1、植物組織培養概念（廣義）又叫離體培養，指從植物體分離出符合需要的組織.器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進行培養以獲得再 生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。植物組織培養概念（狹義）指用植物各部分組織，如形成層薄壁組織.葉肉組織.胚乳等進行培養獲得 再生植株，也指在培養過程中從各器官上產生 愈傷組織的培養，愈傷組織再經過 再分化形成再生植物。組織培養的步驟一、培養基配制配制培養基有兩種方法可以選擇，一是購買培養基中所有化學藥品，按照需要自己配制；二是購買商品的混合好的培養基基本成分粉劑，如MSB5等。自己配制可以節約費用，但浪費時間、人力、且有時由于藥品的質量

2、問題，給實驗帶來麻煩。就目前國內的情況看，大部分還是自己配制。為 了方便起見，現以 MS培1、配制幾種母液（1）配制MS大量元素母液一般將大量元素分別配制成100倍的母液，使用時再分別稀釋100倍。分別稱取NH4NO3 165g KH2PO4 17gKN03 190g CaCI2 2H2O 44gMgS04 7H2O 37g各自配成1L的母液。倒入1L試劑瓶中，存放于冰箱中。（2）配制MS微量元素母液一般將微量元素配制成100倍母液。依次稱取KI 0.083g Na2MoO4 2H2O 0. 025gH3BO3 0.62g CuSO4 5H2O 0.0025gMnSO4 H2O 1.69g C

3、oCI2 6H2O 0.0025gZnSO4 7H2O 0.86g配成1L母液，倒入1L試劑瓶中，存放于冰箱中。CuSO4 5H2O和CoCl2 - 6H2O由于稱取量很小，如果天平精確度沒有達到萬分之一，可先配成調整液。分別稱取CuSO4 5H2O 0.05g CoCl2 6H2O 0.05g各自配成100ml的調整液，然后取 5ml就還有0.0025g的量。（3）配制MS有機母液一般配制成100倍MS有機母液。依次稱取肌醇10g 鹽酸硫胺素(VB1) O.OIg煙酸0.05g 甘氨酸0.2g鹽酸吡哆醇(VB6) 0.05g配成1L母液，倒入1L試劑瓶中，存放于冰箱中。(4) 配制MS鐵鹽母

4、液 一般配制成100倍MS鐵鹽母液。 依次稱取EDTA二辛鈉 3.73g FeS04 7H2O 2.78g配成1L母液，倒入1L試劑瓶中，存放于冰箱中。所以MS母液有5種大量元素母液，加上 MS微量元素母液、MS有機母 液和MS鐵鹽母液，共 8種母液。激素母液的配制各種生長素和細胞分裂素要單獨配制，不能混合在一起，生長素類一 般要先用少量95%的酒精或1當量的NaOH容解，細胞分裂素一般要先用1當量的鹽酸溶解，然后再加蒸餾水定容。一般取100mg配成100ml母液。2、配制培養基以配置1L MS培養基為例，按順序進行如下操作：(1 )先在燒杯中放入一些蒸餾水。(2) 分別取上面八種母液10ml

5、倒入。(3 )一般稱取30g蔗糖倒入，攪拌溶解。(4) 加蒸餾水用 量筒定溶至1L。(5) 按設計好的方案添加各種激素，由于激素的用量很小，而且激素 對組培植物的生長至關重要。所以有條件的話最好用微量可調移液器吸取， 減少誤差。(6) 用精密試紙或酸度計調整PH至5.7-5.8。(有條件的話使用酸度計，比較精確)可配1當量的HCL和1當量的NaOH用來調溶液PH值。1當量HCL配制：用量筒量取 8.3ml配成100ml溶液。1當量 NaOH配制：稱取 NaOH 4g配成100ml溶液。(7) 稱取5g左右瓊脂粉(質量好的瓊脂粉)，倒入上面配好的溶液中， 放在電爐上加熱至沸騰，直到瓊脂粉熔化。(

6、8) 稍微冷卻后，分裝入培養容器中。無蓋的培養容器要用封口膜或 牛皮紙封口，用橡皮筋或繩子扎緊。(9) 放入消毒滅菌鍋滅菌，滅菌20分鐘左右。(10 )滅菌后從滅菌鍋中取出培養基，平放在實驗臺上令其冷卻凝固。、滅菌滅菌是組織培養重要的工作之一。初學者要清楚有菌和無菌的范疇。 有菌的范疇是：凡是暴露在空氣中的物體，接觸自然水源的物體，至少它 的表面都是有菌的。依此觀點，無菌室等未處理的地方、超凈臺的表面、簡單煮沸的培養基、我們使用的刀、剪在未處理之前、我們身體的整個外 表及與外界相連的內表，如整個消化道、呼吸道，即我們呼出的氣體、培 養容器無論洗得多干凈等等都是有菌的。這里所指的菌，包括 細菌、

7、真菌、放線菌、藻類及其他微生物。菌的 特點是：極小，肉眼看不見。無處不在，無時不有，無孔不入。在自然條 件下忍耐力強，生活條件要求簡單，繁殖力極強，條件適宜時便可大量滋 生。無菌的范疇是：經高溫灼燒或一定時間蒸煮過后的物體，經其他物理 或化學的滅菌方法處理后的物體（當然這些方法必須已經證明是有效的）， 高層大氣、巖石內部、健康的動、植物的不與外部接觸的組織內部，強酸 強堿，化學元素滅菌劑等表面和內部都是無菌的。從以上可以看出：在地 球表面無菌世界要比有菌世界小的多。滅菌是指用物理或化學的方法，殺死物體表面和孔隙內的一切微生物 或生物體，即把所有生命的物質全部殺死。與此相關的一個概念是消毒， 它

8、指殺死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再發生危害作用，顯然經 過消毒，許多細菌芽抱、霉菌厚垣抱子等不會完全殺死，即由于在消毒后 的環境里和物品上還有活著的微生物，所以通過嚴格滅菌的操作空間（接 種、超凈臺等）和使用的器皿，以及操作者的衣著和手都不帶任何活著的 微生物。在這樣的條件下進行的操作，就叫做無菌操作。植物組織培養對無菌條件的要求是非常嚴格的，甚至超過微生物的培 養要求，這是因為培養基含有豐富的營養，稍不小心就引起雜菌污染。要 達到徹底滅菌的目的，必須根據不同的對象采取不同的切實有效的方法滅 菌，才能保證培養時不受雜菌的影響，使 試管苗能正常生長。常用的滅菌方法可分為物理的和化學的兩類

9、，即:物理方法如干熱（烘燒和灼燒）、濕熱（常壓或高壓蒸煮）、射線處理（紫外線、超聲波、微 波）、過濾、清洗和大量無菌水沖洗等措施；化學方法是使用升汞、甲醛、 過氧化氫、高錳酸鉀、來蘇水、漂白粉、次氯酸鈉、抗菌素、酒精化學藥 品處理。這些方法和藥劑要根據工作中的不同材料不同目的適當選用。1、培養基用濕熱滅菌培養基在制備后的 24小時內完成火菌工序。咼壓火菌的原理是：在密 閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高， 從而鍋內溫度也隨之增加。在O.IMPa的壓力下，鍋內溫度達 121C。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽抱。注意完全排除鍋內空氣，使鍋內全部是

10、水蒸氣，滅菌才能徹底。高壓 滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內均勻升溫，保證滅菌徹底。常用方法是：關閉放氣閥，通電后，待壓力上升到0.05MPa時，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關閉放氣閥。關閥再通電后，壓力表上升達到O.IMPa時，開始計時，維持壓力0.1-0.15MPa，20 分鐘。按容器大小不同，保壓時間有所不同，見表。該表所列數字是徹底滅 菌很保險的數字，如果容器體積較大，但是放置的數量很少，也可以減少 時間。三、接種接種時由于有一個敞口的過程，所以是極易引起污染的時期，這一時 期主要由空氣中的細菌和工作人員本身引起，接種室要嚴格進行空間消毒。 接種室

11、內保持定期用 1%-3%勺高錳酸鉀溶液對設備、墻壁、地板等進行搽洗。 除了使用前用紫外線和甲醛滅菌外，還可在使用期間用70%勺酒精或3%的來蘇兒噴霧，使空氣中灰塵顆粒沉降下來。無菌操作可按以下步驟進行：(1) 在接種4小時前用甲醛熏蒸接種室，并打開其內紫外線燈進行殺 菌；(2) 在接種前20分鐘，打開超凈工作臺的風機以及臺上的紫外線燈；(3) 接種員先洗凈雙手，在緩沖間換好專用實驗服，并換穿拖鞋等；(4) 上工作臺后，用酒精棉球搽拭雙手，特別是指甲處。然后搽拭工 作臺面；(5) 先用酒精棉球搽拭接種工具，再將鑷子和 剪刀從頭至尾過火一遍， 然后反復過火尖端處，對培養皿要過火烤干；(6) 接種時

12、，接種員雙手不能離開工作臺，不能說話、走動和咳嗽等；(7) 接種完畢后要清理干凈工作臺，可用紫外線燈滅菌30分鐘，若 連續接種，每5天要大強度滅菌一次。接種是將已消毒好的根、莖、葉等離體器官，經切割或剪裁成小段或 小塊，放入培養基的過程。現將接種前后的程序連貫地介紹。無菌接種步驟：(1) 將初步洗滌及切割的材料放入燒杯，帶入超凈臺上，用消毒劑滅 菌，再用無菌水沖洗，最后瀝去水分，取出放置在滅過菌的紗布上或濾紙上。(2) 材料吸干后，一手拿鑷子、一手拿剪刀或解剖刀，對材料進行適 當的切割。如葉片切成 0.5cm平方的小塊；莖切成含有一個節的小段。微 莖尖要剝成只含1-2片幼葉的莖尖大小等。在接種

13、過程中要經常灼燒接種 器械，防止交叉污染。(3 )用灼燒消毒過的器械將切割好的外植體插植或放置到培養基上。 具體操作過程(以試管為例)是：先解開包口紙，將試管幾乎水平拿著， 使試管口靠近酒精燈火焰，并將管口在火焰上方轉動，使管口里外灼燒數秒鐘。若用棉塞蓋口，可先在管口外面灼燒，去掉棉塞，再燒管口里面。 然后用鑷子夾取一塊切好的外植體送入試管內，輕輕插入培養基上。若是 葉片直接附在培養基上，以放1-3塊為宜。至于材料放置方法除莖尖、莖段要正放（尖端向上）外，其他尚無統一要求。接種完后，將管口在火焰 上再灼燒數秒種。并用棉塞，塞好后，包上包口紙，包口紙里面也要過火。四、培養培養指把培養材料放在培養

14、室（有光照、溫度條件、無菌）里，使之 生長，分裂和分化形成愈傷組織或進一步分化成再生植株的過程。1、培養方法（1）固體培養法即用瓊脂固化培養基來培養植物材料的方法。是現在最常用的方法。 雖然該方法設備簡單，易行，但養分分布不均，生長速度不均衡，并常有 褐化中毒現象發生。（2）液體培養法即用不加固化劑的液體培養基培養植物材料的方法。由于液體中氧氣 含量較少，所以通常需要通過攪動或振動培養液的方法以確保氧氣的供給， 采用往復式搖床或旋轉式搖床進行培養，其速度一般為50-100r/mi n ，這種定期浸沒的方法，既能使培養基均一，又能保證氧氣的供給。2、培養步驟（1 ）初代培養初代培養旨在獲得無菌材

15、料和 無性繁殖系。即接種某些外植體后，最 初的幾代培養。初代培養時，常用誘導或分化培養基，即培養基中含有較 多的細胞分裂素和少量的生長素。初代培養建立的無性繁殖系包括：莖梢、 芽叢、胚狀體和 原球莖等。根據初代培養時發育的方向可分為：1）頂芽和腋芽的發育采用外源的細胞分裂素，可促進使具有頂芽或沒有腋芽的休眠側芽啟 動生長，從而形成一個微型的多枝多芽的小灌木叢狀的結構。在幾個月內 可以將這種叢生苗的一個枝條轉接繼代，重復芽苗增殖的培養，并且迅速 獲得多數的嫩莖。然后將一部分嫩莖轉移到生根培養基上，就能得到可種 植到土壤中去的完整小植株。一些木本植物和少數草本植物也可以通過這 種方式來進行再生繁殖

16、，如月季、茶花、菊花、香石竹等等。這種繁殖方式也稱作微型繁殖，它不經過發生愈傷組織而再生，所以是最能使無性系 后代保持原品種的一種繁殖方式。適宜這種再生繁殖的植物，在采樣時，只能采用頂芽、側芽或帶有芽 的莖切段，其他如 種子萌發 后取枝條也可以。莖尖培養可看作是這方面較為特殊的一種方式。它采用極其幼嫩的頂 芽的莖尖分生組織作為外植體進行接種。在實際操作中，采用包括莖尖分 生組織在內的一些組織來培養，這樣便保證了操作方便以及容易成活。用靠培養定芽得到的培養物一般是莖節較長，有直立向上的莖梢，擴 繁時主要用切割莖段法，如香石竹、矮牽牛、菊花等。但特殊情況下也會 生出不定芽，形成芽叢。2）不定芽的發

17、育在培養中由外植體產生不定芽，通常首先要經脫分化過程，形成愈傷 組織的細胞。然后，經再分化，即由這些分生組織形成器官原基，它在構 成器官的縱軸上表現出單向的極性（這與胚狀體不同）。多數情況下它形 成芽，后形成根。另一種方式是從器官中直接產生不定芽，有些植物具有從各個器官上 長出不定芽的能力如矮牽牛、福祿考、懸鉤子等。當在試管培養的條件下， 培養基中提供了營養，特別是提供了連續不斷植物激素的供應，使植物形 成不定芽的能力被大大地激發起來。許多種類的外植體表面幾乎全部為不 定芽所覆蓋。在許多常規方法中不能無性繁殖的種類，在試管條件下卻能 較容易地產生不定芽而再生，如柏科，松科，銀杏等一些植物。許多

18、單子葉植物儲藏器官能強烈地發生不定芽，用百合鱗片的切塊就可大量形成不 定鱗莖。在不定芽培養時，也常用誘導或分化培養基。用靠培養不定芽得到的 培養物，一般采用芽叢進行繁殖，如非洲菊、草莓等。3）體細胞胚狀體的發生與發育體細胞胚狀體類似于合子胚但又有所不同，它也通過球形，心形，魚 雷形和子葉形的胚胎發育時期，最終發育成小苗。但它是由體細胞發生的。 胚狀體可以從愈傷組織表面產生，也可從外植體表面已分化的細胞中產生， 或從懸浮培養的細胞中產生。4）初代培養外植體的褐變外植體褐變是指在接種后，其表面開始褐變，有時甚至會使整個培養 基褐變的現象。它的出現是由于植物組織中的多酚氧化酶被激活，而使細 胞的代謝

19、發生變化所致。在褐變過程中，會產生醌類物質，它們多呈棕褐 色，當擴散到培養基后，就會抑制其他酶的活性，從而影響所接觸外植體 的培養。褐變的主要原因如下：a、植物品種 研究表明，在不同品種間的褐變現象是不同的。由于多 酚氧化酶活性上的差異，因此，有些花卉品種的外植體在接種后較容易褐 變，而有些花卉品種的外植體在接種后不容易褐變。因此，在培養過程中 應該有所選擇，對不同的品種分別進行處理。b、生理狀態由于外植體的生理狀態不同，所以在接種后褐變程度也有 所不同。一般說來，處于幼齡期的植物材料褐變程度較淺，而從已經成年 的植株采收的外植體，由于含醌類物質較多，因此褐變較為嚴重。一般來 說，幼嫩的組織在

20、接種后褐變程度并不明顯，而老熟的組織在接種后褐變 程度較為嚴重。c、培養基成分 濃度過高的無機鹽會使某些觀賞植物的褐變程度增加， 此外，細胞分裂素的水平過高也會刺激某些外植體的多酚氧化酶的活性，從而使褐變現象加深。d、 培養條件不當 如果光照過強、溫度過高、培養時間過長等，均可 使多酚氧化酶的活性提高，從而加速被培養的外植體的褐變程度。為了提高組織培養的成苗率，必須對外植體的褐變現象加以控制?？?以采用以下措施防止、減輕褐變現象的發生。1、 選擇合適的外植體一般來說，最好選擇生長處于旺盛的外植體， 這樣可以使褐變現象明顯減輕。2、 合適的培養條件 無機鹽成分、植物生長物質 水平、適宜溫度、及

21、時繼代培養均可以減輕材料的褐變現象。3、使用抗氧化劑 在培養基中，使用半胱氨酸、抗壞血酸等抗氧化劑能夠較為有效地避免或減輕很多外植體的褐變現象。另外，使用0.1%-0.5%的活性炭對防止褐變也有較為明顯的效果。4、連續轉移 對容易褐變的材料可間隔 2-24小時的培養后，再轉移到 新的培養基上，這樣經過連續處理 7-10天后，褐變現象便會得到控制或大 為減輕。(2) 繼代培養在初代培養的基礎上所獲得的芽、苗、胚狀體和原球莖等，數量都還 不夠，它們需要進一步增殖，使之越來越多，從而發揮快速繁殖的優勢。繼代培養是繼初代培養之后的連續數代的擴繁殖培養過程。旨在繁殖 出相當數量的無根苗，最后能達到邊繁殖

22、邊生根的目的。繼代培養的后代 是按幾何級數增加的過程。如果以2株苗為基礎，那么經 10代將生成210株苗。繼代培養中擴繁的方法包括：切割莖段、分離芽叢、分離胚狀體、分 離原球莖等。切割莖段常用于有伸長的莖梢、莖節較明顯的培養物。這種 方法簡便易行，能保持母種特性。培養基常是MS基本培養基；分離芽叢適于由愈傷組織生出的芽叢。培養基常是分化培養基。若芽叢的芽較小?？?先切成芽叢小塊，放入 MS培養基中，待到稍大時，再分離開來繼續培養。增殖使用的培養基對于一種植物來說每次幾乎完全相同，由于培養物 在接近最良好的環境條件，營養供應和激素調控下，排除了其他生物的競爭，所以能夠按幾何級數增殖。在快速繁殖中

23、初代培養只是一個必經的過程，而繼代培養則是經常性 不停的進行過程。但在達到相當數量之后，則應考慮使其中一部分轉入生 根階段。從某種意義上講，增殖只是儲備母株，而生根才是增殖材料的分 流，生產出成品。（3）繼代培養時材料的玻璃化實踐表明，當植物材料不斷地進行離體繁殖時，有些培養物的嫩莖、 葉片往往會呈半透明水跡狀，這種想象通常稱為玻璃化。它的出現會使試 管苗生長緩慢、繁殖系數有所下降。玻璃化為試管苗的生理失調癥。因為出現玻璃化的嫩莖不宜誘導生根，因此，使繁殖系數大為降低。 在不同的種類、品種間，試管苗的玻璃化程度也有所差異。當培養基上細 胞分裂素水平較高時，也容易出現玻璃化現象。在培養基中添加少

24、量聚乙 烯醇、脫落酸等物質，能夠在一定程度上減輕玻璃化的現象發生。呈現玻璃化的試管苗，其莖、葉表面無蠟質，體內的極性化合物水平 較高，細胞持水力差，植株蒸騰作用強，無法進行正常移栽。這種情況主 要是由于培養容器中空氣濕度過高，透氣性較差造成的，其具體解決的方 法為：a、 增加培 養基 中的溶質水平，以降低培養基的水勢；b、 減少培中含氮化合物的用量；c、增加光照d、 增加容器通風，最好進行CO2施肥，這對減輕試管苗玻璃化的現象 有明顯的作用；e、降低培養溫度，進行變溫培養，有助于減輕試管苗玻璃化現象發生；f、降低培養基中細胞分裂素含量，可以考慮加入適量脫落酸。3、生根培養當材料增殖到一定數量后

25、，就要使部分培養物分流到生根培養階段。 若不能及時將培養物轉到生根培養基上去，就會使久不轉移的苗子發黃老 化，或因過分擁擠而使無效苗增多造成拋棄浪費。根培養是使無根苗生根 的過程，這個過程目的是使生出的不定根濃密而粗壯。生根培養可采用1/2或者1/4MS培養基，全部去掉細胞分裂素，并加入食糧非的生長素（NAAIBA 等）。誘導生根可以采用下列方法a、將新梢基部浸入 50或100*10-6IBA 溶液中處理 4-8小時；b、 在含有生長素的培養基中培養4-6天c、直接移入含有生長素的生根培養基中。上述三種方法均能誘導新梢生根，但前兩種方法對新生根的生長發育 則更為有利。而第三種對幼根的生長有抑制

26、作用。其原因是當根原始體形 成后較高濃度生長素的繼續存在，則不利于幼根的生長發育。不過這種方 法比較可行。另外也可采用下列方法就可生根。1、延長在增殖培養基中的培養時間；2、有意降低一些增殖倍率，減少細胞分裂素的用量（即將增殖與生根合并 為一步）；3、切割粗壯的嫩枝在營養缽中直接生根，此方法則沒有生根階 段?？梢允∪ヒ淮闻囵B基制作，切割下的插穗可用生長素溶液浸蘸處理， 但這種方法只適于一些容易生根的作物。另外少數植物生根比較困難時，則需要在培養基中放置濾紙橋，使其 略高于液面，靠濾紙的吸水性供應水和營養，從而誘發生根。從胚狀體發育成的小苗，常常有原先已分化的根，這種根可以不經誘 導生根階段而生

27、長。但因經胚狀體發育的苗數特別多，并且個體較小，所 以也常需要一個低濃度或沒有植物激素的培養基培養的階段，以便壯苗生 根。試管內生根壯苗的階段，為了成功地將移植到試管外的環境中，以使 試管苗適應外界的環境條件。通常不同植物的適宜馴化溫度不同。如菊花， 以18-20C為宜。實踐證明植物生長的溫度過高不但會牽涉到蒸騰加強。而 且還牽涉到菌類易滋生的問題。溫度過低使幼苗生長遲緩，或不易成活。 春季低溫時苗床可加設電熱線，使基質溫度略高于氣溫2-3°C，這不但有利于生根和促進根系發達，而且有利于提前成活。移植到試管外的植物苗光強度應比移植前培養有所提高，并可適應強度較高的漫射光，（約4000

28、IX左右），以維持光合作用所需光照強度。但光線過強刺激蒸騰加強，會使 水分平衡的矛盾更尖銳。五、馴化移栽試管苗移栽是組織培養過程的重要環節，這個工作環節做不好，就會 造成前功盡棄。為了做好試管苗的移栽，應該選擇合適的基質，并配合以 相應的管理措施，才能確保整個組織培養工作的順利完成。試管苗由于是在無菌、有營養供給、適宜光照和溫度近100%勺相對濕度環境條件下生長的，因此，在生理、形態等方面都與自然條件生長的小 苗有著很大的差異。所以必須通過煉苗，例如通過控水、減肥、增光、降 溫等措施，使她們逐漸地適應外界環境，從而使生理、形態、組織上發生 相應的變化，使之更適合于自然環境，只有這樣才能保證試管

29、苗順利移栽 成功。從葉片上看，試管苗的角質層不發達，葉片通常沒有表皮毛，或僅有 較少表皮毛，甚至葉片上出現了大量的水孔，而且，氣孔的數量、大小也 往往超過普通苗。由此可知，試管苗更適合于高濕的環境生長，當將它們 移栽到試管 外環境時，試管苗失水率會很高，非常容易死亡。因此，為了 改善試管苗的上述不良生理、形態特點，則必須經過與外界相適應的馴化 處理，通常采取的措施有：對外界要增加濕度、減弱光照；對試管內要通 透氣體、增施二氧化碳肥料、逐步降低空氣濕度等。另外，對栽培馴化基質要進行滅菌是因為試管苗在無菌的環境中生長， 對外界細菌、真菌的抵御能力極差。為了提高其成活率，在培養基質中可 摻入75%的

30、百菌清可濕性粉劑 200-500倍液，以進行滅菌處理。1、移栽用基質和容器適合于栽種試管苗的基質要具備透氣性、保濕性和一定的肥力，容易 滅菌處理，并不利于雜菌滋生的特點，一般可選用珍珠巖、蛭石、砂子等。 為了增加粘著力和一定的肥力可配合草炭土或腐殖土。配時需按比例搭配， 一般用珍珠巖、蛭石、草炭土或腐殖土比例為1:1: 0.5。也可用砂子：草炭土或腐殖土為1： 1。這些介質在使用前應高壓滅菌?；蛴弥辽傩r烘烤 來消滅其中的微生物。要根據不同植物的栽培習性來進行配制，這樣才能 獲得滿意的栽培效果。以下介紹幾種常見的試管苗栽培基質。（1）河砂河砂分為粗砂、細砂兩種類型。粗砂即平常所說的河砂，其顆粒

31、直徑 為1-2mm。細砂即通常所說的面砂，其顆粒直徑為0.1-0.2nm。河砂的特點是排水性強，但保水蓄肥能力較差，一般不單獨用來直接栽種試管苗。（2）草炭土草炭土是由沉積在沼澤中的植物殘骸經過長時間的腐爛所形成，其保 水性好，蓄肥能力強，呈中性或微酸性反應，但通常不能單獨用來栽種試 管苗，宜與河砂等種類相互混合配成盆土而加以使用。（3）腐殖土腐殖土是由植物落葉經腐爛所形成。一種是自然形成，一種是人為造 成，人工制造時可將秋季的落葉收集起來，然后埋入坑中，灌水保濕的條 件下使其風化，然后過篩即可獲得。腐葉上含有大量的礦質營養、有機物質，它通常不能單獨使用。摻有腐殖土的栽培基質有助于植株發根。（4）容器栽培容器可用 6*6cm-10*10cm的軟塑料缽，也可用育苗盤。前者占地 大，耗用大量基質，但幼苗不用移栽，后者需要二次移苗，但省空間、省 基質。2、移栽前的準備移栽前可將培養物不開口移到自然