1、第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐第一節微生物的培養和應用第一節微生物的培養和應用(一一)微生物培養基的配制微生物培養基的配制欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐學習導航學習導航1.掌握培養基的用途和種類。掌握培養基的用途和種類。(重點重點)2能區別消毒和滅菌，會運用常用的消毒、能區別消毒和滅菌，會運用常用的消毒、滅菌方法。滅菌方法。(難點難點)3了解培養基的配制過程及培養基的配制原了解培養基的配制過程及培養基的配制原那么。那么。(重點重點)欄目欄目導引導引

2、第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐新知初探新知初探 思維啟動思維啟動繁衍繁衍代謝產物代謝產物天然培養基天然培養基欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(2)按物理狀態可分為液體培養基、半固體培按物理狀態可分為液體培養基、半固體培養基和養基和_培養基。培養基。_是最理想的是最理想的凝固劑。凝固劑。(3)按功能可分為基礎培養基、加富培養基、按功能可分為基礎培養基、加富培養基、_和鑒別培養基。培養基中加和鑒別培養基。培養基中加入鏈霉素，即可達到抑制入鏈霉素，即可達到抑制_的的生長，將生長，將_分離出來；培養基中添加分離出來；培養基中添加_，能區分大腸桿菌和產氣腸桿，能

3、區分大腸桿菌和產氣腸桿菌。菌。固體固體瓊脂瓊脂選擇培養基選擇培養基細菌和放線菌細菌和放線菌真菌真菌伊紅伊紅美藍美藍欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐1(1)天然培養基取材便利、營養豐富、配制簡天然培養基取材便利、營養豐富、配制簡便、實驗結果的重復性好。便、實驗結果的重復性好。()(2)各種培養基盡管配方不同，但一般都有水、各種培養基盡管配方不同，但一般都有水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子。無機鹽、碳源、氮源和生長因子。()(3)利用無氮培養基可篩選出固氮細菌，這屬于利用無氮培養基可篩選出固氮細菌，這屬于鑒別培養基的應用。鑒別培養基的應用。()(4)液體培養基、半固體培

4、養基及固體培養基的液體培養基、半固體培養基及固體培養基的主要區別在于是否加入瓊脂及加入的多少。主要區別在于是否加入瓊脂及加入的多少。()判一判判一判欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐二、消毒與滅菌二、消毒與滅菌消毒消毒滅菌滅菌概念概念用較用較_的物理或化學的物理或化學方法殺死物體上絕大多數方法殺死物體上絕大多數微生物微生物(包括包括_和有害微和有害微生物的生物的_)，實，實際上是部分滅菌際上是部分滅菌采用采用_的物的物理或化學方法使物體理或化學方法使物體內外所有的微生物永內外所有的微生物永遠喪失其生長繁殖能遠喪失其生長繁殖能力的措施力的措施常用常用方法方法煮沸消毒法、

5、巴氏消毒法、煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線化學藥劑消毒法、紫外線消毒法消毒法高溫滅菌，可分為高溫滅菌，可分為_滅菌和滅菌和_滅菌兩大類滅菌兩大類溫暖溫暖病原微生物病原微生物營養細胞營養細胞劇烈劇烈干熱干熱濕熱濕熱欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐高溫滅菌是利用高溫的致死作用，使微生物高溫滅菌是利用高溫的致死作用，使微生物的蛋白質和核酸等重要的生物大分子發生不的蛋白質和核酸等重要的生物大分子發生不可逆轉的變性，你知道高溫破壞的是蛋白質可逆轉的變性，你知道高溫破壞的是蛋白質的哪一結構嗎？的哪一結構嗎？提示：高溫使蛋白質內部的氫鍵斷裂，從而提示：高溫使蛋白質

6、內部的氫鍵斷裂，從而破壞其空間結構，但并不破壞肽鍵。破壞其空間結構，但并不破壞肽鍵。想一想想一想欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐三、細菌培養基的配制過程三、細菌培養基的配制過程1.配制過程配制過程配制培養液配制培養液_分裝分裝包扎包扎_。2.幾種天然有機營養物質的主要成分幾種天然有機營養物質的主要成分調節調節pH滅菌滅菌擱置斜面擱置斜面營養物質營養物質主要成分主要成分牛肉浸膏牛肉浸膏富含富含_、有機氮化、有機氮化合物、維生素、鹽等合物、維生素、鹽等蛋白胨蛋白胨富含富含_、一些、一些維生素和糖類維生素和糖類水溶性糖類水溶性糖類有機氮化合物有機氮化合物欄目欄目導引導引第

7、一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐3.細菌、放線菌、真菌生長的最適細菌、放線菌、真菌生長的最適pH分別為分別為_、_、_。營養物質營養物質主要成分主要成分酵母浸膏酵母浸膏富含富含_B類、有類、有機氮化合物和糖類機氮化合物和糖類維生素維生素6.57.57.58.55.06.0欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐2(1)培養基調節合適的培養基調節合適的pH后就可以接種使后就可以接種使用。用。()(2)牛肉膏只能為微生物提供碳源和氮源。牛肉膏只能為微生物提供碳源和氮源。()(3)制備細菌培養基操作順序為配制培養液、制備細菌培養基操作順序為配制培養液、調節調節pH、滅菌

8、、分裝。、滅菌、分裝。()判一判判一判欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐要點突破要點突破講練互動講練互動培養基的種類和用途培養基的種類和用途欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐標準標準培養基培養基類型類型配制特點配制特點主要應用主要應用物理性物理性質質固體培養固體培養基基加入瓊脂較加入瓊脂較多多菌種分離、鑒菌種分離、鑒定、計數定、計數半固體培半固體培養基養基加入瓊脂較加入瓊脂較少少菌種保存菌種保存液體培養液體培養基基不加入瓊脂不加入瓊脂工業生產、連工業生產、連續培養續培養欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐標標準準培養基

9、培養基類型類型配制特點配制特點主要應用主要應用化化學學組組成成合成培養合成培養基基由已知成分配制由已知成分配制而成，培養基成而成，培養基成分明確分明確分類、鑒定分類、鑒定天然培養天然培養基基由天然成分配制由天然成分配制而成，培養基成而成，培養基成分不明確分不明確工業生產工業生產半合成培半合成培養基養基部分天然物質和部分天然物質和部分化學試劑配部分化學試劑配制而成制而成兼有天然培兼有天然培養基和合成養基和合成培養基的優培養基的優點點欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐標準標準培養基培養基類型類型配制特點配制特點主要應用主要應用目的目的用途用途加富培加富培養基養基營養物質僅

10、適合一營養物質僅適合一種或一類微生物種或一類微生物能使某種微生物能使某種微生物的生長、繁殖比的生長、繁殖比其他微生物更加其他微生物更加迅速、逐漸淘汰迅速、逐漸淘汰其他微生物其他微生物鑒別培鑒別培養基養基添加某種指示劑或添加某種指示劑或化學藥劑化學藥劑菌種的鑒別菌種的鑒別選擇培選擇培養基養基添加添加(或缺少或缺少)某種某種化學成分化學成分菌種的分離菌種的分離欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐特別提醒特別提醒判定培養基的類型及所培養微生物的生活方判定培養基的類型及所培養微生物的生活方式的方法：式的方法：培養基中是否含有有機物：若有，則培養培養基中是否含有有機物：若有，則培

11、養的微生物為異養型微生物；若無，則培養的的微生物為異養型微生物；若無，則培養的微生物為自養型微生物。微生物為自養型微生物。是否含有瓊脂：若有，則該培養基為固體是否含有瓊脂：若有，則該培養基為固體培養基。培養基。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐是否含有一些特殊物質：如含有青霉素、是否含有一些特殊物質：如含有青霉素、高濃度鹽等，用于抑制不需要的微生物的生高濃度鹽等，用于抑制不需要的微生物的生長，而促進所需微生物的生長的培養基為選長，而促進所需微生物的生長的培養基為選擇培養基；如含有伊紅擇培養基；如含有伊紅美藍等，用于區分美藍等，用于區分不同微生物種類的培養基為鑒別培養基

12、。不同微生物種類的培養基為鑒別培養基。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐根據各類微生物的形態結構特點和新陳代謝類型，利用選擇培養基和鑒別培養基，結合顯微鏡鏡檢，以及菌落特征，可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸細菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。下面是分離篩選的方法步驟，請根據各個步驟的條件，填寫空格中的內容：欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐首先配制一系列不同性質的固體培養基，然首先配制一系列不同性質的固體培養基，然后進行高溫滅菌。再將上述微生物的混合液后進行高溫滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養基上培養。分

13、別接種到各種培養基上培養。(1)用無氮培養基可篩選出用無氮培養基可篩選出_。(2)用不含有機碳源的選擇性培養基可篩選出用不含有機碳源的選擇性培養基可篩選出_。(3)酵母菌的篩選需要在常規培養基中另加入酵母菌的篩選需要在常規培養基中另加入_。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(4)用加了較高濃度用加了較高濃度NaCl的培養基可選擇出的培養基可選擇出_，或者根據菌落的顏色呈現或者根據菌落的顏色呈現_色，將其挑色，將其挑取單獨培養。取單獨培養。(5)利用伊紅利用伊紅美藍培養基培養混合菌，菌落美藍培養基培養混合菌，菌落呈呈_色并帶有金屬光澤的是色并帶有金屬光澤的是_，挑取該菌

14、落單獨培養。結合顯微鏡鏡檢和進挑取該菌落單獨培養。結合顯微鏡鏡檢和進一步用伊紅一步用伊紅美藍培養基鑒別來確定。美藍培養基鑒別來確定。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(6)在無氧環境下培養混合菌，在無氧環境下培養混合菌，_可以生長。加入一可以生長。加入一定濃度的乳酸，使培養基定濃度的乳酸，使培養基pH充分降低，可抑充分降低，可抑制制_微生物的生長，利用菌落特征，結微生物的生長，利用菌落特征，結合顯微鏡鏡檢，選取生長優勢的菌落，即可合顯微鏡鏡檢，選取生長優勢的菌落，即可分離出分離出_。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【解析】若培養基中無氮，則

15、凡是不能自生【解析】若培養基中無氮，則凡是不能自生固氮的微生物均不能生存，題中所列微生物固氮的微生物均不能生存，題中所列微生物中，只有圓褐固氮菌能固氮，因而無氮培養基中，只有圓褐固氮菌能固氮，因而無氮培養基可選出該菌；若用不含有機碳的培養基則可選可選出該菌；若用不含有機碳的培養基則可選出自養型微生物；真菌的篩選可在培養基中加出自養型微生物；真菌的篩選可在培養基中加入青霉素；高濃度入青霉素；高濃度NaCl可選出耐鹽微生物，如可選出耐鹽微生物，如金黃色葡萄球菌；用伊紅金黃色葡萄球菌；用伊紅美藍培養基可鑒定美藍培養基可鑒定大腸桿菌；在無氧環境中，厭氧型及兼性厭氧大腸桿菌；在無氧環境中，厭氧型及兼性厭

16、氧型微生物才能生長，需氧型微生物將被抑制。型微生物才能生長，需氧型微生物將被抑制。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【答案】【答案】(1)圓褐固氮菌圓褐固氮菌(2)硝化細菌硝化細菌(3)青霉素青霉素(4)金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌桔紅桔紅(金黃金黃)(5)綠綠大腸桿菌大腸桿菌(6)大腸桿菌、乳酸細菌、酵母菌大腸桿菌、乳酸細菌、酵母菌大腸桿菌大腸桿菌和酵母菌和酵母菌乳酸細菌乳酸細菌欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐1.在培養微生物的培養基中加入某些物質能分在培養微生物的培養基中加入某些物質能分離出所需的微生物。下列選項中，前者是在離出所需的微

17、生物。下列選項中，前者是在培養基中加入的物質，后者是能被分離出的培養基中加入的物質，后者是能被分離出的微生物，其中正確的是微生物，其中正確的是()A氫氧化鈉，酵母菌氫氧化鈉，酵母菌B鹽酸，放線菌鹽酸，放線菌C適量的青霉素，霉菌適量的青霉素，霉菌D適量的伊紅適量的伊紅美藍，大腸桿菌美藍，大腸桿菌變式訓練變式訓練欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐解析：選解析：選C。氫氧化鈉、鹽酸分別為強堿、。氫氧化鈉、鹽酸分別為強堿、強酸，酵母菌和放線菌都不能生存，參與強酸，酵母菌和放線菌都不能生存，參與伊紅伊紅美藍的培養基是用來鑒定大腸桿菌，美藍的培養基是用來鑒定大腸桿菌，并不能分離大

18、腸桿菌。適量的青霉素對原核并不能分離大腸桿菌。適量的青霉素對原核生物有抑制作用，對真核生物的生命活動并生物有抑制作用，對真核生物的生命活動并不影響。不影響。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐1營養要素營養要素微生物的化學組成與其他生物大體相同，也是微生物的化學組成與其他生物大體相同，也是由由C、H、O、N、P、S等元素組成，其中等元素組成，其中C、H、O、N占細胞干重的占細胞干重的90%以上，這些元素以上，這些元素主要來自外界環境中的各種無機化合物和有機主要來自外界環境中的各種無機化合物和有機化合物。這些化合物歸納成碳源、氮源、生長化合物。這些化合物歸納成碳源、氮源、

19、生長因子、無機鹽和水這五大類營養要素。因子、無機鹽和水這五大類營養要素。培養基中各營養要素的作用培養基中各營養要素的作用及配制原則及配制原則欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐營養營養要素要素含義含義作用作用主要來源主要來源碳源碳源凡能提凡能提供所需供所需碳元素碳元素的物質的物質構成生物體細構成生物體細胞的物質和一胞的物質和一些代謝產物，些代謝產物，有些是異養生有些是異養生物的能源物質物的能源物質無機化合物：無機化合物：CO2、NaHCO3；有機化合物：糖類、有機化合物：糖類、脂肪酸、花生餅粉、脂肪酸、花生餅粉、石油等石油等氮源氮源凡能提凡能提供所需供所需氮元素氮元素的

20、物質的物質合成蛋白質、合成蛋白質、核酸以及含氮核酸以及含氮的代謝產物的代謝產物無機化合物：無機化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽；、銨鹽、硝酸鹽；有機化合物：尿素、有機化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐營養營養要素要素含義含義作用作用主要來源主要來源生長生長因子因子生長必不可少的微生長必不可少的微量有機物量有機物酶和核酸的組成酶和核酸的組成成分成分維生素、氨基維生素、氨基酸、堿基等酸、堿基等水水在生物體內含量很在生物體內含量很高，在低等生物體高，在低等生物體內含量更高內含量更高不僅是優良的溶不僅是優良的溶劑，而且可維持劑，

21、而且可維持生物大分子結構生物大分子結構的穩定的穩定無機無機鹽鹽為微生物提供除碳、為微生物提供除碳、氮元素以外的各種氮元素以外的各種重要元素，包括某重要元素，包括某些大量元素些大量元素細胞內的組成成細胞內的組成成分，生理調節物分，生理調節物質，某些化能自質，某些化能自養菌的能源，酶養菌的能源，酶的激活劑的激活劑欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐特別提醒特別提醒對異養微生物來說，含對異養微生物來說，含C、N的化合物既是的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要素成分時并不是單一方面的作用。素成分時并不是單一方面的作用。有些微生

22、物需添加特殊營養物質，原因是有些微生物需添加特殊營養物質，原因是它們自身缺乏合成這些物質所需要的酶或合它們自身缺乏合成這些物質所需要的酶或合成能力有限。成能力有限。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐2.配制原則配制原則(1)目的要明確目的要明確(根據微生物的種類、培養目的根據微生物的種類、培養目的等等)，如培養基可由簡單的無機物組成，生產，如培養基可由簡單的無機物組成，生產用培養基內可加入化學成分不明確的天然物用培養基內可加入化學成分不明確的天然物質，而分類、鑒定用培養基內必須加入已知化質，而分類、鑒定用培養基內必須加入已知化學成分的物質。學成分的物質。(2)營養要協

23、調：注意各種營養物質的濃度和營養要協調：注意各種營養物質的濃度和比例。比例。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(3)pH要適宜：各種微生物適宜生長的要適宜：各種微生物適宜生長的pH范圍范圍不同，如細菌、放線菌和真菌的最適不同，如細菌、放線菌和真菌的最適pH分別分別為：為：6.57.5、7.58.5和和5.06.0。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(2019鹽城高二檢測)分析有關微生物的資料，回答下列問題。(1)1982年澳大利亞學者從胃活檢組織中分離出幽門螺桿菌。幽門螺桿菌的遺傳物質集中分布的區域稱為_。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實

24、踐第一章無菌操作技術實踐(2)如圖如圖4支試管分別代表支試管分別代表4種微生物在半固體種微生物在半固體培養基培養基(瓊脂含量瓊脂含量3.5g/L)中的生長狀態，其中中的生長狀態，其中號試管代表幽門螺桿菌的生長狀態，由圖號試管代表幽門螺桿菌的生長狀態，由圖判斷，該菌在判斷，該菌在_條件下不能生長。條件下不能生長。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(3)下表是某培養基的配方。下表是某培養基的配方。將幽門螺桿菌接種到將幽門螺桿菌接種到pH適宜的該培養基中，適宜的該培養基中，置于置于37下培養一段時間后，在該培養基中

25、下培養一段時間后，在該培養基中幽門螺桿菌的數目比剛接種時幽門螺桿菌的數目比剛接種時_，主要，主要原因是原因是_。成成分分葡萄葡萄糖糖KH2PO4MgSO4NaClCaSO4CaCO3瓊瓊脂脂蒸餾蒸餾水水含含量量10 g0.2 g0.2 g0.2 g0.2 g5 g3.5 g1 L欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐(4)幽門螺桿菌形態如圖所示，該菌在人體中可幽門螺桿菌形態如圖所示，該菌在人體中可引起胃潰瘍等胃部疾病。幽門螺桿菌生長的最引起胃潰瘍等胃部疾病。幽門螺桿菌生長的最適適pH為為67，人體胃腔內，人體胃腔內pH在在12之間，但之間，但胃黏膜的黏液層靠近上皮細胞側胃

26、黏膜的黏液層靠近上皮細胞側pH為為7.4左右。左右。若幽門螺桿菌隨食物進入胃腔，結合其結構特若幽門螺桿菌隨食物進入胃腔，結合其結構特點以及能導致胃潰瘍的特性，推測該菌在胃內點以及能導致胃潰瘍的特性，推測該菌在胃內如何存活？如何存活？_。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【思路點撥】本題主要考查微生物培養的【思路點撥】本題主要考查微生物培養的相關知識，解答本題應明確以下幾點：相關知識，解答本題應明確以下幾點：了解幽門螺桿菌的生活習性。了解幽門螺桿菌的生活習性。了解培養基的營養成分組成。了解培養基的營養成分組成。區別原核生物和真核生物。區別原核生物和真核生物。欄目欄目導引

27、導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【解析】【解析】(1)幽門螺桿菌為原核生物，沒有核幽門螺桿菌為原核生物，沒有核膜包圍的細胞核，遺傳物質集中在擬核內。膜包圍的細胞核，遺傳物質集中在擬核內。(2)幽門螺桿菌生活在半固體培養基的中部，說幽門螺桿菌生活在半固體培養基的中部，說明它不能生活在氧氣濃度過高或過低的地方。明它不能生活在氧氣濃度過高或過低的地方。(3)培養基中缺乏氮源，幽門螺桿菌不能正常生培養基中缺乏氮源，幽門螺桿菌不能正常生活，數量會減少。活，數量會減少。(4)幽門螺桿菌進入胃腔后，可以先依靠鞭毛運幽門螺桿菌進入胃腔后，可以先依靠鞭毛運動至動至pH較高處緩沖，然后分泌蛋白中和

28、胃酸，較高處緩沖，然后分泌蛋白中和胃酸，提高提高pH，以便繼續生存和繁殖。，以便繼續生存和繁殖。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【答案】【答案】(1)擬核擬核(核區核區)(2)氧氣濃度過高或過低氧氣濃度過高或過低(3)少少缺少氮源缺少氮源(缺少氮源和生長因子缺少氮源和生長因子)(4)幽門螺桿菌進入胃腔后，首先依靠鞭毛運動幽門螺桿菌進入胃腔后，首先依靠鞭毛運動至至pH較高處緩沖，然后分泌蛋白中和胃酸，提較高處緩沖，然后分泌蛋白中和胃酸，提高高pH，以便繼續生存和繁殖，以便繼續生存和繁殖欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐變式訓練變式訓練2.微生

29、物在生命活動過程中，需要不斷從外界微生物在生命活動過程中，需要不斷從外界吸收營養物質。下列有關微生物營養物質的吸收營養物質。下列有關微生物營養物質的敘述，正確的選項是敘述，正確的選項是()A不同種類的微生物，對碳源的需要情況差不同種類的微生物，對碳源的需要情況差別不大別不大B無機氮源不能為微生物的生命活動提供能無機氮源不能為微生物的生命活動提供能源源C除水以外的無機物僅提供無機鹽除水以外的無機物僅提供無機鹽欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐D蛋白胨可以為微生物的生命活動提供碳源、氮蛋白胨可以為微生物的生命活動提供碳源、氮源、生長因子源、生長因子解析：選解析：選D。異養

30、型的微生物需要有機物作碳源，。異養型的微生物需要有機物作碳源，自養型微生物需無機物作碳源；無機物自養型微生物需無機物作碳源；無機物NH3不僅不僅能為硝化細菌提供能量，還能作為其氮源，不僅能為硝化細菌提供能量，還能作為其氮源，不僅能為其生命活動提供無機鹽，還能調節能為其生命活動提供無機鹽，還能調節pH等，故等，故前三項均錯。蛋白胨可為微生物提供碳源和氮源前三項均錯。蛋白胨可為微生物提供碳源和氮源，水解后的氨基酸還可為微生物提供生長因子。，水解后的氨基酸還可為微生物提供生長因子。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐項目項目概念概念常用方常用方法法應用的應用的范圍范圍消毒消毒

31、使用較為溫和的物使用較為溫和的物理或化學方法僅殺理或化學方法僅殺死物體上絕大多數死物體上絕大多數微生物微生物(包括病原微包括病原微生物和有害微生物生物和有害微生物的營養細胞的營養細胞)煮沸消煮沸消毒法：毒法：在在100 煮沸煮沸56 min一般物一般物品品滅菌與消毒滅菌與消毒欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐項目項目概念概念常用方法常用方法應用的范圍應用的范圍消毒消毒使用較為溫使用較為溫和的物理或和的物理或化學方法僅化學方法僅殺死物體上殺死物體上絕大多數微絕大多數微生物生物(包括病包括病原微生物和原微生物和有害微生物有害微生物的營養細胞的營養細胞)巴氏消毒法：巴氏消毒

32、法：7075 煮煮30 min或在或在80 煮煮15 min一些不耐高一些不耐高溫的液體，溫的液體，如牛奶如牛奶化學藥劑消毒化學藥劑消毒法法如用酒精擦如用酒精擦拭雙手、用拭雙手、用氯氣消毒水氯氣消毒水源等源等紫外線消毒法：紫外線消毒法：30 W紫外燈照紫外燈照射射30 min接種室接種室欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐項目項目概念概念常用方法常用方法應用的范圍應用的范圍滅菌滅菌使用強烈的使用強烈的物理或化學物理或化學方法使物體方法使物體內外所有的內外所有的微生物永遠微生物永遠喪失其生長喪失其生長繁殖能力繁殖能力灼燒滅菌：酒精灼燒滅菌：酒精燈火焰燈火焰接種工具的接種工

33、具的滅菌滅菌干熱滅菌：干熱滅菌：160170 下下滅菌滅菌12 h玻璃器皿、玻璃器皿、金屬工具的金屬工具的滅菌滅菌高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌：121 條件下，條件下，滅菌滅菌1530 min培養基及容培養基及容器滅菌器滅菌欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐 下面對發酵過程中滅菌的理解不正確的是()A防止雜菌污染B消滅雜菌C培養基和發酵設備都必須滅菌D滅菌必須在接種前【解析】滅菌是微生物發酵過程的一個重要環節。A項所述是滅菌的目的，欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐因為發酵所用的菌種大多是單一純種，整個發因為發酵所用的菌種大多是單一純種，整個發

34、酵過程不能混入其他微生物酵過程不能混入其他微生物(雜菌雜菌)，所以是正，所以是正確的；確的；B是錯誤的，因為滅菌的目的是防止雜是錯誤的，因為滅菌的目的是防止雜菌污染，但實際操作中不可能只消滅雜菌，而菌污染，但實際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。是消滅全部微生物。C是正確的，因為與發酵是正確的，因為與發酵有關的所有設備和物質都要滅菌；發酵所用的有關的所有設備和物質都要滅菌；發酵所用的微生物是滅菌后專門接種的。微生物是滅菌后專門接種的。D也是正確的，也是正確的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會把滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。所接菌種也殺死。【答案】【答案

35、】B欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐變式訓練變式訓練3.高溫滅菌的原理是高溫滅菌的原理是()A每種微生物生長的最適溫度都是一定的每種微生物生長的最適溫度都是一定的B微生物對于高溫環境不適應微生物對于高溫環境不適應C高溫破壞了微生物細胞內的蛋白質結構，高溫破壞了微生物細胞內的蛋白質結構，從而使其失去侵染性從而使其失去侵染性D高溫降低了環境中氧的濃度高溫降低了環境中氧的濃度欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐解析：選解析：選C。蛋白質是生物體生命活動的承擔。蛋白質是生物體生命活動的承擔者和體現者，核酸可控制生物體的代謝活動。者和體現者，核酸可控制

36、生物體的代謝活動。高溫可使蛋白質和核酸變性失活，從而影響微高溫可使蛋白質和核酸變性失活，從而影響微生物的生命活動。生物的生命活動。欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐實驗探究實驗探究專項突破專項突破【操作與實踐】【操作與實踐】細菌培養基的配制細菌培養基的配制欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【問題與探究】【問

37、題與探究】1.培養基滅菌后，為什么需要冷卻到培養基滅菌后，為什么需要冷卻到50左左右時，才能用來擱置斜面或倒平板？你用什右時，才能用來擱置斜面或倒平板？你用什么辦法來估計培養基的溫度？么辦法來估計培養基的溫度？欄目欄目導引導引第一章無菌操作技術實踐第一章無菌操作技術實踐【提示】瓊脂的凝固點為【提示】瓊脂的凝固點為40，溫度太高易，溫度太高易使培養皿破裂，低于使培養皿破裂，低于40，培養基已凝固，倒，培養基已凝固，倒不出，所以培養基滅菌后，需冷卻到不出，所以培養基滅菌后，需冷卻到50左右左右時才能用來倒平板，可以用手觸摸盛有培養基時才能用來倒平板，可以用手觸摸盛有培養基的試管，感覺試管的溫度下降到剛剛不燙手時的試管，感覺試管的溫度下降到剛剛不燙