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文檔簡介
1、動物免疫學實驗動物免疫學實驗免疫血清學反應的一般特點免疫血清學反應的一般特點特異性與交叉性抗原和抗體的結合為弱能量的非共價健結合結合溫度應在004040范圍內,pH,pH在4 49 9范圍內抗原抗體反應的階段性 第一階段:無可見反應。 第二階段:可見階段,表現為凝集、沉淀、補體結合等。帶現象: 前帶現象 抗體過多; 后帶現象 抗原過多 實驗一實驗一 凝集反應凝集反應 抗原、抗體的比例適當抗原、抗體的比例與形成免疫復合物的大小前帶現象后帶現象免疫血清學反應的影響因免疫血清學反應的影響因素素1.電解質 2.溫度 3.酸堿度目的意義:目的意義: 熟悉玻板凝集試驗和試管凝集試驗的操作技術。 掌握凝集反
2、應中陰性和陽性結果的判定?;驹恚夯驹恚?細菌等顆粒性抗原與特異性抗體結合后,在有電解質的情況下,會出現肉眼可見的凝集塊,稱為凝集反應。直接凝集反應可分為玻片凝集與試管凝集。凝集試驗是疾病診斷及體內抗體水平測定的常用方法。凝集試驗可根據抗原的性質、反應的方式分為直接凝集試驗 ( (簡稱凝集試驗) )和間接凝集試驗。凝集試驗直接凝集試驗間接凝集試驗試管法玻片法間接凝集試驗反向間接凝集試驗分類分類:玻片法玻片法為一種定性試驗。此法簡便快速,適用于新分得細菌的鑒定或分型。也可用已知的診斷抗原懸液,檢測待檢血清中是否存在相應抗體。 試管法 為一種定量試驗,用已知抗原以檢測待測血清中是否存在相應抗
3、體和測定該抗體的含量,以協助臨床診斷或供流行病學調查。實驗步驟實驗步驟: :一、虎紅平板凝集試驗:1. 材料準備1.1 抗原、標準陽性血清、陰性血清。1.2 受檢血清應新鮮,無明顯蛋白凝塊,無溶血和無腐敗氣味。1.3 潔凈的玻璃板,其上劃分成4 cm2的方格。1.4 吸管或分裝器,適于滴加0.03 ml。1.5 牙簽或火柴桿,供攪拌用。2.操作方法2.1 將玻璃板上各格標記受檢血清號,然后加相應 血清0.03 mL。2.2 在受檢血清旁滴加抗原0.03 m L。2.3 用牙簽類小棒攪動血清和抗原使之混合。2.4 每次試驗應設陰、陽性血清對照。3. 判定3.1 在陰、陽性血清對照成立的條件下,方可對被檢血清進行判定。3.2 受檢血清在4 min內出現肉眼可見凝集現象者判為陽性(十),無凝集現象,呈均勻粉紅色者判為陰性(一)。玻板凝集與試管凝集的關系 玻板凝集 80l 40l 20l 10l 相當于試管凝集 1:
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