節作用.汗腺上有 AR的陽性表達,證實小汗腺受 雄激素限制.本研究結果發現,皮脂腺細胞和毛乳頭細胞上有AR的高表達,這與國外的研究結果12-14 一致,說明雄激素能調節皮 脂腺的基內幕胞和腺細胞的增殖和脂肪生成,刺激皮脂腺的分泌,還能通過作用于毛乳頭細胞來限制毛發的生長.本研究還發現,生長期 和休止期毛乳頭細胞均有 AR的陽性表達,說明雄激素在這兩個毛發 生長階段均起作用.32頭皮中AR陽性百分率與AA關系本研究資

14、料說明,AA患者禿發區頭皮表皮、汗腺、皮脂腺、 外毛根鞘和毛乳頭的 AR陽性細胞百分率均較自身非禿發區頭皮以及 異體正常頭皮高.各皮膚結構 AR值上下與禿發區毛發稀稠程度存在 相關性,提示AA的發生是由于局部AR數量的異常引起的.皮脂腺、毛乳頭這兩個皮膚結構 AR陽性細胞率較其他皮膚 結構高,與 Sawaya 8、Hibberts 15的研究結果相同,揭示它 們對雄激素較其他皮膚結構更敏感.雄激素能調節皮脂腺的大小16,禿發區皮脂腺AR含量高 于非禿發區,這與AA患者頭部皮脂分泌較多的臨床表現有一定關聯. 毛乳頭細胞被認為是雄激素作用的位點, 雄激素一方面抑制毛乳頭的 生長發育而直接影響毛發生

15、長,使頭發提前進入休止期.另一方面使 毛乳頭產生旁分泌因子17,這些成份使胞外基質體積縮小,從而 使表皮與真皮間的接觸喪失,而表皮與真皮間的相互作用是毛發生長 必不可少的條件8,因此導致AA的發生.33 AA中醫辨證分型與禿發區AR的關系及臨床意義祖國醫學認為AA屬于“發蛀脫發、“蛀發癬范疇.中醫 學認為本病的主要病因病機為：平素血熱之體,復感風邪,郁久轉而 化燥,進而耗血傷陰,毛根失養,故發焦脫落；或脾胃運化失常,水 濕內聚化熱,致使濕熱上蒸巔頂,侵蝕發根白漿,引起頭發粘膩而脫 落；或稟賦缺乏,思慮過度,勞傷肝腎,而致精血虧虛、肝腎缺乏,那么發無生長之源,失于濡養而脫落根據以上病因病機,近年

16、來臨床研究逐漸趨向主張把本病分 為3型：血熱生風型、脾胃濕熱型和肝腎缺乏型.脾胃濕熱型患者的 頭發光澤發亮,皮脂溢出較其他兩證型多,我們的實驗結果顯示脾胃 濕熱型患者的皮脂腺分葉增多、飽滿,體積增大；同時該型患者禿發 區汗腺、皮脂腺的AR陽性細胞百分率較肝腎缺乏型患者高.脾胃濕 熱型AA患者禿發區的汗腺和皮脂腺細胞對雄激素比肝腎缺乏型更為 敏感.這在一定程度上提示了中醫辨證分型有其病理解剖結構變化的 根底.本研究結果提示,AA的發生與毛囊皮脂腺單位ARzk平升高 或AR對正常血清水平的雄激素的敏感性增加有關,這局部解釋了雄 激素在AA發病中的重要作用與只有少數患者的血清雄激素水平升高 這一事實

17、的矛盾.故推測 AA發病的可能機制為：活性雄激素與皮脂 腺、毛囊的AR結合后,產生激素一受體復合物進入細胞核內,影響 皮脂腺的代謝和毛發的生長.具體表現為促進皮脂腺的分泌,使頭部 油膩；抑制毛囊的代謝,造成頭發脫落,從而導致脫發的發生.研究 結果初步顯示,禿發區的顯微結構以及 AR水平與AA的中醫辨證分型 有一定的相關性,提示該研究對進一步探討中醫藥調節內分泌的機制 具有一定的意義.至于禿發區AR水平能否作為AA中醫辨證分型的客 觀依據,還有待擴大樣本量作進一步深入探討.(本文的完成得到歐愛華老師在數理統計方面的指導,在此 深表感謝.)參考文獻：1 Sinclair RFortnighty r

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